吴海洋
- 作品数：15 被引量：20H指数：2
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目山东省科技发展计划项目更多>>
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- 高抗体水平下H9N2亚型禽流感病毒对鸭的致病性研究
- 研究目的:探讨高抗体水平下H9N2亚型禽流感病毒对鸭的致病性。方法:在高抗体水平下，通过点眼、滴鼻、气管注射3种接种途径人工感染300日龄种鸭，观察种鸭的发病情况、症状及剖检变化;于感染后3、6、9d采血进行血液生化指标...
- 肖坡刁有祥李建侠吴海洋程艳丽
- 关键词：血液生化指标组织病理学间接免疫荧光
- 鼻气管鸟杆菌间接ELISA检测方法的建立及应用被引量：1
- 2011年
- 提取A型鼻气管鸟杆菌(ORT)外膜蛋白,经纯化后包被反应板,通过方阵滴定确定最佳抗原包被浓度、血清稀释倍数、兔抗鸡酶标二抗稀释倍数,建立了检测ORT抗体的间接ELISA方法。经方阵滴定确定最佳抗原包被质量浓度为11.85mg/L,血清样品稀释倍数为1:20,兔抗鸡IgG辣根过氧化物酶结合物最佳稀释倍数为1:1000,抗原抗体最佳结合时间为1h,血清与二抗最适反应时间为45min。试验结果确定的判定标准为:样品D_(490nm)≥0.639判定为阳性,D_(490nm)≤0.350判定为阴性,介于两者之间的为可疑。试验证明该方法具有良好的稳定性、重复性和特异性,将205份疑似ORT的鸡血清用本方法进行检测,其阳性检出率为11.7%(24/205)。
- 李瑶瑶刁有祥吴海洋
- 关键词：鼻气管鸟杆菌外膜蛋白间接ELISA
- 人工感染种鸭生殖系统新城疫病毒的检测
- 本研究旨在探明鸭新城疫病毒通过人工感染后在种鸭生殖系统中分布。应用本实验室分离的一株经鸭胚传递的新城疫病毒SDFCH株，对42只无新城疫病毒感染的28周龄樱桃谷种鸭进行人工感染试验，试验分A、B、C 3组，A组母鸭攻毒组...
- 李建侠刁有祥刘霞程彦丽肖坡国纪垒孙静吴海洋
- 关键词：人工感染试验种鸭新城疫病毒生殖系统RT-PCR检测
- 山东省鸡鼻气管鸟杆菌的分离与鉴定被引量：4
- 2010年
- 【目的】对山东省鸡鼻气管鸟杆菌进行分离鉴定。【方法】采集山东省不同地区有呼吸道症状的病(死)鸡,进行鼻气管鸟杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale,ORT)的分离,根据培养特性及生化试验和玻片凝集试验结果对分离的菌株进行鉴定;应用PCR方法对分离菌株16SrRNA基因的一段保守序列进行扩增,应用琼脂扩散沉淀试验(AGP)对分离菌株的血清型进行鉴定,并对分离株进行药敏试验。【结果】试验共分离到5株ORT,所有分离菌株均能扩增到1条长671bp的特异性片段,而阴性对照菌株的扩增结果为阴性;5株ORT分离菌株可分为3个血清型,其中血清A型3株、血清B型1株、血清D型1株;分离ORT菌株对羟氨苄青霉素、头孢曲松、丁胺卡那、氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星高度敏感。【结论】从山东省病死肉鸡中分离鉴定到5株ORT。
- 吴海洋刁有祥李瑶瑶李建侠孙静刘霞陈琳
- 关键词：鼻气管鸟杆菌
- 鼻气管鸟杆菌的分离鉴定及致病性研究
- 鼻气管鸟杆菌（ORT）是一种不运动、高度多形性、无芽孢的革兰氏阴性(G-)小杆菌。在血液琼脂上生长缓慢，5％-10％CO2条件下，于5％绵羊血液琼脂37℃恒温培养24h后可形成针尖大小、不溶血的灰白色圆形菌落。培养48h...
