于晓宇
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：广西师范大学生命科学学院珍稀濒危动植物生态与环境保护省部共建教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程更多>>
- 产酸克雷伯氏菌基因组文库的构建及鉴定被引量：2
- 2016年
- 为了给基因功能研究提供基础,以pWEB^(TM)质粒构建产酸克雷伯氏菌KO108基因组文库,克隆数目为1 329个。通过EcoRⅠ酶切分析随机挑取的20个文库克隆的重组质粒,结果显示所有质粒均有8.2kb载体条带同时含有外源DNA,且外源DNA的带型并不相同,这表明所构建的KO108基因组文库中插入的外源DNA随机性较好。分析外源DNA电泳条带的大小,结果显示克隆的外源DNA片段最小约为25kb,最大约为50kb,平均大小估算为40kb,文库克隆容量约52Mb,证明该基因组文库包含基因组任意一个基因的概率为99.8%,是KO108基因组覆盖率的5倍。该文库的构建为产酸克雷伯氏菌功能基因克隆和比较基因组学研究奠定了基础。
- 江绍锋黄金清于晓宇李云飞陆祖军
- 关键词：基因组文库库容
- 产酸克雷伯氏菌游动性减弱突变体的筛选
- 2017年
- 以产酸克雷伯氏菌KO108为研究对象,通过构建转座子突变体文库,筛选获得2株游动性显著降低的突变菌株,并以转座子mTn5gusA-pgfp21构建突变体库,利用地高辛生物标记gfp基因序列作为探针,Southern杂交验证突变体库的质量,根据杂交条带判断mTn5gusA-pgfp21转座子插入染色体的拷贝数,以反向PCR获取未知序列,通过基因组学分析预测游动性相关基因。结果表明:产酸克雷伯氏菌KO108具Kan抗性标记、GUS活性、GFP遗传标记的突变体库可由两亲结合经转座子mTn5gusA-pgfp21转座突变获得;随机选择100株突变体进行游动性筛选,仅获得2株游动性显著降低的目标菌株MA和MD;MA、MD与KO108差异显著(P<0.05),而MA和MD之间没有显著差异;Southern杂交结果显示MA和MD的转座子mTn5gusApgfp21为单插入,且插入位点所在的酶切片段大小不同;经反向PCR、测序、序列分析,发现MA突变基因为醌类氧化还原酶(NAD(P)H:quinone oxidoreductase)(NQR)基因簇的NqrA,MD突变基因为LPS脂多糖生物合成基因簇基因;生长曲线检测显示KO108和MA、MD无显著差异;菌膜检测发现MD与KO108、MA有一定差异,但KO108与MA之间无显著性差异;以Biolog ECO检测KO108和MA、MD的碳源利用情况,结果表明MA和MD 72h后仍然不能利用羧酸类碳源D-半乳糖酸γ-内酯和2-羟基苯甲酸。
- 江绍锋黄金清于晓宇李云飞蓝运华陆祖军
- 关键词：突变体
- 对菌根分泌物强趋性产酸克氏菌突变体的筛选被引量：3
- 2014年
- 体积分数0.01％和0.001％的桉树油悬浮液与苗期桉树-彩色豆马勃菌根、桉树根、彩色豆马勃菌Pisolithus tinnctorius分泌物对随机突变的产酸克氏菌Klebsilla oxytoca进行趋性筛选,得到1株较野生株对桉树-彩色豆马勃菌菌根分泌物趋向性强1～2倍的突变株菌株TR-M30-1.该菌株为建立桉树-彩色豆马勃菌-产酸克氏菌三元互利共生体系提供了材料.
- 于晓宇江绍锋蓝运华夏樱花李云飞陆祖军
- 关键词：桉树菌根分泌物趋性
- 高中生物学遗传与变异实验课教学案例开发被引量：2
- 2012年
- 通过接合作用,大肠杆菌携带的质粒载体pFAJ1819::mTn5gusA-pgfp21转入目标受体菌催娩克氏菌;载体上的转座子mTn5gusA-pgfp21携带的葡萄糖苷酸酶基因(gusA,无启动子)、卡那霉素抗性基因(nptII,有启动子)和2个绿色荧光蛋白基因(gfp,有启动子)插入到催娩克氏菌的基因组DNA中;借助绿色荧光蛋白、gusA及卡那霉素抗性基因的表达,形成的表型直观变化展示细菌的遗传与变异现象,可以作为高中生物学实验的教学案例。
- 于晓宇麻维华周巧劲陆祖军
- 关键词：实验课教学案例
- 桉树林地与甘蔗地微生物热代谢活性比较被引量：1
- 2014年
- 微量热法被用于分析连续种植桉树Eucalyptus granddis×E.uophylla、甘蔗的地块的土壤微生物代谢活性。于雨季和旱季分别从接壤的种植桉树、甘蔗地块采集土壤样品(样地大小10m×10m,各采500g),加入含5.0mg葡萄糖和5.0mg硫酸铵的0.6mL溶液的1.2g土壤样品被用于微量热法实验,温度设定为28℃;另外,土壤的理化和生物学特性也被测定,用于共同反映土地经营模式对土壤质量的影响。结果:(1)无论是雨季还是旱季,甘蔗连续种植地土壤内发酵型细菌为土壤微生物主要类群,但桉树林地只有雨季时发酵型细菌占优势;(2)与甘蔗连续种植地相比,桉树林地的土壤密实度较低,土壤微生物组成和代谢活动的季节性波动程度较高;(3)相对于桉树,甘蔗的连续种植对土壤微生物代谢活性产生较大的抑制作用。
- 杨林林江绍锋于晓宇夏樱花蓝运华陆祖军
- 关键词：微量热法土壤微生物桉树甘蔗
