何鸣筱
- 作品数：4 被引量：29H指数：2
- 供职机构：中山大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程更多>>
- 嗜水气单胞菌外膜蛋白基因ompTS的高效表达及其免疫原性被引量：21
- 2002年
- 根据嗜水气单胞菌外膜蛋白基因ompTS的核苷酸序列设计引物 ,运用聚合酶链式反应 (PCR)扩增出与预期大小相符的基因片段。将此基因片段克隆至质粒pRSETA的BamHI和EcoRI位点 ,构建重组质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导获得高效表达 ,SDS PAGE蛋白电泳表明在 39 9kD处出现超强特异带 ,占总蛋白的5 1%。以Ni NTA Conjugate抗体进行Westernblot分析证明该 39 9kD的蛋白为所表达的融合蛋白。纯化融合蛋白注射雄性新西兰大白兔可诱导产生特异抗体。ELISA和Westernblot检测结果显示 ,该抗体与表达的融合蛋白和从嗜水气单胞菌中提取的 36 9kD外膜蛋白均呈阳性反应 ,表明所表达的融合蛋白仍保持原有外膜蛋白的免疫原性 。
- 谢俊锋叶巧真何建国戴伟君黄晓何鸣筱陈诚
- 关键词：嗜水气单胞菌基因表达免疫原性水产动物疫苗
- 三株弧菌热休克蛋白70基因的克隆和序列分析
- 2009年
- 根据GenBank中同类蛋白序列设计特异PCR引物,从2株创伤弧菌Vibrio vulnificus和1株河弧菌Vibriofluvialis中扩增出热休克蛋白70(heat shock protein,hsp70)基因片段。对这3个片段进行克隆、测序和分析的结果表明,3个片段长均为1 911 bp,包含完整的hsp70 ORF,编码636个氨基酸。它们的氨基酸序列与GenBank中其它物种hsp70的氨基酸序列比较发现,2株创伤弧菌hsp70基因序列和同种其它菌株的同源性高,达98%以上;而河弧菌的hsp70序列属首次克隆;与多种原核和真核生物的hsp70氨基酸序列一起构建了系统进化树,结果支持传统的分类结果。
- 黄东东何鸣筱吕玲翁少萍常迪邓先余何建国
- 关键词：VULNIFICUS
- 嗜水气单胞菌外毒素和外膜蛋白双基因融合表达载体的构建和高效表达被引量：11
- 2004年
- 用基因融合方式 ,以嗜水气单胞菌基因组DNA为模板 ,设计引物通过聚合酶链式反应 (PCR)把去除部分毒性活性编码区的细胞毒肠毒素基因 (act)与去除信号肽的外膜蛋白基因 (OmpTS)连接一起 ,两基因之间插入一个link er(Gly4Ser) 3 经BamHⅠ和HindⅢ双酶切 ,得到 2 .1kb的双基因融合片段 ,克隆于表达质粒pQE 30中 ,构建了双基因重组表达载体pQE30 /act GS ompTS ,转化大肠杆菌M15 (pREP4 ) ,经IPTG诱导 ,表达出预期大小 (81.0kD)的融合蛋白Act GS OmpTS ,此蛋白占菌体总蛋白的 4 2 %。Westernblot检测结果显示 ,该蛋白与抗Act兔血清和抗OmpTS兔血清都呈阳性反应 ,表明融合蛋白保留了外毒素和外膜蛋白的反应原性 。
- 何鸣筱叶巧真陈诚谢俊锋何建国
- 关键词：嗜水气单胞菌外膜蛋白基因融合基因表达
- 嗜水气单胞菌外毒素和外膜蛋白二价基因工程疫苗的初步研究
- 该文围绕嗜水气单胞菌（Aeromonashydrophila）的二价基因工程疫苗进行研究.细胞毒肠毒素（Aeromonascytotoxicenterotoxin,Act）和外膜蛋白（Outermembraneprote...
- 何鸣筱
- 关键词：嗜水气单胞菌外膜蛋白
- 文献传递
