张晓敏
- 作品数：9 被引量：24H指数：3
- 供职机构：云南农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项高层次科技人才培引工程国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 一步法RT-PCR同时检测CSFV和PRRSV方法的建立及应用被引量：1
- 2011年
- 猪瘟(CSF)和猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重危害云南养猪业的传染病,为了建立一种能快速诊断猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征混合感染的方法,根据NCBI上已发表的猪瘟病毒(CSFV)保守基因Erns和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)保守基因M基因的核苷酸序列,利用Oligo 6.0设计了2对特异性引物,经过PCR反应条件优化后,建立了CSFV和PRRSV一步法RT-PCR的检测方法。对云南部分地区猪高热病病料检测的结果表明,本方法具有良好的特异性、重复性和稳定性,为云南猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的快速检测提供了重要的技术支持。
- 李圣郑欢莉李红炳孔令富张晓敏钏有科孙永科杨玉艾
- 关键词：猪瘟病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒一步法RT-PCR
- 细胞凋亡机制与主要检测方法研究进展被引量：3
- 2013年
- 细胞凋亡是一种由基因调控的细胞自主性死亡过程,在维持动物机体内环境平衡中扮演着极其重要的角色,是目前生命科学和医学领域各专业研究的一个热点。本文概述了与细胞凋亡的作用机制相关的基因:半胱氨酸基天冬氨酸-特异性蛋白酶(cysteinyl aspartate specific protease,Caspase)、Bcl-2基因家族、P53蛋白等,以及细胞凋亡的检测方法,比如形态学观察法、DNA片段化检测、流式细胞仪分析(flow cytometry assay,FCA)和凋亡相关因子Cas-pase活性的检测。为进一步了解细胞凋亡在疾病中发挥的作用以及对细胞凋亡作出快速、准确的检测奠定基础。
- 张晓敏杨玉艾杜敏孙永科
- 关键词：细胞凋亡
- 微量元素锌的研究进展被引量：2
- 2014年
- 锌元素是维持机体正常生理功能和生化代谢所必需的微量元素，被称为“生命元素”。它不仅参与机体的各种代谢而且还在骨骼发育、生殖、免疫、生物膜稳定和基因表达等生理机能中担负重要角色。
- 杜敏杨玉艾张晓敏孙永科
- 关键词：微量元素锌生化代谢生命元素骨骼发育生理机能锌元素
- 鸡传染性喉气管炎病毒TaqMan real-time PCR检测方法的建立被引量：4
- 2012年
- 为建立鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)TaqMan Real-time PCR检测方法,本研究根据GenBank中登录的ILTV gB基因序列设计了2对引物与一条特异性TaqMan探针,通过对反应体系和反应条件的优化,特异性、敏感性以及重复性试验,证明该方法在核酸含量108拷贝/μL～101拷贝/μL范围内具有良好的线性关系;能够检测初始模板中10-3EID50的病毒核酸及16拷贝的标准品;与其它相关的鸡源病毒均无交叉反应,并且批内、批间变异系数均小于2%,具有良好的重复性。该检测方法的建立为ILTV的临床检测和定量分析提供了一种快速、准确的技术手段。
- 赵妍孔聪聪张晓敏崔红玉石星明赵晓岩薛美胡顺磊闫帅牛秀杰李巧玲王玫王云峰
- 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒GB基因TAQMANREAL-TIMEPCR
- 非典型性猪瘟病毒云南株/石门株嵌合病毒的构建和拯救被引量：2
- 2012年
