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甘丙肽2型受体在HEK293细胞中的表达及转运机制: 甘丙肽(galanin)是脑内重要的神经肽之一,由29个氨基酸(人类是30个氨基酸)组成。甘丙肽受体的三个亚型已被克隆,分别是甘丙肽1型受体(GalR1),甘丙肽2型受体(GalR2)和甘丙肽3型受体(GalR3),它们...; 吕琼

甘丙肽受体2型受体与β-arrestin在内化转运中的相互作用: 甘丙肽是一种含有二十九个氨基酸的神经肽,广泛分布于中枢神经系统和外周组织中,参与多种重要的生理和病理功能。目前已经克隆出三种甘丙肽受体,甘丙肽1型受体(GalR1)、甘丙肽2型受体(GalR2)和甘丙肽3型受体(GalR...; 闫竹青金艳燕吕琼杨予涛张进禄徐志卿; 文献传递

5-HT_(1A)受体蛋白在PC12细胞膜转运的动态变化: 2010年; 目的在神经元样PC12活细胞上进行实时、可视和定量研究5-羟色胺1A受体的时空分布、膜转运和信号传导机制。方法运用RT-PCR方法获得小鼠5-HT1A基因,并插入到pEGFP-N1真核表达载体中。采用阳离子脂质体方法将质粒转染至PC12细胞和HEK293细胞中,通过G418筛选出稳定表达5-HT1A-EGFP的PC12细胞系。运用激光共聚焦成像系统观察活细胞中5-HT1A-EGFP的表达情况,利用光漂白荧光恢复(FRAP)技术在PC12细胞膜局部漂白后观察5-HT1A-EGFP荧光蛋白在细胞膜上转运的情况。结果克隆所获得的小鼠5-HT1A基因是准确的。5-HT1A-EGFP蛋白清晰的分布于PC12和HKE293细胞膜上。通过FRAP技术观察到漂白区域的细胞膜在100s内有部分恢复,说明受体在细胞膜上发生转运。结论建立了稳定表达5-HT1A-EGFP融合蛋白的PC12细胞系,并利用活细胞成像和FRAP技术观察分析并证实了5-HT1A受体在PC12细胞的膜表面的表达和转运的动态变化。; 金艳燕吕琼闫竹青高尔静赵春礼张进禄徐志卿

甘丙肽2型受体在HEK293A细胞中的同源二聚化研究: G蛋白偶联受体二聚化在受体的转运和信号转导中起着重要的调节作用。为了验证甘丙肽2型受体（GalR2）是否形成同源二聚体,本实验分别构建了N端带FLAG和HA标签的GalR2融合蛋白,转染到HEK293A细胞中。Weste...; 闫竹青初晓东吕琼金艳燕李杰马克乾杨予涛张进禄徐志卿; 关键词：G蛋白偶联受体同源二聚体免疫共沉淀; 文献传递

甘丙肽2型受体在HEK293A细胞中的同源二聚化研究: G蛋白偶联受体二聚化在受体的转运和信号转导中起着重要的调节作用.为了验证甘丙肽2型受体(GalR2)是否形成同源二聚体,本实验分别构建了N端带FLAG和HA标签的GalR2融合蛋白,转染到HEK293A细胞中.Weste...; 闫竹青初晓东吕琼金艳燕李杰马克乾杨予涛张进禄徐志卿; 关键词：G蛋白偶联受体同源二聚体免疫共沉淀

甘丙肽2型受体在HEK293细胞中的表达及内化过程被引量：3: 2010年; 构建了在甘丙肽2型受体(GalR2)N端带myc表位标签的真核表达载体,并将其转染到HEK293细胞,进而应用免疫荧光细胞化学方法结合激光扫描共聚焦显微技术观察GalR2蛋白的亚细胞分布和膜转运过程。Western blot结果发现转染组myc-GalR2蛋白水平呈高表达。myc-GalR2主要分布在细胞膜上,少量分布于胞浆中。当给予甘丙肽(10-7mol/L)刺激后,5min时可见细胞膜上myc-GalR2明显减少,胞浆内myc-GalR2增多,15min时膜上myc-GalR2几乎全部消失。表明GalR2受体与配体结合后发生内化,且受体蛋白内化为时间依赖性的转运过程,证实在HEK293细胞GalR2会出现配体依赖性内化。同时,以已知膜蛋白5-HT1AR的内化作为对照,可见在给予甘丙肽刺激以后,5-HT1AR没有发生内化,受体蛋白仍然表达在膜上。此外,通过测定胞内钙水平激活情况来检测其信号通路激活情况,表明myc对GalR2功能没有明显影响。; 吕琼金艳燕吴波路雅静李晓晓赵春礼徐志卿; 关键词：HEK293细胞

5羟色胺1A受体亚型的内在化研究: 目的 5-羟色胺是脑内一类重要的单胺类神经递质。目前的研究认为,5-羟色胺通过与不同受体亚型结合,发挥各种生理及病理作用,参与了对情绪、焦虑、睡眠、体温、食欲、性行为、运动、心血管功能、痛觉等功能的调制。5羟色胺1A型受...; 金艳燕李晓晓吕琼徐志卿; 关键词：G蛋白偶联受体内在化; 文献传递

甘丙肽2型受体在HEK293A细胞中的同源二聚化研究被引量：2: 2011年; G蛋白偶联受体二聚化在受体的转运和信号转导中起着重要的调节作用。为了验证甘丙肽2型受体(GalR2)是否形成同源二聚体,本实验分别构建了N端带FLAG和HA标签的GalR2融合蛋白,并转染到HEK293A细胞中。Western blot发现,除了相当于GalR2分子量的位置有条带之外,在大约2倍于GalR2分子量的位置也有条带,提示GalR2可能是以二聚体的形式存在的。共转染HA-GalR2和FLAG-GalR2,通过免疫共沉淀方法,在抗HA的免疫片段中检测到了FLAG的免疫活性,且在相当于单倍分子量和二倍分子量上均有条带;反过来,在FLAG的免疫片段中检测HA的免疫活性,条带同样出现在单倍分子量和二倍分子量上。以上结果表明甘丙肽2型受体之间形成了同源二聚体。; 闫竹青吕琼金艳燕李杰马克乾杨予涛徐志卿张进禄; 关键词：G蛋白偶联受体同源二聚体免疫共沉淀

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吕琼