余颖
- 作品数:5 被引量:21H指数:3
- 供职机构:第四军医大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 单纯疱疹病毒囊膜糖蛋白模拟短肽的筛选
- 为了获得可替代单纯疱疹病毒(HSV)囊膜糖蛋白作为该病毒亚单位疫苗免疫原的小片段短肽,我们将一株有强动物保护活性的抗HSV糖蛋白C型共同性单克隆抗体
- 杨乔欣马文煜余颖任君萍黎志东
- 文献传递
- 单纯疱疹病毒糖蛋白模拟位的研究被引量:10
- 2002年
- 目的为了充分认识单纯疱疹病毒(HSV)糖蛋白的抗原表位,寻找HSV多组分疫苗和新型基因工程疫苗更有效的小片段短肽作为该病毒疫苗的备选免疫原。方法利用有动物保护活性的抗HSV糖蛋白C(gC)单克隆抗体(McAb)1A12淘筛噬菌体随机12肽库,经4轮筛选后进行ELISA检测,随机挑取14个阳性克隆进行序列测定,序列比较后得到保守序列,做ELISA阻断实验进一步鉴定筛选结果并与相关天然蛋白HSV gC进行序列比较。结果获得保守序列-SG(L)RHII-和其侧翼辅助序列-AK-、-VW-,其与天然相关蛋白HSV gC 114~116位氨基酸十分相似。携有此短肽的噬菌体可以与McAb特异结合,并可部分阻断抗体与HSV囊膜抗原的反应。结论所筛选到的保守序列可模拟McAb针对的抗原表位,可能是HSV的替代抗原。这一研究方法有望使短肽替代庞大的糖蛋白全长氨基酸序列,为研制更有效及更广谱的基因工程疫苗提供依据,也使研制基于抗原表位水平的特异诊断试剂成为可能。
- 杨乔欣马文煜余颖
- 关键词:单纯疱疹病毒噬菌体随机肽库模拟位抗原表位
- HSV-1 SM44株糖蛋白D基因真核表达载体的构建及其免疫效果观察被引量:4
- 2000年
- 目的构建HSV 1型SM44株糖蛋白D(gD)基因的真核表达载体 ,并用此重组质粒直接免疫小鼠 ,探讨HSV 1gD基因作为基因疫苗的可能性。方法从HSV 1基因组中扩增 gD的全编码基因 ,克隆入载体 pUC19中 ,测序鉴定后转入真核表达载体 pcDNA3.1( +)。所得重组质粒pcDNA gD以电穿孔法转染CHO细胞 ,并以荧光染色法鉴定表达效果。用 pcDNA gD免疫小鼠 ,ELISA法检测基因免疫的应答效果。结果成功地构建了可在真核细胞中有效表达的HSV 1gD真核表达载体 ,用其直接免疫小鼠可引起较高水平的特异性抗体应答。结论 gD的真核表达载体有可能作为HSV 1的基因疫苗 ,为进一步研究基于 gD的表位生物学和表位疫苗奠定了基础。
- 余颖马文煜杨乔欣
- 关键词:HSV-1糖蛋白D真核表达基因免疫
- 递呈单纯疱疹病毒糖蛋白C模拟短肽的噬菌体免疫效果的初步研究被引量:6
- 2001年
- 目的 鉴定含单纯疱疹病毒 (Herpessimplexvirus ,HSV)糖蛋白C(gC)模拟表位 (Mimotope)的短肽的免疫原性 ,确定其作为新型短肽疫苗组分的可能性。方法 将淘筛噬菌体随机肽库获得的递呈全部或部分 gC模拟肽的噬菌体分为 7组免疫动物 ,ELISA法检测噬菌体免疫效果及天然抗原免疫鼠阳性血清与噬菌体的反应性 ,观察诱生抗体持续时间。结果 递呈 gC模拟肽的噬菌体可诱导小鼠产生抗gC的抗体 ,抗体持续时间超过 4个月 ,用HSV天然抗原免疫小鼠获得的血清抗体也能与各组噬菌体结合。结论 噬菌体递呈肽能够模拟天然HSVgC抗原的部分免疫活性且具有一定的免疫原性 ,可用作HSV亚单位疫苗或表位疫苗的研究。
- 杨乔欣马文煜余颖
- 关键词:单纯疱疹病毒噬菌体免疫效果
- 单纯疱疹病毒糖蛋白C模拟表位mgC真核表达载体的构建和表达被引量:3
- 2000年
- 目的为鉴定单纯疱疹病毒(HSV)糖蛋白C(gC)一个短肽模拟表位mgC基因作为HSVDNA表位疫苗的可能性 ,需构建含此表位的真核载体。方法合成编码该表位的单链DNA ,经不对称PCR扩增后 ,克隆入真核表达载体pcD NA3.1中 ,并在CHO细胞中表达。用RT PCR法鉴定mRNA的表达。结果含mgC基因的真核表达载体在哺乳动物细胞中可以在mRNA水平表达外源蛋白。结论成功地构建了HSVgC中短肽模拟表位mgC基因的真核表达载体 ,为进一步探讨该HSV模拟表位的功能奠定了基础。
- 杨乔欣马文煜余颖
- 关键词:单纯疱疹病毒