余源
- 作品数：21 被引量：39H指数：4
- 供职机构：河北联合大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 唐山地区3～6岁儿童肠道寄生虫感染情况调查分析被引量：3
- 2013年
- ①目的为了解和掌握唐山地区3～6岁儿童肠道寄生虫的感染情况,更好的开展寄生虫病的防治工作,对3～6岁儿童进行肠道寄生虫感染情况调查。②方法收集3～6岁儿童粪便,采用生理盐水涂片法、饱和盐水浮聚法检查肠道寄生虫虫卵。③结果唐山地区总感染率6.93%,以蛔虫感染率最高,农村儿童寄生虫总染率为9.77%,唐山城区儿童寄生虫感染率为4.07%,无性别差异。④结论农村儿童的染率高于城区儿童(P<0.05)。
- 李巍伟刘晓光余源
- 关键词：肠道寄生虫
- C2株蓝氏贾第鞭毛虫组蛋白H3基因的克隆表达与基因分析(英文)
- 2014年
- 目的克隆表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白基因,与WB株蓝氏贾第鞭毛虫进行同源分析,构建C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白分子进化树。方法 PCR扩增获取H3组蛋白基因,构建pGM-T-H3重组载体,转化E.coli TOP10感受态宿主细胞,挑选阳性克隆并进行序列分析,利用限制性内切酶NcoⅠ和XhoⅠ构建pET28a(+)-H3重组载体,转化E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导组蛋白H3表达,Western blotting鉴定表达,与美国WB株蓝氏贾第鞭毛虫及模式生物H3组蛋白基因和蛋白序列进行同源分析。结果成功克隆表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白基因,同源比对结果显示C2株蓝氏贾第鞭毛虫基因序列与美国WB株完全一致,但与其他现存真核生物亲缘关系较为疏远。结论 C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白分子进化树分析表明贾第虫H3组蛋白基因在进化过程中与其他物种分化较早,本研究结果为进一步研究蓝氏贾第鞭毛虫的生物进化地位提供有价值的实验资料。
- 余源葛爽李明刘阿倩林志强田喜凤
- 关键词：同源性分析分子进化树
- 蓝氏贾第鞭毛虫α-7．1、α-11贾第素的原核表达及抗原活性鉴定被引量：8
- 2012年
- 目的原核表达蓝氏贾第鞭毛虫的α-7.1、α-11贾第素蛋白。方法经RT-PCR获得α-7.1、α-11贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-7.1及pET-28a(+)-α-11,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后,收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-7.1和pET-28a(+)-α-11,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,SDS-PAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约43kD和35kD的位置分别出现目的蛋白条带,与理论值相符;通过相应α-7.1、α-11贾第素抗血清的Westernblot证实两种贾第素重组蛋白的抗原活性良好;经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的重组的α-7.1、α-11贾第素融合蛋白。结论成功地克隆、表达并纯化了具有良好抗原活性的α-7.1、α-11贾第素蛋白。
- 王洋杨志宏王沂曹蕾余源陈阳王卫亮慈雅丽田喜凤
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫原核表达
- 蓝氏贾第鞭毛虫细胞骨架蛋白的分子生物学研究进展被引量：4
- 2013年
- 蓝氏贾第鞭毛虫作为真核生物的模型,越来越受到广大生物学学者的重视,贾第虫借助细胞骨架蛋白附着于宿主肠上皮细胞,导致贾第虫病。将蓝氏贾第鞭毛虫细胞骨架蛋白成分作为新药物开发靶点的研究与日俱增。本文综述了蓝氏贾第鞭毛虫细胞骨架蛋白的分子生物学研究方法及最新进展,为新药物的开发及贾第虫骨架蛋白的进一步研究提供有价值的资料。
- 余源李巍伟陈阳王洋赵丽娜沈海娥田喜凤
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫骨架蛋白蛋白质组学比较基因组学
- C2株蓝氏贾第鞭毛虫TCTP基因的克隆、表达和序列分析（英文）
- 2015年
- 目的克隆C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的翻译调控肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)编码区,对其进行生物信息学分析和原核表达。方法根据WB株贾第虫TCTP编码区序列设计引物,以C2株贾第虫基因组DNA为模板扩增获得TCTP编码区片段,双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),将酶切和测序验证正确的重组质粒转化E.coli Rosetta(DE3),经IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE及Western blot鉴定蛋白产物,采用Ni-NTA经亲和层析纯化重组蛋白。同时根据测序结果分析C2株贾第虫TCTP蛋白结构特征和进化关系。结果克隆了包含酶切位点全长470bp的C2株贾第虫TCTP编码区,构建了原核表达载体pET-28a(+)-TCTP,在Rosetta(DE3)中表达、纯化得到了相对分子量约18.5kDa的融合蛋白,与预期相符;测序结果显示C2株贾第虫TCTP序列与WB株相同,生物信息学分析显示贾第虫TCTP蛋白虽然序列长度较其它物种更短但与裂殖酵母TCTP空间结构相似,均由4个β折叠和3个主要的α螺旋组成,位于序列中部的不规则环状结构更小,仅9个氨基酸残基组成,在进化上与其它真核生物亲缘关系较远。结论成功克隆表达了贾第虫TCTP,为TCTP功能及贾第虫致病机制的研究提供了实验依据。
