侯德富
- 作品数：17 被引量：28H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 人鼻咽上皮细胞CYP2E1 cDNA克隆及序列分析
- 2003年
- 目的 :比较正常人胚鼻咽上皮 (HENE)细胞、二亚硝基哌嗪转化的人胚鼻咽上皮 (HENE)所建的细胞系( 742 9)、鼻咽癌细胞系 (HNE1)细胞色素P45 0 2E1(CYP2E1)mRNA表达序列 ,探讨CYP2E1在鼻咽癌变过程中的作用特点。方法 :采用RT PCR方法和DNA重组技术从HENE ,742 9,HNE13种细胞系中克隆的CYP2E1cDNA片段 ,测序并分析其结构改变特征。结果 :①与HENE 2E1比较 ,742 9 2E1存在 846位 (A→T)、90 1位 (A→G)两个点突变 ;HNE1 2E1存在 90 1位 (A→G)一个点突变。②与成人肝来源的CYP2E1CDs序列 (GenBank号为J0 2 843)比较 ,发现HNE1 2E1序列与其完全匹配 ;HENE 2E1序列存在 90 1位 (G→A)点突变。但上述突变对应部位氨基酸序列并无改变。结论 :鼻咽癌发生过程中CYP2E1基因cDNA序列仅存在少数无义突变 ,表现出其高度保守性。
- 侯德富贺智敏杨芳陈主初
- 关键词：鼻咽上皮细胞克隆鼻咽癌
- 人CYP450 2E1异源性表达模型的建立及底物的表达诱导作用被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨化学致癌物二亚硝基哌嗪 (DNP)对人CYP2E1异源表达的诱导作用。方法 :脂质体介导法将外源人CYP2E1cDNA导入NIH 3T3细胞 ,G4 18筛选后挑取克隆 ,Southernblot鉴定外源基因的整合 ,用不同浓度乙醇和DNP处理阳性克隆 ,RT -PCR和Westernblotting检测各组细胞CYP2E1表达水平。结果 :获得二个具有外源基因CYP2E1cDNA整合及稳定表达的细胞克隆 ;随着乙醇和DNP处理浓度的提高 ,细胞CYP2E1mRNA和蛋白质水平的表达增强。结论 :DNP与乙醇能稳定诱导CYP2E1异源表达 ,其作用可能与其mRNA转录增强有关 ;DNP致癌可能与CYP2E1对其原位代谢活化相关。
- 王水良贺智敏朱建华侯德富陈主初
- 关键词：细胞色素P4502E1基因表达
- ZNF403,一个新的细胞周期调节因子的功能研究(英文)被引量：1
- 2013年
- ZNF403和LCRG1是人类基因ZNF403的2个不同转录剪切本.以往的研究表明LCRG1在喉癌细胞株Hep-2中具有抑瘤特性.本研究旨在探明ZNF403和LCRG1不同剪切本之间的关系以及在肿瘤细胞中对ZNF403的功能进行研究.首先,采用实时荧光定量PCR对这2个转录本的相对表达水平进行分析,结果表明,ZNF403表达水平在不同细胞株中明显高于LCRG1(>10倍),为该基因的主要转录表达产物.随后分别采用MTT细胞生长分析法和裸鼠体内成瘤实验在体外和体内对ZNF403的功能进行分析,结果显示ZNF403的基因沉默可以同时在体内和体外抑制喉癌细胞Hep-2细胞的生长.为了探明其作用机制,本研究还采用细胞信息学、流式细胞周期分析术和高通量PCR点阵分析方法进一步分析,结果表明,ZNF403的基因沉默可显著抑制细胞DNA的复制并延缓细胞周期进入到有丝分裂期.同时发现ZNF403可调节一系列的细胞周期调节蛋白如MCM2、p21、ATM、MRE11A等.综上研究提示ZNF403为一新的细胞周期调节因子,其功能的缺失与肿瘤发生发展密切相关.
- 关瑞侯德富饶翔关勇军欧阳咏梅余艳辉Jim HU陈主初
- 关键词：选择性剪切细胞周期AHR
- Tet调控CYP2E1基因表达细胞系的代谢能力分析被引量：1
- 2009年
- 应用Tet-On基因表达系统,调控CYP2E1基因在NIH3T3细胞中的表达水平,探讨CYP2E1在化学致癌物二甲基亚硝胺(N-nitrosodimethylamine,NDMA)代谢中的作用.先后将Tet-on基因表达系统的调控质粒pRevTet-on和反应质粒pRevTRE-2E1转染NIH3T3细胞,分别用G418和潮霉素筛选,并通过RT-PCR和Western印迹检测,成功获得了3个具有良好诱导性Tet调控的CYP2E1基因表达细胞系(Tet/3T3-2E1).应用不同浓度强力霉素(doxycycline,Dox)处理Tet/3T3-2E1细胞诱导CYP2E1表达,HPLC分析细胞对CYP2E1特异性药物探针氯唑沙腙的原位代谢能力及MTT法分析CYP2E1介导的NDMA细胞毒性作用.结果显示,Tet/3T3-2E1细胞CYP2E1的表达及其代谢能力有明显的Dox浓度依赖性,而且NDMA对Dox诱导组细胞有明显浓度依赖性细胞毒性作用,其IC50值为12.06μmol/L,无Dox诱导组未见明显的NDMA细胞毒性作用.该细胞模型的成功建立对于开展与CYP2E1相关的毒物、致癌物代谢研究,筛选抗毒物、抗癌物等具有重要价值.
