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不同时间预孵化对鸡胚体外发育的影响: 1998年; 本实验将预孵化０、５６、７２ｈ的鸡胚转移到受体壳中，按常规方法再孵化２１ｄ，三组的孵化率分别为０％（０／１２），３６．５％（４／１１）和５４．５％（６／１１），移壳前预孵化０ｈ鸡胚的孵化率明显低于预孵化５６ｈ和７２ｈ的鸡胚（Ｐ＜０．０１），表明鸡胚在蛋壳内的早期发育对其以后的进一步发育至关重要．实验还比较了预孵化５６ｈ和７２ｈ实验组与对照组种蛋的失重情况．预孵化５６ｈ实验组种蛋的失重明显高于对照组（Ｐ＜０．０５），结果表明移壳后孵化过程中水分的过多散失可能是导致鸡胚死亡的一个重要原因．; 吴燕燕李雪峰吴光明; 关键词：鸡胚体外培养

兔和牛卵母细胞核移植的研究被引量：1: 1994年; 通过显微操作，将１６～３２细胞期胚胎的单个卵裂球注入去核卵母细胞的卵周隙内，用适当电压（兔１６０Ｖ、牛１２０Ｖ）和脉冲时间的两次电脉冲诱导卵裂球与卵母细胞的融合；融合后的胚胎体外培养观察发育或移植到同步受体。体内成熟的免卵母细胞操作后存活率为９３．７％（１５０１／１６０２），融合率为９４．３％（１２８１／１３５９）。融合卵再用１６０Ｖ４０μｓ电脉冲电激一次，可显著提高其卵裂率（７５．９％比１８．２％，Ｐ＜０．０１）。用体外成熟的兔卵母细胞进行核移植，存活率和融合率分别为７８．５％（９５／１２１）和９５．７％（８８／９２），融合胚卵裂率为５１．４％（３７／７２）。初步表明体外成熟的兔卵母细胞可作为核移植的受体卵。此外，还尝试了用体外受精的牛胚胎和体外成熟的牛卵母细胞进行核移植，操作后存活率和融合率分别为９８．０％（５０／５１）和７５．５％（３７／４９），核移植胚的卵裂率为５４．１％（２０／３７）。; 李雪峰谭世俭吴光明金鹰谭丽玲卢克焕; 关键词：卵母细胞体外成熟核移植

猪精子体外获能与顶体反应的超微结构研究被引量：17: 1995年; 用４种方法，检测了猪精子体外获能的效果。结果证明：高离子浓度的前培养液和猪卵泡液，具有促进获能过程的作用，实验还获得了获能后顶体反应的一些重要的形态学变化资料，包括质膜的膨胀、断裂．顶体膨胀，顶体外膜内陷或原位局部囊泡化，质膜再全部丢失。顶体内膜直到与卵母细胞质膜融合，才发生可见的变化。受精过程无论体内或体外，都容易发生多精入卵，体外受精则更甚。在精子穿过卵丘细胞之间时，一方面开始进行顶体反应，另一方面，未发生顶体反应或衰亡的精子又可以被卵匠细胞吞噬。本工作进一步支持并发展了质膜不参与顶体外膜囊泡化的假说。; 秦鹏春谭景和吴光明徐立滨杨庆章; 关键词：精子体外获能顶体反应超微结构

牛胚胎体外生产技术的简化研究被引量：8: 1996年; 利用屠宰牛卵巢分离的卵母细胞，以卵裂率和囊胚发育率为标准，对牛胚胎体外生产过程进行了简化试验。结果显示：不加卵丘细胞的高密度卵母细胞体外成熟（１００～２００枚／平皿）可代替加卵丘细胞的标准密度（５０枚／平皿）培养，其卵裂率（５７．６％比６２．５％）和囊胚发育率（２３．７％比２９．１％）没有显著差异（Ｐ＞０．０５），体外授精时间可从成熟培养后２２ｈ延长至２７ｈ，卵裂率和囊胚发育率均没有显著变化，卵母细胞体外成熟后可以不经洗涤直接移入受精滴，原成熟培养皿内残留卵丘细胞再培养４８ｈ形成的单层细胞，可代替标准方法制作的单层小滴用于体外受精胚胎的共同培养，供胚胎发育培养的单层细胞使用多次不影响囊胚发育率，经简化的ＩＶＦ技术获得的胚胎非手术移入情期同步受体牛子宫角２～２．５个月后直检有５８．３％（７／１２）妊娠。我们认为，传统的牛胚胎体外生产技术经过简化可以提高生产效率，不会减少囊胚发育率和妊娠率，值得推广应用。; 吴光明廖和模李雪峰金鹰周国全谭丽玲严中全; 关键词：胚胎体外成熟体外受精体外培养

