宁巍
- 作品数：9 被引量：15H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
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- 黄芪甲苷减轻镉致TM3细胞Cx43表达下降及缝隙连接细胞间通讯功能减退
- 2016年
- 目的探讨黄芪甲苷(As)对镉(Cd)致TM3细胞连接蛋白43(Cx43)表达改变及由Cx43介导的缝隙连接细胞间通讯(GJIC)功能改变的保护作用。方法用TM3细胞系作为研究对象,设对照组、As(20 mg/L)组、Cd(10μmol/L)组、Cd加As组,免疫组织化学方法分析Cx43阳性产物表达,荧光定量PCR检测Cx43 mRNA表达,Western blot检测Cx43蛋白表达,划痕标记染料示踪技术(SLDT)检测GJIC功能。结果与对照组相比,Cd组TM3细胞Cx43阳性产物表达的平均吸光度值(A_(OD))显著降低(P<0.01),Cx43 mRNA和蛋白表达下降(P<0.01),TM3细胞GJIC功能降低(P<0.01);Cd+As组TM3细胞Cx43阳性产物表达虽较对照组减弱但明显高于相应Cd组(P<0.01),Cx43 mRNA、蛋白表达及GJIC功能虽比对照组降低,但较Cd组高(P<0.01)。结论黄芪甲苷对镉致TM3细胞Cx43表达下降及GJIC功能减退有明显的拮抗作用。
- 王毅刘亚平宁巍吴余廖晓岗
- 关键词：黄芪甲苷镉缝隙连接蛋白43缝隙连接细胞间通讯
- 黄芪甲苷对镉致大鼠睾丸支持细胞相关蛋白表达及p38MAPK磷酸化的拮抗作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨镉对培养大鼠睾丸支持细胞相关蛋白表达、p38MAPK磷酸化及超微结构的影响和黄芪甲苷的保护效应。方法对照组、镉(50mol/L)处理组、镉(50mol/L)加黄芪甲苷(10mg/L)组的培养支持细胞用于超微结构观察、波形蛋白、E-钙粘连蛋白/-环连蛋白免疫组织化学及磷酸化p38MAPK检测。结果镉处理组支持细胞线粒体内室肿胀,脂滴堆积,内质网扩张和(或)空泡化,髓样结构形成,少许支持细胞出现凋亡,镉加黄芪甲苷组支持细胞超微结构改变较镉处理组轻;免疫组织化学显示镉处理组波形蛋白、E-钙粘连蛋白及-环连蛋白阳性产物较对照组明显减弱(P<0.05),镉加黄芪甲苷组阳性产物虽较对照组减少但明显高于镉处理组(P<0.05);镉处理组支持细胞内磷酸化P38MAPK阳性产物表达量较对照组明显增强,且有向细胞核移位趋势,镉加黄芪甲苷组阳性产物表达量明显少于镉处理组(P<0.05)。结论镉致大鼠睾丸支持细胞超微结构损伤、细胞骨架蛋白及粘连蛋白破坏并增强P38MAPK磷酸化;黄芪甲苷可拮抗镉的毒性,其保护效应可能与减少P38MAPK的磷酸化等有关。
- 毛胜艳廖晓岗宁巍姚志勇王毅范京川
- 关键词：镉黄芪甲苷支持细胞相关蛋白表达
- 镉对大鼠血睾屏障的损伤及黄芪甲苷的保护作用被引量：4
- 2014年
- 目的观察黄芪甲苷和SB203580对镉致大鼠血睾屏障破坏及相关蛋白表达改变的保护效应,探讨黄芪甲苷的保护机制。方法 21只成年雄性SD大鼠随机分为7组:单纯镉组[0.1%氯化镉腹腔内注射,1mg/(kg·d)],镉+黄芪甲苷组[镉剂量同上,同时注射黄芪甲苷,10mg/(kg·d)],镉+SB203580组[镉剂量同上,同时注射SB203580,100μg/(kg·d)],以上各组又分为连续处理5d和10d两个时间组,对照组腹腔内注射等量生理盐水。各实验和对照组动物均为3只。取睾丸做光学显微镜、电子显微镜观察以及免疫组织化学染色和Western blotting检测。结果 HE染色观察对照组支持细胞核染色较浅且不规则,镉组支持细胞内有空泡形成,镉+黄芪甲苷组与镉+SB203580组未见明显形态异常。免疫组织化学染色观察对照组闭锁小带-1蛋白(ZO-1)、紧密连接蛋白-11(claudin-11)阳性产物在生精上皮靠近基底部表达。镉组ZO-1、claudin-11阳性产物表达均显著降低(P<0.05),镉+黄芪甲苷组与镉+SB203580组阳性产物表达低于对照组但明显高于镉组(P<0.05)。