- 侯德富万恂恂贺智敏陈主初
- 关键词：CYP二甲基亚硝胺强力霉素
- LBL与TBL整合教学法在研究生分子生物学教学中的应用被引量：5
- 2017年
- 分子生物学在精准医学中占有重要的地位。本文探讨LBL与TBL整合教学法在医学研究生分子生物学教学中的应用,发现LBL与TBL整合教学增强学生自主学习的能力,培养学生的团队意识、探究意识和创新思维,加深对知识的理解,并可活跃课堂的学习氛围。这为研究生教育教学提供了有益的参考。
- 袁仕善刘宁侯德富
- 关键词：分子生物学LBLTBL教学模式
- 循序渐进重塑双语教学——湖南师大药学分子生物学双语教学探索被引量：1
- 2017年
- 专业课程的双语教学是高等学校培养高素质人才,为学生走上科研道路做好基础铺垫的重要途径。然而面对双语教学课堂暴露出的一些问题,要把握好预习-听讲-探讨-发言-写作-评价-反馈各个环节,才能让教与学整个体系良性运转,教师和学生都在此过程中得到提高。
- 刘宁袁仕善侯德富
- 关键词：双语教学教学模式教学效果
- 一个新的NPCEDRG基因mRNA剪接变异体的克隆及鉴定
- 2011年
- 目的:克隆并鉴定NPCEDRG基因mRNA剪接变异体。方法:利用5'-RACE、3'-RACE在CNE2细胞中对NPCEDRG基因mRNA剪接变异体进行扩增,T/A克隆入pMD20载体,所获得的阳性重组子经测序证实。结果:成功克隆得到一种新的NPCEDRG基因的mRNA剪接变异体V2,其TSS位于-23 nt处,其CDs为297 bp,编码一种由98个氨基酸组成的蛋白质,其分子量为10.4 kD,等电点为7.1。结论:利用5'-RACE、3'-RACE等技术成功克隆得到一种新的NPCEDRG基因的mRNA剪接变异体,为阐述NPCEDRG基因在鼻咽癌发生发展中的可能作用提供线索。
- 侯德富关勇军万恂恂谭宇婷欧阳咏梅余艳辉陈主初
- 人鼻咽上皮源细胞色素P450 2E1 cDNA克隆及体外代谢功能分析
- 目的：①比较正常人胚鼻咽上皮(HENE)细胞、二亚硝基哌嗪转化的人胚鼻咽上皮(HENE)细胞系(7429)、鼻咽癌细胞系(HNE)细胞色素P4502E1(CYP2E1)基因编码区序列，探讨化学物质致鼻咽癌变过程中CYP2...
- 侯德富
- 文献传递
- 鼻咽癌细胞系CNE2中NPCEDRG基因mRNA剪接变异体分析被引量：2
- 2011年
- NPCEDRG基因是采用基因定位候选克隆策略获得的1个鼻咽癌候选抑瘤基因.NPCEDRG在鼻咽癌细胞和组织中表达下调,重新恢复NPCEDRG基因在CNE2细胞系的表达,可部分逆转CNE2的恶性表型.本研究对CNE2细胞所表达的NPCEDRG基因mRNA剪接变异体克隆、鉴定,发现NPCEDRG基因至少有7个转录起始位点,其中NM_032316的TSS位于ATG上游-85 nt处,AF538150和AK094248的TSS位于-25 nt处;AF538150不存在第2外显子中6核苷酸序列(3'-TTGCAG-3')的缺失,其CDs为516 bp,编码1种由171个氨基酸组成的蛋白质(而非GenBank中公布的CDs为510 bp,1种由169个氨基酸组成的蛋白质).本研究成功克隆得到1种新的NPCEDRG基因的mRNA剪接变异体V2,其TSS位于-23 nt处,其CDs为297 bp,编码1种由98个氨基酸组成的蛋白质.
- 侯德富关勇军关瑞万恂恂李国庆欧阳咏梅余艳辉陈主初
- 关键词：RT-PCR
- 反义四环素转录激活子表达细胞系的构建及鉴定
- 2009年
- 目的:构建反义四环素转录激活子(reverse Tc-controlled transactivator,rtTA)表达细胞系。方法:将RevTet-On基因表达系统中调控载体pRevTet-On转染NIH3T3细胞,经G418筛选及RT-PCR鉴定。结果:获得7个rtTA不同表达水平的细胞克隆。结论:成功构建rtTA表达细胞模型,为进一步研究特定外源基因的功能提供一个理想实验平台。
- 侯德富贺智敏余艳辉陈主初
- 关键词：RT-PCR