猪卵母细胞体外成熟与体外受精的超微结构研究被引量：12: 1994年; 取猪卵巢，从２～６ｍｍ有腔卵泡中抽取未成熟的卵丘卵母细胞复合体。分组处理后，各取１０枚按常规方法制片，光镜和电镜下观察测量。结果表明，对照组的卵丘细胞呈多层包围卵母细胞，其胞质突起与卵母细胞微绒毛交叉伸入透明带中，卵周隙尚未出现。高尔基复合体在卵皮质区成团分布。皮质颗粒位置分散。线粒体多成群存在于卵皮质区，嵴少，基质密度高。脂滴遍布胞质，由间断的滑面内质网包统。培养成熟后，卵丘细胞扩展松散，其突起和卵母细胞微绒毛，均自透明带中缩回，卵周隙出现。皮质颗粒成排贴于质膜下。高尔基复合体未见或仅残留少量囊泡。线粒体中出现空泡。脂滴内絮状物增多。卵母细胞生发泡破裂，第一极体分出，核处于第２次成熟分裂中期。受精后皮质颗粒内容物外倾或颗粒完整外排，线粒体多呈圆形。雌、雄原核形成，致密核仁出现。结果说明，体外受精与体内受精过程基本相同，仅有某些环节不完整或不规则。; 秦鹏春吴光明谭景和徐立滨杨庆章; 关键词：卵母细胞超微结构体外受精

体外成熟猪卵母细胞的体外受精研究被引量：16: 1996年; 实验采用体外成熟的猪卵巢卵母细胞，将鲜精以前培养结合咖非因法获能后进行ＩＶＦ实验．体外成熟卵ＩＶＦ后的卵裂率为２４．７％～３８．４％，与目前文献报道的近似；授精时精子浓度为２×１０５／ｍＬ，１×１０６／ｍＬ和５×１０６／ｍＬ体外受精后的卵裂率分别为４０．８％（８２／２０１）．４５％（８５／１８９）和３０．５％（５０／１６４）．前二者无显著差异，但都与最后一组差异显著．我们认为，在本实验条件下，体外受精时适当的精子浓度要比目前常用的１×１０６／ｍＬ低．我们将肝素结合咖啡因的精子在能方法与前培养结合咖啡因法进行了比较，卵裂率分别为１０．７％（９／８４）和４０％（３２／８０），前者虽然在牛体受精实验中很成功．但在猪效果差．将体外成熟体外受精卵移入同步的受体猪输卵管后．有一头母猪成功地产下了５只“试管猪’，存活３只．; 吴光明秦鹏春谭景和张秋明; 关键词：卵母细胞体外成熟体外获能体外受精

猪体外受精精子冷冻后的超微结构研究被引量：10: 1995年; 猪鲜精冷冻后，虽保持了一定的活力，但受精能力明显降低。精子结构特别是顶体遭到不同程度的损伤。应用超微结构方法，观察了鲜精体外获能顶体反应（对照组）及冻精解冻（实验组）后顶体结构的改变。二者在质膜膨胀断裂、囊泡化方面，有着十分相似之处，显示冷冻解冻后，可以使有些精子产生一种假顶体反应（ＰｓｃｕｄｏａｃｒｏｓｏｍａｌＲｅａｃｔｉｏｎ），从而导致受精率下降。; 秦鹏春谭景和吴光明徐立滨杨庆章; 关键词：精子低温冷冻超微结构

牛胚胎体外生产技术的应用研究: 1995年; 利用屠宰牛卵巢抽出的卵母细胞，以卵裂率和囊胚发育率为标准，对牛胚胎体外生产过程进行了简化试验，结果显示：不加卵丘细胞的高密度卵母细胞体外成熟（１００～２００枚／平皿）可代替加卵丘细胞的标准密度（５０枚／平皿）培养，其卵裂率（５７．６％比６２．５％）和囊胚发育率（２３．７％比２９．１％）没有显著变化（Ｐ＞０．０５）；体外授精时间可从成熟培养后２２小时延长至２７小时，卵裂率和囊胚发育率均没有显著变化。卵母细胞体外成熟后可以不经洗涤直接移入受精滴，原成熟培养皿内残留孵丘细胞再培养４８小时形成的单层细胞，可代替标准方法制作的单层小滴用于体外受精胚的共同培养，供胚胎发育培养的单层细胞使用多次不影响囊胚发育率。经简化的ＩＶＦ技术获得的胚胎非手术移入情期同步受体牛２～２．５月后直检有５８．３％（７／１２）妊娠，已顺利产下八头健康试管牛犊。我们认为，传统的牛胚胎体外生产技术经过简化可以提高生产效率，不会减少囊胚发育率和妊娠率，值得推广应用。; 吴光明李雪峰金鹰谭丽玲廖和模周国全严中全; 关键词：胚胎体外成熟体外受精体外培养

猪卵母细胞体外受精中膜电位变化与超微结构关系的研究被引量：1: 1995年; 应用细胞内微电极技术，测定了猪卵母细胞体外成熟和体外受精过程中膜电位的变化，并结合电镜技术探讨了膜电位变化与卵母细胞超微结构的关系。结果发现，猪卵母细胞在体外发育培养前，膜电位为较小的负值；体外发育培养后，膜电位随着体外发育自发变化，首先发生去极化，然后发生极性倒转，由负值转为正值；体外受精后，膜电位复极化为负值，且随着受精发育负值增大。超微结构结果表明，猪卵母细胞的膜电位变化与超微结构密切相关。; 郝艳红吴光明秦鹏春; 关键词：卵母细胞膜电位超微结构体外受精

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吴光明

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