刘生峰
- 作品数：4 被引量：38H指数：3
- 供职机构：西南农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：重庆市科技攻关计划“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 植酸酶产生菌黑曲霉N14的诱变选育及其基因分析被引量：6
- 2005年
- 以植酸酶产生菌黑曲霉03214为出发菌株,经紫外线和亚硝基胍诱变,获得了产酶活性较出发菌株提高了22.3%,达422IU/ml发酵液的突变菌株黑曲霉N14,其最适pH值为2.5,最适温度为50℃。通过对黑曲霉N14植酸酶phyA基因进行PCR扩增,获得了一条长约1.5kb的特异性产物。以pMD18 T为载体,构建了含有目的基因片段的重组质粒。DNA序列测定表明,目的基因片段含有植酸酶phyA基因的完整序列(GenBankAccession:AY426977),phyA基因全长1506bp,其中包含一段长102bp的内含子,编码467个氨基酸,有10个潜在的糖基化位点,5'端有一编码19个氨基酸的信号肽序列。实验结果为植酸酶基因工程菌的构建奠定了基础。
- 彭远义马丽苹李春明刘生峰周泽扬
- 关键词：植酸酶诱变PHYA基因
- 植酸酶基因工程研究进展被引量：12
- 2003年
- 植酸酶是催化植酸及植酸盐水解成肌醇和无机磷酸的一类酶的总称.添加于食品和饲料中,能消除植酸所引起的抗营养作用,可提高蛋白质和矿物质的生物利用率.对植酸酶的生物学特性、基因结构和基因工程的研究进展做了综述.
- 刘生峰彭远义
- 关键词：植酸植酸酶基因工程
- 黑曲霉N14植酸酶基因在巴斯德毕赤酵母中的高效表达被引量：19
- 2004年
- 从黑曲霉N14基因组DNA中扩增出植酸酶phyA基因表达片段 ,并将其克隆到pMD18 T载体中。以此片段构建了pPIC9K phyA重组表达载体 ,目的片段以正确的阅读框架插入到pPIC9K的多克隆位点EcoRⅠ和NotⅠ之间。重组表达载体经XbaⅠ线性化处理 ,电击转化毕赤酵母 ,经G4 18抗性筛选、酶活性测定、PCR鉴定和SDS PAGE分析 ,获得了两株产酶活性分别为 14 395 8 3u mL发酵液 (PP N14 2 2 )和 14 890 8 3u mL发酵液 (PP N14 4 4 )的高产工程菌 ,其酶活性分别是出发菌株酶活性 (4 2 2u mL)的 341 13倍和 35 2 86倍 ,重组酵母具有很好的遗传稳定性。重组植酸酶在pH值 2 5～ 3 0和 5 0～ 5 5时酶活性最高 ,且在pH4 5～ 6 5之间均有相当高的酶活性 ,最适作用温度为5 5℃。
- 彭远义刘生峰李春明周泽扬
- 关键词：植酸酶PHYA基因毕赤酵母
