仇玉明 作品数:12 被引量:50 H指数:5 供职机构: 华中科技大学同济医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河北省科学技术研究与发展计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
RGD肽联合转化生长因子-β_1对组织工程瓣膜构建的影响 被引量:13 2006年 细胞对支架的黏附和生长是构建组织工程心脏瓣膜(tissue engineering heart valve,TEHV)的关键环节。去细胞瓣被认为是一种较理想的TEHV支架,本实验率先采用RGD肽(精-甘-天冬氨酸,Arg-Gly-Asp)表面修饰以促进细胞黏附,联合种植转化生长因子-β1(TGF-β1)基因转染细胞以促进细胞及细胞外基质(ECM)增生,观察两种生物活性分子对去细胞瓣体外构建TEHV的影响。 史嘉玮 董念国 孙宗全 仇玉明关键词:RGD肽 组织工程瓣膜 组织工程心脏瓣膜 基因转染细胞 细胞黏附 转化生长因子β_1对组织工程瓣膜体外构建的作用 被引量:2 2007年 目的研究转化生长因子β_1(TGF-β_1)对组织工程瓣膜(TEHV)体外构建的影响。方法采用酶+去污剂法制备去细胞瓣。脂质体介导 pcDNA3.0/TGF-β_1基因转染大鼠肌成纤维细胞,48 h 后 G418筛选3周使 TGF-β_1基因稳定表达。去细胞瓣种植转基因细胞为实验组 A,种植未转基因细胞且加 TGF-β_1(10μg/L)为实验组 B,种植未转基因细胞不加 TGF-β_1为对照组。2周后 HE染色和扫描电镜观察,检测羟脯氨酸和 DNA 含量及瓣叶最大负荷力。结果 SABC 法示转染48 h 和4周后肌成纤维细胞瞬时和稳定表达 TGF-β_1。形态学示实验组 A、B 细胞紧密联合且细胞外基质丰富。羟脯氨酸含量 A 组(5.83‰±0.67‰)和 B 组(5.02‰±0.40‰),均高于对照组(4.34‰±0.47‰);DNA 含量 A 组(0.126‰±0.013‰)和 B 组(0.109‰±0.004‰)均高于对照组(0.089‰±0.011‰);最大负荷力 A 组(13.4±1.0)N 和 B 组(11.8±1.4)N 均高于对照组(10.0±1.1)N 增高。结论 TGF-β_1能促进细胞生长和细胞外基质分泌,有利于提高 TEHV 力学性能。 董念国 仇玉明 史嘉玮关键词:心脏瓣膜 转化生长因子Β 转染 脱细胞天然支架生物力学性能变化及预处理改善组织相容性的实验研究 被引量:7 2007年 目的观察脱细胞猪主动脉瓣的生物力学性能变化,探讨不同预处理改善天然支架组织相容性的效果。方法新鲜猪主动脉瓣经酶加去污剂法去除细胞,力学测试仪检测其最大负荷、最大应力、最大应变和弹性模量的变化,苏木精一伊红(HE)染色、Ⅰ型胶原免疫组化染色和扫描电镜观察其病理形态学变化;将脱细胞瓣膜分别予磷酸缓冲液、多聚赖氨酸和未灭活胎牛血清包被处理,然后种植大鼠主动脉肌成纤维细胞,甲基噻唑基四唑试验检测细胞黏附率,HE 染色和扫描电镜观察形态学变化。结果酶加去污剂法能完全脱去瓣膜细胞,基本维持胶原纤维的空间结构,但其最大负荷、最大应力及弹性模量下降,最大应变上升(P<0.05);胎牛血清预处理去细胞瓣能显著提高肌成纤维细胞的黏附率,促进细胞生长、分化和增殖,并在瓣膜表面形成连续的细胞层(F 值=129.26,P=0.000)。结论酶加去污剂法可较完全去除猪主动脉瓣膜细胞并保持细胞外基质的三维结构,但其生物力学性能有所下降;胎牛血清预处理能改善脱细胞瓣天然支架的细胞黏附、生长和繁殖。 