- 吴海洋
- 关键词：家禽养殖雏鸡感染鼻气管鸟杆菌菌株鉴定
- 高抗体水平下H9N2亚型禽流感病毒对鸭的致病性被引量：1
- 2013年
- 将60只种鸭免疫接种H9N2灭活疫苗,在高抗体水平下,通过点眼、滴鼻、气管注射3种接种途径人工感染300日龄种鸭,观察种鸭的发病情况、症状及剖检变化;于感染后3、6、9d采血进行血液生化指标检测;利用建立的RT-PCR方法检测各试验组和对照组的带毒情况;采集输卵管、肝脏、肺脏和气管等组织固定、切片、HE染色,观察各器官病理组织学变化;利用建立的IFA方法对H9N2在种鸭体内的分布进行研究。结果显示,3组接种H9N2亚型禽流感后,引起种鸭采食下降、流泪、排白色稀便等症状;总蛋白(TP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(AKP)的含量发生了显著变化;病理组织学变化以肝脏颗粒变性和空泡变性,肺脏广泛性出血和炎性细胞浸润,输卵管纤维蛋白渗出为特征;IFA阳性信号主要分布于气管、输卵管、肺脏、肝脏和胰腺等处;对照组精神状态良好,各项生理指标趋于正常,IFA未检测到阳性信号。结果表明,在高抗体水平下,H9N2亚型禽流感病毒也可通过眼结膜、鼻腔黏膜、气管黏膜等侵入机体导致鸭的发病。
- 肖坡刁有祥李建侠吴海洋程彦丽
- 关键词：H9N2血液生化指标组织病理学间接免疫荧光
- 鼻气管鸟杆菌间接ELISA检测方法的建立及应用
- 提取A型鼻气管鸟杆菌(ORT)外膜蛋白，经纯化后包被反应板，通过方阵滴定确定最佳抗原包被浓度、血清稀释倍数、兔抗鸡酶标二抗稀释倍数，建立了检测ORT抗体的间接ELISA方法。经方阵滴定确定最佳抗原包被浓度为11．85μg...
- 李瑶瑶刁有祥吴海洋
- 关键词：鼻气管鸟杆菌外膜蛋白间接ELISA分离纯化
- 人工感染种鸭生殖系统中新城疫病毒的检测
- 2012年
- 本研究旨在探明鸭源新城疫病毒(NDV)通过人工感染后在种鸭生殖系统中分布。应用本实验室分离的一株经鸭胚传递的NDV SDFCH株,对42只无NDV感染的28周龄樱桃谷种鸭进行人工感染试验,试验分母鸭接种强毒组,公鸭接种强毒组和对照组。强毒接种4 d后,每隔2 d每组各迫杀2只,采集母鸭卵巢、卵泡、输卵管组织,公鸭采集睾丸、输精管进行病毒分离鉴定,并利用RT-PCR方法进行病毒F基因的扩增与同源性分析。同时,以NDV F蛋白的单克隆抗体(MAb)为一抗,建立间接免疫荧光检测方法检测输卵管组织中NDV及病毒在输卵管的分布情况。结果表明采用RT-PCR方法能够在种鸭生殖系统各个组织中检测并重新分离到NDV;输卵管子宫部和蛋白分泌部纤毛柱状上皮的纤毛细胞和分泌细胞内有阳性荧光信号存在。结果表明人工感染的种鸭卵巢、卵泡、睾丸、输精管以及输卵管子宫部和蛋白分泌部纤毛柱状上皮的纤毛细胞和分泌细胞中均有NDV分布,病毒能否随蛋白分泌、精液的排泄进入种蛋传递给雏鸭还有待于进一步研究。
- 李建侠刁有祥孟凡生刘霞程彦丽孙静吴海洋
- 关键词：种鸭新城疫病毒生殖系统RT-PCR间接免疫荧光
- 鼻气管鸟杆菌的致病性研究
- [目的]探讨鼻气管鸟杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale，ORT)对肉雏鸡和SPF雏鸡的致病性。[方法]通过气管、消化道接种和肌肉注射接种途径人工感染肉雏鸡和SPF雏鸡，观察试验鸡的发病情...
- 吴海洋刁有祥刘霞杨建鹏肖坡
- 关键词：鼻气管鸟杆菌血液生化指标组织病理学间接免疫荧光
- 鼻气管鸟杆菌对SPF雏鸡的致病性
- 2012年
- 通过气管、消化道和肌肉注射接种鼻气管鸟杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale,ORT)人工感染SPF雏鸡,观察试验鸡的发病情况及症状,并检测各试验组和对照组的体质量;利用建立的PCR检测方法对试验组和对照组的排菌情况进行动态观察;于感染后不同时间随机剖杀试验组和对照组鸡只,采集心脏、肝脏、肺脏和气管等组织固定、切片、H.E.染色,观察各器官病理组织学变化,利用建立的IFA方法对ORT在雏鸡体内的分布进行研究,并进行血常规和血液生化指标检测。结果表明,ORT接种后,主要引起雏鸡的呼吸困难、咳嗽等症状,增重明显降低;病理组织学变化以肝脏、心脏组织细胞变性,气管和肺脏广泛性出血和炎性细胞浸润为特征;IFA阳性信号主要分布于肺脏和气管;从感染后2～8d一直可持续排菌;HGB、WBC、RBC、BUN和AST发生显著变化。这表明ORT感染主要引起雏鸡的呼吸系统病变,气管接种比消化道和肌肉注射接种对雏鸡致病性强,肺脏和气管是ORT侵害的主要靶器官。
- 吴海洋刁有祥刘霞杨建朋肖坡
- 关键词：血液生化指标组织病理学间接免疫荧光
