冯哲
- 作品数：120 被引量：328H指数：9
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划解放军总医院科技创新苗圃基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 肾小球系膜细胞间通讯在高糖引起的衰老相关表型改变中的作用
- 目的观察高糖培养条件下系膜细胞衰老相关表型改变,并探讨细胞间隙连接通讯在此病理生理改变过程中的作用和意义。方法分离培养3月龄大鼠肾小球系膜细胞,分为以下六组:低糖组(5.5mM葡萄糖)、高糖组(30mM葡萄糖)、渗透压对...
- 张晓洁陈香美付博冯哲王建中
- 文献传递
- 钙在线粒体钠钙交换体的逆向转运参与了尿酸导致的内皮损伤
- 齐卡冯哲傅博洪权崔少远王丽媛黄智勇吴镝
- 雷帕霉素通过抑制mTOR-ULK1通路上调自噬反应减轻足细胞损伤
- 吴玲玲冯哲崔少远谢院生蔡广研傅博陈香美
- 文献传递
- 大鼠高亲和力二羧酸转运蛋白的克隆表达及细胞内定位
- 2008年
- 目的:克隆大鼠高亲和力钠依赖二羧酸转运蛋白(SDCT2)的全长cDNA,并明确其在肾小管上皮细胞内的定位表达情况。方法:从大鼠肾组织中提取总RNA,用带有8肽FLAG标签的PCR引物通过RT-PCR技术扩增出SDCT2全长基因并测序,将其插入真核表达载体中构建SDCT2真核表达载体,然后将它们转染到肾小管上皮细胞LLC-PK1中表达,并用激光共聚焦显微镜观察该蛋白的亚细胞定位情况。结果:扩增出2kb的SDCT2全长基因,Westernblot表明SDCT2基因在LLC-PK1细胞中得到了正确的表达;共聚焦显微镜分析显示正常SDCT2蛋白主要定位于细胞膜上,与生物信息学的预测结果一致;为了比较不同连接温度对重组DNA连接效率的影响,观察了3种连接温度下的转化效率,结果显示温度循环法的连接效率明显比其他2种常规连接温度要高。结论:高亲和力钠依赖二羧酸转运蛋白全长基因被成功克隆,其主要表达于肾小管上皮细胞膜上。
- 侯剀白雪源陈香美冯哲傅博
- 关键词：三羧酸循环肾小管亚细胞定位
- ILK-siRNA抑制衰老大鼠系膜细胞纤维连接蛋白积聚的研究被引量：3
- 2006年
- 目的观察整合素连接激酶(integrin linked k inase,ILK)小干扰RNA(small interference,siRNA)对衰老大鼠系膜细胞细胞外基质纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的影响,探讨ILK在衰老肾脏肾小球硬化中的作用。方法分离培养3月龄和24月龄雄性W istar大鼠原代肾小球系膜细胞(m esangial cells,MCs),脂质体转染抑制ILK表达的siRNA或无关siRNA(con siRNA)。利用RT-PCR、W estern b lot和免疫荧光结合激光共聚焦显微镜技术检测ILK和FN的表达情况。结果ILK-siRNA转染可抑制3月龄和24月龄大鼠系膜细胞ILK和FN的表达水平(P<0.05);对24月龄大鼠系膜细胞的抑制程度更显著(P<0.05),几乎使ILK和FN下降到正常青年大鼠系膜细胞的水平。结论通过RNA i技术抑制ILK的表达,可减轻衰老大鼠系膜细胞FN的积聚,为肾脏器官衰老的防治提供新的干预靶点。
- 张雪光洪权陈香美冯哲吕杨蔡广研
- 关键词：细胞外基质衰老
- 间充质干细胞通过调节天然免疫系统减轻急性肾损伤的机制研究被引量：7
- 2016年
- 目的：探讨骨髓来源的间充质干细胞（MSCs）减轻缺血/再灌注损伤（IRI）诱导急性肾损伤（AKI）的可能机制。方法雄性C57/BL6小鼠45只，按随机数字表法分为假手术（Sham）组、IRI组及IRI＋MSCs组3组，每组15只。采用夹闭双侧肾蒂35min的方法建立小鼠IRI诱导的AKI模型；Sham组只开腹分离肾蒂，但不夹闭双侧肾动脉。于再灌注6h，IRI＋MSCs组经尾静脉注射1×104/μLC57/BL6小鼠骨髓来源的MSCs100μL；IRI组尾静脉注射等量生理盐水。再灌注48h后取血检测各组血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）水平；过碘酸雪夫染色（PAS染色）后显微镜下观察肾脏病理改变并计算肾小管损伤评分。再灌注24h和72h用流式细胞仪检测浸润至肾脏的白细胞总数（CD45＋），用免疫荧光技术检测浸润至肾脏的中性粒细胞（Ly-6G＋）及巨噬细胞（F4/80＋）数量。