刘澜澜
- 作品数：31 被引量：72H指数：6
- 供职机构：黑龙江中医药大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省自然科学基金黑龙江省博士后科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生文化科学生物学更多>>
- 腺胃型IBV的分离鉴定及三种不同致病型IBV毒株组织嗜性的比较
- 鸡传染性支气管炎病毒/(Infectious bronchitis virus,IBV/)被公认为是冠状病毒的代表性病毒之一,主要引起鸡的一种称为传染性支气管炎的急性高度接触性传染病。IBV血清型众多,且不断变异,不同型...
- 刘澜澜
- 关键词：传染性支气管炎病毒S1基因组织嗜性
- 文献传递
- 荧光定量PCR方法检测IBV病毒在CEK细胞中的动态变化被引量：2
- 2010年
- 为揭示鸡传染性支气管炎病毒(IBV)在鸡胚肾细胞(CEK)中复制增殖的动态变化规律,通过实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测IBV病毒感染CEK3、6、12、24、36、48、72h后病毒增殖量的动态变化。结果显示,随着时间增加,IBV病毒增殖出现规律性变化,3～12h时IBV增殖不明显,36h时IBV开始大量复制,48h时达到高峰,但72h后有所下降。试验表明IBV在细胞内复制增殖的最佳时间在接毒后48h,其复制增殖情况与细胞状态负相关。
- 张颖刘澜澜王占锋尹鑫魏萍
- 关键词：荧光定量PCR
- 鸡氨肽酶N的高效可溶性表达及生物学功能分析被引量：6
- 2010年
- 本研究旨为克隆鸡氨肽酶N(chAPN)基因,高效表达可溶性目的蛋白,并测定其生物学功能。应用RT-PCR方法从鸡胚肾细胞中克隆chAPN的基因片段,经测序鉴定后再克隆至原核表达载体pCOLD-TF,构建重组原核表达质粒pCOLD-TF-chAPN,在大肠杆菌BL21(DE3)中经不同条件诱导表达目的蛋白;利用镍柱亲和层析法纯化可溶性蛋白,并进行SDS-PAGE、Western blotting鉴定;Leu-PNA酶促反应和ELISA等方法检测目的蛋白生物学功能。结果显示,重组质粒pCOLD-TF-chAPN在大肠杆菌中以可溶形式高效表达;酶促反应及ELISA结果显示该蛋白具有酶活性,可结合传染性支气管炎病毒(IBV),并表现为剂量依赖性。这为今后研究chAPN的酶活性、作为IBV受体及抗病毒功能奠定了实验基础。
- 尹鑫刘澜澜贾莹明晓波张颖李甜甜魏萍
- 关键词：可溶性酶活性
- 3种受体抑制剂对鸡传染性支气管炎病毒感染鸡胚肾细胞的影响被引量：1
- 2011年
- 本研究旨在阐明鸡氨肽酶N(chAPN)、唾液酸以及硫酸乙酰肝素在传染性支气管炎病毒(IBV)M41株感染宿主细胞中的作用以及3种受体特异抑制剂对IBV M41株在自然宿主CEK细胞内增殖能力的影响。作者选择苯丁抑制素(Bestatin)、神经氨酸酶(NA)和肝素酶Ⅲ分别作为APN、唾液酸以及硫酸乙酰肝素的抑制剂,在不同条件下,单独或共同预处理CEK细胞,而后接入IBV M41株病毒感染细胞,应用荧光定量PCR方法定量检测IBVM41株在CEK细胞中的增殖变化,应用鸡胚半数感染剂量法(EID50)测定病毒感染鸡胚能力的变化。结果表明,经Bestatin和NA处理的CEK细胞获得了抵抗IBV M41株感染的能力,与未经处理的(对照组)细胞相比,Besta-tin和NA能显著降低IBV M41株在CEK细胞内的增殖及对鸡胚的感染能力(P<0.01),且Bestatin处理后CEK细胞内的病毒增殖量显著低于NA处理后CEK细胞内的病毒增殖量,两者病毒液的EID50滴定值差异显著(P<0.01);肝素酶Ⅲ的处理则对病毒增殖无显著影响;3种受体抑制剂共同处理CEK细胞后,病毒增殖量显著下降(P<0.01),但仍有病毒增殖,病毒液的EID50滴定值为102.12±0.05.0.1mL-1。结果提示,chAPN在IBV感染宿主细胞的过程中发挥特异性受体作用,而唾液酸在IBV感染宿主细胞中发挥辅助受体作用,硫酸乙酰肝素不是IBV在自然感染中的必需因素,同时提示,可能存在其他未知受体因子参与IBV感染宿主细胞的过程。
- 尹鑫张颖刘澜澜魏萍
- 关键词：IBVBESTATIN神经氨酸酶受体
- 山核桃树枝水煎剂对S180荷瘤小鼠细胞因子及端粒酶、Cath-D表达的影响被引量：2
