何刚
- 作品数:6 被引量:4H指数:1
- 供职机构:第三军医大学更多>>
- 发文基金:重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- TCF4N剪接异构体在食管癌细胞中的表达研究被引量:1
- 2014年
- 目的证实食管癌中TCF4N剪接异构体的存在,并初步探讨其功能。方法采用RT-PCR方法扩增,并PCR产物测序鉴定。克隆TCF4N剪接异构体并构建真核表达载体,将其转染EC109细胞高效表达,检测其对细胞生物学特性的影响。结果在癌细胞株中,TCF4N剪接异构体被证实存在。对比食管癌组织与癌旁组织发现TCF4N异构体在癌组织中表达显著降低(P<0.05)。成功构建了TCF4N表达载体,在EC109细胞中获得高效表达。功能分析显示:增强TCF4N表达可抑制EC109细胞的增殖,影响细胞周期的分布,并抑制TCF4的转录活性。结论在人食管癌中具有抑制功能的TCF4N剪接异构体与食管癌的发生有一定关联。
- 罗超何刚官兴颖唐敏刘双甘生敏李娟彭志平章波
- 关键词:TCF4剪接异构体食管癌转录活性
- 慢病毒介导shRNA沉默HDAC1表达对EC109细胞生长特性的影响被引量:1
- 2013年
- 目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效沉默食管癌细胞株EC109的HDAC1表达并观察其对细胞生长的影响。方法以HDAC1为靶基因,合成寡核苷酸,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoRⅠ酶切后的pGCSIL-PUR载体连接获得重组慢病毒载体;将其与病毒复制包装质粒共感染293T细胞,收集并浓缩上清液获得重组病毒,测定病毒滴度;病毒颗粒转染EC109细胞,通过荧光显微镜等观察转染效率并经有限稀释法获得单克隆来源的细胞系;定量PCR及Western blot检测HDAC1的表达;并观察EC109细胞的生长特性。结果成功构建干扰HDAC1表达的慢病毒载体pGCSIL-SiHDAC1,并在293T细胞中包装获得病毒。重组病毒感染EC109细胞后,HDAC1mRNA和蛋白水平检测显示干扰组细胞的HDAC1的表达水平较对照组显著降低(P<0.05)。HDAC1下调的EC109细胞的增殖能力明显下降(P<0.05)。结论慢病毒介导的shRNA能有效的沉默食管癌细胞EC109中的HDAC1的表达,并且能抑制其细胞的增殖。
- 刘洋博何刚章波庞学利
- 关键词:HDAC1慢病毒食管癌细胞
- 一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选方法
- 本发明涉及一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选方法,包括如下步骤:将包含6个串联重复TCF4转录因子的7TFP质粒采用慢病毒转移的方式转染宿主细胞形成稳定细胞株,并种植于96孔培养板,过夜贴壁后更换培养基,并加入待测样品,取...
- 章波庞学利黄钢何刚徐小峰宋敏
- 文献传递
- T细胞因子4的选择性剪接与肿瘤被引量:2
- 2015年
- TCF4属核内转录因子,在Wnt/β-catenin信号途径中可调控下游基因表达。TCF4有着分子(开关)的双重作用,可表现为转录激活或转录抑制的作用,影响一系列基因的表达,在胚胎的发育及肿瘤的发生发展中起重要的作用。TCF4在转录后加工过程中存在选择性剪接,可形成多种mRNA剪接异构体,编码产生不同功能结构域的蛋白,进而对下游多种基因的转录进行活性调节。TCF4及其剪接异构体的异常调控与肿瘤的发生发展密切相关。
- 罗超何刚彭志平章波
- 关键词:TCF4选择性剪接基因表达与调控肿瘤发生
- 白细胞介素-2对Allo-HSCT后白血病早期复发患者治疗效果的临床研究
- 目的:观察白细胞介素-2 (IL-2)对异基因造血干细胞移植术(Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,Allo-HSCT)后白血病早期复发患者的治疗效果.方...
- 向茜茜秦先念彭贤贵孙爱华刘耀孔佩艳张曦陈幸华李佳丽何刚李杰平刘红
- 一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选方法
- 本发明涉及一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选方法,包括如下步骤:将包含6个串联重复TCF4转录因子的7TFP质粒采用慢病毒转移的方式转染宿主细胞形成稳定细胞株,并种植于96孔培养板,过夜贴壁后更换培养基,并加入待测样品,取...
- 章波庞学利黄钢何刚徐小峰宋敏