结果与Sham组比较，IRI组48hSCr、BUN显著升高〔SCr（μmol/L）：180.3±8.8比9.7±3.5，BUN（mmol/L）：112.1±8.3比9.4±2.3，均P＜0.01〕，肾小管损伤评分升高（分：4.80±0.55比0）；24h和72h肾脏白细胞浸润数显著升高（×105个/g：60.50±2.56比19.46±4.83，42.00±1.87比14.70±3.74，均P＜0.01），同时免疫荧光染色可观察到肾脏中性粒细胞和巨噬细胞浸润数明显增加，但再灌注72h细胞数量较24h时明显减少。与IRI组相比，IRI＋MSCs组可显著降低48hSCr、BUN水平〔SCr（μmol/L）：99.0±8.0比180.3±8.8，BUN（mmol/L）：84.5±7.6比112.1±8.3，均P＜0.01〕，肾脏中坏死肾小管明显减少，肾小管有所修复，肾小管损伤评分明显降低（分：2.60±0.55比4.80±0.55，P＜0.05）；24h和72h时浸润至肾脏的白细胞总数显著减少（×105个/g：24.20±4.53比60.50±2.56，31.70±3.15比42.00±1.87，均P＜0.01），肾脏的中性粒细胞数量明显减少，巨噬细胞数量明显增加；但72h白细胞浸润数较24h时显著增加（×105个/g：31.70±3
- 胡婕张利崔少远朱飞李典耕冯哲陈香美
- 关键词：间充质干细胞巨噬细胞中性粒细胞
- 钠-氢交换蛋白1小干扰RNA对抗霉素A诱导人肾小管上皮细胞缺血再灌注损伤的保护机制被引量：2
- 2008年
- 目的通过构建钠-氢交换蛋白1（NHE-1）小干扰RNA（siRNA）抑制肾小管上皮细胞NHE-1的表达，探讨其对细胞缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法根据人NHE-1全长基因序列设计并合成NHE-1-siRNA，转染人肾小管上皮细胞系（HKC），以无关siRNA转染组作为对照。利用10μmol／L抗霉素A诱导细胞来模拟缺血缺氧环境。用RT—PCR、Western印迹法检测NHE-1的表达。用BCECF／AM、Fluo-3／AM和SBFI-AM标记HKC，通过激光共聚焦显微镜分别检测其细胞内pHi、Ca^2＋和Na^＋浓度的变化。用Hoechst 33342染色技术及AnnexinV／PI染色结合流式细胞仪技术检测细胞凋亡情况。利用荧光探针JC-1检测细胞线粒体膜电位的变化。结果特异性NHE-1-siRNA能有效抑制HKC的NHE-1表达，与无关siRNA转染组相比，NHE-1-siRNA转染组NHE-1 mRNA和蛋白表达水平明显下调（均P〈0．05）。抗霉素A刺激后，2组细胞NHE-1 mRNA及蛋白表达水平显著上调，而NHE-1-siRNA转染组低于无关siRNA转染组；同时NHE-1-siRNA转染组细胞凋亡率（8．9％±2．9％）明显低于抗霉素A处理组（18．8％±3．2％）和抗霉素A＋无关siRNA转染组（17．4％±3．6％）（均P〈0．05）；NHE-1-siRNA转染组线粒体膜电位明显增高；与无关siRNA转染组相比较，NHE-1-siRNA转染组经抗霉素A处理后，细胞内钠离子、氢离子及钙离子增高的幅度较低（P〈0．05）。结论NHE-1-siRNA可抑制肾小管上皮细胞内NHE-1的表达，对抗霉素A诱导肾小管上皮细胞的缺血再灌性损伤有一定的保护作用。其机制可能通过抑制NHE-1表达，延缓细胞内Na^＋的积聚，减轻细胞内钙离子的超载，抑制损伤细胞的线粒体膜电位下降，减少细胞的凋亡。
- 洪权吴镝冯哲张雪光汪杨吕杨陈香美
- 关键词：缺血再灌注损伤肾小管上皮细胞
- 肌红蛋白通过内质网应激介导肾小管上皮细胞凋亡
- 周建辉张旭孔德阳王远大冯哲张利陈香美
- Bardoxolone methyl治疗能够改善2型糖尿病的肾功能
- 2012年
- 与2型糖尿病相关的慢性肾功能不全是导致肾衰竭的主要原因，其中炎症反应和氧化应激损伤是引起疾病进展的主要因素。一组来自美国的最新报告显示，一种新型的抗氧化、炎症调节药物——Bardoxolone methyl，对伴有2型糖尿病的慢性肾脏病（CKD）患者有短期增加肾小球滤过率的作用。
- 冯哲陈仆
- 关键词：慢性肾功能不全2型糖尿病氧化应激损伤肾小球滤过率疾病进展
- 急性肾损伤诊治的现状与未来被引量：9
- 2016年
- 急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)是临床常见的急危重症,住院患者AKI发生率、病死率逐年增高,消耗了大量医疗资源。AKI的诊断与治疗一直以来是国际肾脏病学者关注的重点和难点,尤其对于非肾脏科医师来说,对AKI这种急危重症认识和治疗原则掌握不够,导致AKI患者漏诊率增高。该文针对AKI目前的流行病学现状、发病机制的最新进展、诊疗指南和治疗方案的最新认识进行系统综述和展望,期望加深广大医护工作者对AKI诊治现状的认识,明确未来AKI的研究方向。
- 冯哲陈香美
- 关键词：急性肾损伤慢性肾脏疾病持续性肾脏替代治疗