超微结构观察对照组血睾屏障紧密连接形态完整,呈连续的电子密度较深致密线,镉组血睾屏障紧密连接及支持细胞均见不同程度破坏,镉+黄芪甲苷组与镉+SB203580组破坏程度较相应处理时间镉组为轻。Western blotting结果显示,镉组磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)水平明显增强(P<0.05),镉+黄芪甲苷组与镉+SB203580组pp38MAPK水平虽高于对照组,但较镉组明显减弱(P<0.05)。结论镉致大鼠血睾屏障ZO-1、claudin-11表达降低,紧密连接超微结构损伤,黄芪甲苷具有保护作用,其保护机制与抑制p38MAPK磷酸化有关。
- 宁巍廖晓岗王毅姚志勇毛胜艳
- 关键词：镉黄芪甲苷免疫组织化学免疫印迹法
- 高氧致SD大鼠年龄相关的肺损伤及可能机制被引量：2
- 2016年
- 目的·观察新生鼠和幼鼠高氧肺损伤的异同,并初步探索Rho/Rock信号通路在年龄相关高氧肺损伤中的作用。方法·将新生SD大鼠(新生鼠)与3周龄SD大鼠(幼鼠)分为新生鼠空气组、新生鼠高氧组、幼鼠空气组、幼鼠高氧组,建立动物模型直至第14日,统计生存率、体质量变化,取SD大鼠肺组织行病理学检查、损伤程度评分、羟脯氨酸含量测定、SOD与MDA检测,以及ROCK1、p-MYPT1、MYPT1表达的检测。结果·①新生鼠高氧组较新生鼠空气组、幼鼠空气组、幼鼠高氧组生存率明显降低,幼鼠空气组与高氧组生存率无明显差异;新生鼠高氧组较空气组、幼鼠高氧组较空气组体质量增长缓慢,且新生鼠高氧组较幼鼠高氧组体质量增长更为缓慢。②新生鼠高氧组、幼鼠高氧组出现啼组织损伤及纤维化改变,且新生鼠较幼鼠更为严重。③新生鼠高氧组较空气组、幼鼠高氧组较空气组MDA含量升高,SOD活力降低;与幼鼠高氧组相比,新生鼠高氧组SOD活力基础值较低且高氧后降低更为明显。④新生鼠高氧组较空气组、幼鼠高氧组较空气组肺组织ROCK1蛋白表达有上升趋势,p-MYPT1蛋白表达增强,且新生鼠高氧组较幼鼠高氧组p-MYPT1蛋白表达增强更为明显。结论·高氧肺损伤具有年龄依赖性,新生鼠对高氧耐受力明显弱于幼鼠,与其自身抗氧化能力弱有关;Rho/Rock信号通路活化程度的不同可能在年龄相关高氧肺损伤中发挥重要作用。
- 宁巍李静漆秀洁许峰方芳
- 关键词：高氧肺损伤年龄相关超氧化物歧化酶RHO/ROCK信号通路
- 黄芪甲苷和p38MAPK抑制剂对镉致大鼠睾丸损伤的保护效应被引量：3
- 2014年
- 目的：比较黄芪甲苷和p38MAPK抑制剂（SB203580）对镉致大鼠睾丸血睾屏障破坏及相关蛋白表达改变的保护效应。方法：雄性SD大鼠随机分为对照组、单纯镉组、镉加黄芪甲苷组和镉加SB203580组。取睾丸做H-E染色、免疫组织化学和图像分析以及血睾屏障超微结构观察。结果：H-E染色对照组支持细胞核染色较浅且不规则，镉组支持细胞内有空泡形成，镉加黄芪甲苷组与镉加SB203580组未见明显形态异常。免疫组织化学显示对照组波形蛋白阳性产物在支持细胞基室腔附近的胞质中表达，Cx43阳性产物在血睾屏障紧密连接处表达。镉组波形蛋白和Cx43阳性产物表达均显著降低，镉加黄芪甲苷组阳性产物表达低于对照组但明显高于镉组，镉加SB203580组结果与镉加黄芪甲苷组类似。超微结构观察，对照组血睾屏障紧密连接形态完整，呈连续的电子密度较深致密线，镉组血睾屏障紧密连接及支持细胞均见不同程度破坏，镉加黄芪甲苷组与镉加SB203580组破坏程度较相应镉组为轻。结论：黄芪甲苷和p38MAPK抑制剂对镉致大鼠血睾屏障破坏及相关蛋白表达改变具有相似的保护作用。
- 宁巍廖晓岗姚志勇王红范京川王毅
- 关键词：镉黄芪甲苷P38MAPK抑制剂连接蛋白43超微结构
- 镉对血睾屏障相关蛋白表达水平和紧密连接超微结构的影响及黄芪甲苷的保护作用
- 目的:观察黄芪甲苷和SB203580对镉致大鼠血睾屏障破坏及相关蛋白表达改变的保护效应，并初步探讨黄芪甲苷的保护机制。 方法:21只成年雄性SD大鼠随机分为7组:单纯镉组（0.1％氯化镉腹腔内注射，1mg/Kg·d），...