- 为研究猪瘟病毒(CSFV)云南株(YN株)突变位点在致非典型性猪瘟中的作用,本研究在CSFV石门株全长感染性克隆的基础上,利用分子克隆技术,将CSFV YN株的1 510位～1 532位、2 471位～2 658位、3 152位～3 176位和11 785位～11 816位突变位点基因序列替换CSFV石门株的相应基因序列,构建出嵌合的CSFV感染性克隆质粒pAC-SM-YN。全基因测序鉴定后,体外转录得到病毒RNA,经脂质体转染PK-15细胞方法拯救出了嵌合病毒vSM-YN。经直接荧光染色、对突变位点RT-PCR以及ELISA检测表明拯救嵌合病毒vSM-YN传代稳定。本研究为研究CSFV结构蛋白、病毒致病机理、新型疫苗,尤其是非典型猪瘟的致病机理奠定了基础。
- 孙永科孔令富张晓敏郑欢莉林明星陈海婷杨玉艾
- 关键词：猪瘟感染性克隆嵌合病毒
- 一株鸡传染性喉气管炎病毒的分离鉴定及TK基因分析被引量：8
- 2012年
- 黑龙江省牡丹江市某养鸡场28周龄蛋鸡发生以呼吸困难、咳血和产蛋下降为主要症状的疾病。本研究利用特异性引物,从发病鸡喉头及其分泌物中扩增出鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gB基因的567 bp大小片段;将发病鸡喉头及分泌物处理后接种鸡胚,在鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上形成痘斑。病毒接种鸡胚肾细胞48 h后电镜下可以观察到典型的疱疹病毒粒子形态,并且该分离株能够与ILTV单克隆抗体发生特异性反应。动物回归试验显示,感染的SPF鸡出现典型ILT症状,并能够从发病鸡体内重新分离到ILTV,由此判定该分离株为ILTV,并将其命名为MDJ0442。根据NCBI登录的ILTV序列(HQ630064)设计引物,以MDJ0442基因组为模板,PCR扩增TK的基因片段,进行测序和序列分析。结果表明,与其他ILTV参考病毒株相比,TK基因的核酸同源性为99.62%。本研究可以为ILTV的流行病学调查和分子生物学研究提供参考。
- 孔聪聪赵妍张晓敏崔红玉薛美胡顺磊闫帅李巧玲牛秀杰王云峰
- 关键词：传染性喉气管炎病毒TK基因
- 禽传染性喉气管炎病毒gD蛋白单克隆抗体的制备被引量：2
- 2012年
- 为制备抗鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白gD的单克隆抗体(MAb),本研究通过原核表达gD重组蛋白,纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,经细胞融合筛选获得一株稳定分泌抗ILTV gD蛋白的杂交瘤细胞株,MAb亚型经鉴定为IgG1,轻链为κ链。Western blot结果显示,这株杂交瘤细胞分泌的MAb能够识别ILTV。ILTV gD蛋白的MAb的制备,为ILTV检测方法的建立奠定了基础。
- 胡顺磊赵妍崔红玉石星明王玫张晶薛美张晓敏闫帅孔聪聪李巧玲牛秀杰王云峰
- 关键词：传染性喉气管炎病毒原核表达单克隆抗体
- 鸡传染性喉气管炎病毒(江苏株)的分离与初步鉴定被引量：4
- 2012年
- 本研究从江苏省某养鸡场采集临床疑似鸡传染性喉气管炎(infectious laryngotracheitis,ILT)的病鸡喉头气管,接种鸡胚绒毛尿囊膜分离病毒,命名为LJS091151。以分离毒人工感染SPF鸡,于攻毒后d3出现了ILT的典型临床症状,剖检亦可见喉头气管黏膜充血肿胀、消化道空虚、黏膜充血等病理变化。根据GenBank发表的鸡传染性喉气管炎病毒(Infectiouslaryngotracheitis virus,ILT)gB、TK基因保守序列设计2对引物对分离株基因组DNA进行扩增和序列测定。序列分析表明,获得的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列与GenBank发表的序列相似性均在99%以上,证明了分离株LJS091151为鸡传染性喉气管炎病毒。
- 赵妍孔聪聪张晓敏崔红玉石星明蒿莲薇胡顺磊闫帅薛美牛秀杰李巧玲王玫刘胜旺王云峰
- 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒基因分析