董念国 叶晓峰 孙宗全 史嘉玮 仇玉明 陈家军关键词:主动脉瓣 生物力学 组织相容性 心脏瓣膜 转化生长因子-β1在组织工程心脏瓣膜构建中的应用 第一部分转化生长因子-β1对体外构建组织工程心脏瓣膜的作用研究目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)在组织工程心脏瓣膜(TEHV)体外构建中的作用。方法经胰酶/EDTA、去污剂TritonX-100和核酸酶处理,去除... 仇玉明关键词:心脏瓣膜 转化生长因子 基因转染 肌成纤维细胞 文献传递 人重组促红细胞生成素预处理对缺血再灌注心肌血流动力学、心肌酶谱和超微结构的影响 被引量:11 2005年 目的 研究人重组促红细胞生成素(rHuEPO) 对离体缺血再灌注心脏的血流动力学、心肌酶谱和超微结构的影响。方法 利用Langendorff离体心灌注模型平衡30min, 给予停搏液使心脏停跳90min, 再灌注60min。16只Wistar大鼠(雌雄不拘) 随机分为两组: 对照组、rHuEPO预处理组。预处理组大鼠实验前24h于腹腔给予rHuEPO5 000U/kg。观察两组再灌注后血流动力学指标、冠脉流出量、心肌酶谱(CK、LDH), 电镜观察心肌超微结构。结果 预处理组大鼠血流动力学、冠脉流出量及心肌酶谱改善情况显著优于对照组(P<0. 01 ); 电镜示: 预处理组大鼠心肌肿胀轻, 线粒体及肌丝等超微结构损伤小。结论 rHuEPO预处理对离体心肌缺血再灌注损伤有良好保护作用, 可望成为心外科极具应用前景的促进造血、心肌保护和脑保护的药物。 仇玉明 王征 董念国关键词:人重组促红细胞生成素 心肌酶谱 缺血再灌注心肌 LANGENDORFF 离体缺血再灌注 灌注模型 RGD肽固定对组织工程心脏瓣膜构建的作用 被引量:2 2006年 目的探讨促黏附分子 RGD 肽(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸)固定去细胞瓣在组织工程心脏瓣膜(TEHV)构建中的作用。方法酶+去污剂法制备去细胞瓣支架,在耦联剂 Sulfo-LC-SPDP 作用下甘-精-甘-天冬-丝-脯-半胱氨酸(GRGDSPC)肽与之化学结合,然后在其表面种植大鼠肌成纤维细胞,构建 TEHV。体外培养2周后取出瓣叶,作 HE 染色和扫描电镜观察,检测羟脯氨酸反映胶原含量,检测 DNA 反映细胞增殖,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Ⅰ型胶原、赖氨酰氧化酶(LOX)mRNA的表达。结果与对照组比较,经肽固定的实验组瓣膜细胞密集且组织致密,羟脯氨酸和 DNA 含量增高,Ⅰ型胶原、LOX mRNA表达增强。结论采用 RGD 肽表面修饰去细胞瓣,不仅可显著提高支架黏附性,而且可促进细胞生长和胶原分泌,有利于 TEHV的构建。 史嘉玮 董念国 孙宗全 仇玉明关键词:RGD肽 组织工程心脏瓣膜 去细胞瓣 对氧磷酯酶1与2型糖尿病并发冠心病相关因素分析 被引量:2 2004年 目的 分析对氧磷酯酶 1(PON1)的活性与 2型糖尿病各种相关因素 (血压、血脂、血糖、病程等 )的相互关系 ,研究PON1活性变化对 2型糖尿病并发冠心病的影响。方法 以对氧磷 (paraoxon)为底物 ,测定 4 9例对照组、10 3例2型糖尿病患者空腹血清PON1活性 ,同时测定各组血脂、血糖、血压、肝功能、肾功能等。结果 对照组血清PON1的活性明显高于 2型糖尿病组 ,差别有显著性意义 (P <0 0 1)。 2型糖尿病组TC、TG高于对照组 ,有显著性差异 (P <0 0 1)。 2型糖尿病并发冠心病组血清PON1活性低于 2型糖尿病无并发症组 (P <0 0 1)。 2型糖尿病并发冠心病组的TC、LDL高于无并发症组 (P <0 0 5 )。