- 宁巍
- 关键词：镉离子黄芪甲苷SB203580
- 镉的生殖毒性与血睾屏障结构和功能的关系被引量：2
- 2015年
- 镉是一种主要的重金属污染物,能够通过消化道、呼吸道等途径进入人体并在体内积累,导致多器官损害。其中镉对雄性生殖系统的毒性作用尤为复杂,严重者可导致不育。因此,通过对镉毒性机制的深入探讨,寻找对抗药物的作用靶点,已成为当前该领域研究的热点。该文针对镉对血睾屏障相关连接蛋白的影响以及可能参与其中的信号通路作一综述。
- 宁巍廖晓岗刘亚平
- 关键词：镉生殖毒性血睾屏障丝裂原活化蛋白激酶
- 黄芪甲苷对镉致TM3细胞损伤的保护作用被引量：2
- 2014年
- 目的探讨黄芪甲苷(Asd)对镉(Cd)致TM3细胞损伤的保护。方法 MTT细胞活性实验筛选Asd拮抗Cd的最佳保护浓度;流式细胞作TM3细胞凋亡分析;免疫组织化学检测连接蛋白43(connexin43,Cx43)的表达;电镜观察TM3细胞超微结构。结果 24 h、48 h MTT实验:对照组与Asd组细胞成活率差异无统计学意义,Cd组细胞成活率明显减弱且随Cd浓度增加减弱越明显,Cd+Asd组细胞成活率明显高于相应Cd组,Asd的最佳保护浓度为20 mg/L。流式细胞分析:对照组与Asd组24 h细胞凋亡率差异无统计学意义,Cd组随Cd浓度增加凋亡率逐渐增加,Cd+Asd组凋亡率均低于相应Cd组(P<0.01)。免疫组织化学:Cd处理后TM3细胞Cx43阳性产物表达的平均光密度值明显降低(P<0.01)、平均灰度值明显升高(P<0.01),Cd+Asd组阳性产物表达虽较对照组减弱但明显高于相应Cd组(P<0.01)。电镜观察:Cd处理后TM3细胞超微结构破坏明显,Cd+Asd组超微结构破坏较相应Cd组为轻。结论 Cd引起TM3细胞损伤并降低Cx43的表达,Asd有较好的保护效果。
- 王毅宁巍刘亚平廖晓岗
- 关键词：黄芪甲苷镉连接蛋白43免疫组织化学电镜
- 急性染镉对大鼠心肌细胞闰盘超微结构和连接蛋白43表达的影响及黄芪甲苷的拮抗作用被引量：2
- 2013年
- 目的：观察急性染镉对大鼠心肌细胞闰盘超微结构和连接蛋白43（Cx43）表达的影响,探讨黄芪甲苷的保护机制.方法：SD大鼠随机分为正常组、镉处理组、镉加黄芪甲苷处理组,取心室肌组织,分别作光镜、透射电镜观察和免疫组织化学检测.结果：与正常组相比,镉组心肌细胞连接蛋白43的表达量明显降低,心肌纤维和闰盘超微结构破坏严重；而镉加黄芪甲苷组心肌细胞连接蛋白43的表达量较镉组显著增加,心肌纤维和闰盘超微结构的损伤也明显减轻.结论：镉能破坏心肌细胞闰盘超微结构,影响连接蛋白43的表达及分布,黄芪甲苷能在一定程度上拮抗镉对心肌细胞闰盘超微结构和连接蛋白43的毒性损伤.
- 姚志勇廖晓岗宁巍王红范京川李兆飞
- 关键词：黄芪甲苷镉心肌细胞连接蛋白43超微结构