- 王沂余源田喜凤李冀楮晗王洋
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫原核表达
- 蓝氏贾第鞭毛虫α-4贾第素的原核表达及纯化被引量：10
- 2011年
- 目的原核表达并纯化蓝氏贾第鞭毛虫的α-4贾第素蛋白。方法经RT-PCR获得α-4贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-4,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后,收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测,并用Ni-NTA亲和层析柱纯化融合蛋白。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-4,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白以包涵体形式存在;SDS-PAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约34 kD的位置出现目的蛋白条带,与理论值相符;经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的重组的α-4贾第素融合蛋白。结论成功克隆、表达并纯化了α-4贾第素蛋白,为α-4贾第素的细胞定位及功能研究提供了必要条件。
- 王洋余源王卫亮陈阳慈雅丽田喜凤郑佳杨志宏
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫原核表达
- 人TRAF3IP3基因的克隆及真核表达被引量：1
- 2013年
- 目的构建人肿瘤坏死因子受体相关因子3相互作用蛋白3(TRAF3IP3)基因真核表达载体,并进行表达检测及鉴定。方法 RT-PCR扩增获得TRAF3IP3开放读码框区基因,双酶切连入真核表达载体pIRES2-EGFP,双酶切和测序鉴定阳性克隆;重组质粒磷酸钙法转染HEK293细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,实时定量PCR和Western blot法鉴定TRAF3IP3基因的表达情况。结果经限制性内切酶酶切鉴定和测序证实,成功构建了TRAF3IP3真核表达质粒,荧光显微镜观察可见转染了重组质粒的HEK293细胞有绿色荧光蛋白的表达,实时定量PCR和Western blot结果证实TRAF3IP3蛋白高水平表达。结论成功构建了pIRES-EGFP-TRAF3IP3真核表达质粒,为TRAF3IP3基因功能的研究奠定了基础。
- 王沂张秀军刘青余源慈雅丽王洋
- 关键词：真核表达转染HEK293细胞
- C2株贾第虫SBDS基因的原核表达与生物信息学分析
- 2014年
- 目的:克隆、原核表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的Shwachman-Bodian-Diamond syndrome(SBDS),并对其进行生物信息学分析。方法:以C2株贾第虫基因组DNA为模板获得SBDS基因编码区,克隆入原核表达载体p ET-28a(+),测序并进行生物信息学分析,将重组质粒p ET-28a(+)-SBDS在大肠杆菌Rosetta(DE3)中诱导表达,SDSPAGE及Western blot验证表达效果。结果:成功构建了C2株贾第虫SBDS原核表达载体并在在大肠杆菌中得到了高效表达,SDS-PAGE及Western blot显示,在相对分子量约29k Da的位置出现目的蛋白条带,与理论值相符;生物信息学分析显示贾第虫SBDS蛋白在空间上形成三个结构域,在进化上与其它现存真核生物亲缘关系较远。结论:原核表达并分析了贾第虫SBDS蛋白,为贾第虫SBDS的进一步研究提供了基础。
- 王沂余源田喜凤李冀周英斌李少东刘晓莉王洋
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫SBDS原核表达
- 双氢青蒿素对C2株蓝氏贾第鞭毛虫Centrin基因mRNA表达水平的影响被引量：1
- 2014年
- 目的分析双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对体外C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia)中心体蛋白(Centrin)基因mRNA表达水平的影响,探讨其对蓝氏贾第鞭毛虫的抑制作用。方法采用改良型TYI-S-33培养基培养C2株蓝氏贾第鞭毛虫,培养基内分别加入浓度为100μg/ml、200μg/ml的双氢青蒿素,以不含药物组作为阴性对照,分别培养2、4、8、12h后,收集各组虫体并提取总RNA,以此为模板,反转录合成cDNA,采用实时荧光定量RTPCR检测药物作用后Centrin基因mRNA表达水平的相对变化量。结果实时荧光定量RT-PCR检测显示,经双氢青蒿素作用虫体后Centrin基因mRNA表达水平显著降低,培养2、4、8、12h后100μg/ml药物组Centrin基因mRNA相对表达量分别为0.46、0.43、0.35和0.27,200μg/ml药物组分别为0.42、0.38、0.29和0.25。结论双氢青蒿素对C2株蓝氏贾第鞭毛虫Centrin基因mRNA的表达具有明显的抑制作用,且抑制作用随着药物浓度的增高和作用时间的延长而增强,提示双氢青蒿素对蓝氏贾第鞭毛虫具有明显的损伤作用,可供蓝氏贾第鞭毛虫病防治参考。
- 余源王洋陈阳赵丽娜贺宝玲张亚粉田喜凤
- 关键词：实时荧光定量RT-PCR双氢青蒿素中心体蛋白
- 临床血液学和血液检验教学的探讨被引量：2
- 2011年
- 临床血液学和血液检验是血液学和医学检验的一门交叉学科,是医学检验的主干课程之一。该课程是以血液学的理论为基础,检验学的实验方法为手段,血液病作为工作对象的一个理论-检验-疾病相互结合、紧密联系,并在实践中不断发展。
- 王洋余源曹蕾李巍伟
- 关键词：临床血液学和血液检验教学手段教学改革