相关分析 :PON1活性与TC、LDL呈负相关 (P <0 0 1)。PON1活性与HDL呈正相关 (P <0 0 5 )。PON1活性与收缩压、舒张压均呈负相关 (P <0 0 5 )。TC、LDL、收缩压和PON1为 2型糖尿病并发冠心病的危险因素。对照组血清PON1活性为 10~ 70 8IU/L ,2型糖尿病组为 4~ 4 76IU/L。结论 血清PON1活性与2型糖尿病并发冠心病明显相关。PON1活性、收缩压、总胆固醇、LDL是 2型糖尿病并发冠心病的重要危险因素。 尹建丽 孙亚威 仇玉明 尚可关键词:对氧磷酯酶1 2型糖尿病 冠心病 转化生长因子-β_1对体外构建组织工程瓣膜的实验研究 被引量:9 2006年 目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)在组织工程心脏瓣膜(TEHV)体外构建中的作用。方法经胰酶/EDTA、去污剂Triton X-100和核酸酶处理,去除猪主动脉瓣叶的细胞成分,然后在其表面种植大鼠肌成纤维细胞,构建TEHV。实验组培养基中添加TGF-β1(10ng/ml),对照组采用普通培养基。体外培养2周后取瓣叶,行HE染色和扫描电镜观察,并检测羟脯氨酸、DNA含量及瓣叶最大负荷力,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测瓣膜细胞MMP-13和TIMP-1mRNA的表达。结果HE染色和扫描电镜显示实验组较对照组的细胞联合紧密且细胞外基质更丰富,羟脯氨酸含量和DNA含量增高,最大负荷力提高,MMP-13mRNA和TIMP-1mRNA的表达增强。结论TGF-β1在TEHV体外构建过程中具有积极作用,能为种子细胞生长提供有利因素,促进细胞增殖和细胞外基质分泌,提高瓣膜的最大负荷力。 仇玉明 董念国 史嘉玮 叶晓峰关键词:组织工程心脏瓣膜 转化生长因子-Β1 细胞外基质 转化生长因子-β1对天然支架组织工程瓣膜作用 被引量:2 2006年 构建组织工程心脏瓣膜(TEHV)关键在体外重建宏观、微观培养环境。我们以去细胞瓣作天然支架,肌成纤维细胞作种子细胞,观察转化生长因子(TGF)-β1对TEHV微环境影响。 仇玉明 董念国 史嘉玮 叶晓峰关键词:转化生长因子-Β1 组织工程瓣 组织工程心脏瓣膜 肌成纤维细胞 体外重建 精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽固定去细胞瓣构建组织工程瓣膜的实验研究 被引量:1 2006年 目的:研究促黏附分子精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)肽对去细胞瓣组织工程心脏瓣膜(TEHV)构建的影响。方法:酶+去污剂法制备去细胞瓣天然支架,应用化学交联剂Sulfo-LC-SPDP,使GRGDSPC肽与之稳定结合,然后表面种植大鼠肌成纤维细胞以构建TEHV。实验组采用GRGDSPC肽固定去细胞瓣,对照组则为未处理去细胞瓣。体外培养1周后取瓣叶,作苏木精-伊红(H-E)染色和扫描电镜观察,检测羟脯氨酸和DNA含量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测瓣膜Ⅰ型胶原、赖氨酰氧化酶(LOX)mRNA表达。结果:与对照组比较,实验组形态学显示细胞紧密联合且胞外基质丰富,羟脯氨酸和DNA含量值增高,Ⅰ型胶原、LOX mRNA表达增强。结论:RGD肽表面修饰去细胞瓣,提高天然支架细胞黏附性,促进种子细胞生长、繁殖与细胞外基质分泌,有利TEHV构建。 史嘉玮 董念国 孙宗全 仇玉明关键词:RGD肽 去细胞瓣 细胞黏附 组织工程心脏瓣膜