- 2015年
- [目的]探讨山核桃树枝水煎剂(DJM)对S180荷瘤小鼠的免疫调节及其对端粒酶、Cath-D在肿瘤组织中表达的影响。[方法]将50只清洁级昆明种小鼠随机分为5组,即正常对照组、荷瘤对照组、实验组(DJM)、环磷酰胺组(CTX)及联合用药组(DJM+CTX),除正常对照组外其余每组小鼠腋下接种S180细胞混悬液0.2m L造模,于24h后给药连续10d后,应用ELISA方法测定血清中细胞因子IFN-γ、IL-10、端粒酶含量;应用免疫组化方法测定肿瘤组织中Cath-D蛋白表达水平。[结果]山核桃树枝水煎剂(DJM)能够使S180荷瘤小鼠血清IFN-γ水平升高,IL-10水平下降,且与模型组比较有显著统计学意义(P<0.05);DJM能够抑制S180荷瘤小鼠血清端粒酶活性,且与模型组比较有显著性差异(P<0.05);DJM能使肿瘤组织中Cath-D蛋白表达下降。[结论]DJM对S180荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用可能与调节机体的免疫抑制状态及抑制肿瘤侵袭和转移相关蛋白Cath-D表达的表达有关。
- 于晓红刘澜澜丛珊王静颜培宇
- 关键词：IFN-ΓIL-10端粒酶CATH-D
- 狐貉源犬瘟热病毒分离株H、N基因序列分析及真核表达载体的构建
- 本文对狐貉源犬瘟热病毒分离株H、N基因序列分析及真核表达载体的构建进行了研究。文章从来自于发病率和死亡率都很高的种群的送检样品中选取了三份初检CDV阳性样品，从中分离到MS01、SC01、ZD01三株CDV，用RT-PC...
- 刘澜澜
- 关键词：动物养殖毛皮动物犬瘟热病毒
- 文献传递
- 课程考核模式改革的探索与实践被引量：9
- 2014年
- 传统的课程考核模式往往注重"一张试卷定乾坤",使课程学习结果的评价不客观、不科学。本课题组在实践教学中总结西医基础课程特点,将课程考核进行综合评价:实验课程与理论课程考核结合;中期与期末考试结合;日常抽查测验与小论文结合等,探索运用综合考评方式衡量学生学习质量,在动态中管理和掌握学生的学习情况。使考核模式更加有利于促进教育教学质量的提高和创新人才的培养。
- 颜培宇于晓红蔡文辉刘澜澜
- 关键词：课程考核综合评价
- 特种经济动物产业化关键技术及主要传染病检测、诊断与监测研究
- 华育平张伟王玉龙白素英马建徐艳春曾祥伟金煜聂春雨梁冬莹杨雷刘澜澜
- 该课题研制了水貂养殖场生产管理信息系统软件，制定了综合的水貂选种选配标准，首次开发了特种经济动物产品“专用标识”。在特种经济动物主要传染病检测、诊断和监测研究中，建立了以PCR检测方法为主用于多种传染病的诊断平台，临床应...
- 关键词：
- 关键词：特种经济动物
- SYBR Green荧光RT-PCR法快速检测毛皮动物源犬瘟热病毒被引量：7
- 2010年
- 根据犬瘟热病毒(CDV)H蛋白基因的保守序列设计了1对引物,经过各反应体系和反应条件的摸索和优化,建立了CDV的SYBR GreenⅠRT-PCR荧光定量RT-PCR检测方法。结果显示,建立的方法特异性较好,几种非CDV病原体检测均为阴性;敏感性实验表明其敏感性可达1个TCID50,高于普通RT-PCR和胶体金检测试剂盒;重复性试验表明所建立的检测方法非常稳定;临床检测中,在39份样品中检测到28份阳性样品,高于普通RT-PCR方法的检出率。该方法检测成本低、特异性强、敏感性高、重复性好,可推广应用于毛皮动物CDV的大规模高通量的检测。
- 邢明伟曾祥伟柴洪亮华育平刘娣刘澜澜
- 关键词：毛皮动物犬瘟热病毒实时荧光定量PCR
- 鸡氨肽酶N基因转染BHK-21细胞后IBV感染情况的改变被引量：1
- 2010年
- 构建了带绿色荧光蛋白基因及鸡氨肽酶N全长基因的真核表达重组载体,重组载体转染BHK-21细胞后12h开始可见绿色荧光,36h荧光最强,试验中转染24h后感染IBV鸡胚肾细胞适应毒,72h收获病毒接下一次转染的BHK-21细胞,如此在转染细胞上连续传5代,用间接免疫荧光检测各代次病毒感染转染BHK-21细胞,可见随着代次增加,感染程度增加;病毒毒力EID50逐渐增加,第5代时原病毒毒力基本恢复,半定量RT-PCR检测各代次病毒也可见病毒含量逐渐增加。结果表明,鸡氨肽酶N转染至IBV非易感的BHK-21细胞系后,BHK-21细胞变得对IBV敏感,鸡氨肽酶N可能用作IBV感染的细胞受体。
- 明晓波张颖刘澜澜魏萍
- 关键词：氨肽酶N间接免疫荧光绿色荧光蛋白BHK-21
