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黄春媚
作品数:
2
被引量:5
H指数:1
供职机构:
北京大学生命科学学院
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相关领域:
生物学
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合作作者
胡美浩
北京大学生命科学学院
陈来同
北京大学生命科学学院
张曼
北京大学生命科学学院
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黄春媚
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1996
1篇
1995
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去B链羧端三肽人胰岛素的分离纯化及其性质研究
被引量:5
1996年
将去B链羧端三肽人胰岛素原基因克隆到表达质粒pBV220上,在大肠杆菌系统中经温度诱导表达,表达产物占细胞总蛋白量的12%,表达产物经SephadexG-50柱层析分离以及胰蛋白酶和羧肽酶B的酶促转化等步骤,可得到去B链羧端三肽人胰岛素,其纯度达93%,其氨基酸组成与预期值相符,但其受体结合活性仅是标准猪胰岛素的45%.
陈来同
黄春媚
张曼
杨志茹
胡美浩
关键词:
胰岛素
人胰岛素
提纯
去B链羧端三肽人胰岛素原的基因构建和表达
1995年
用改进的寡核苷酸诱导突变法将人胰岛素原基因(BCA)删除编码B链羧端三肽(28~30残基)的碱基片段,得到去B链羧端三肽胰岛素原的基因(B ̄(-3)CA)。为了便于表达产物的蛋白质后加工,又用PCR的方法在B链N端起始Met与Phe密码子之间增加了编码Lys的3个碱基,得到改造后基因LB ̄(-3)CA。将LB ̄(-3)CA克隆到表达质粒pBV220上,在大肠杆菌系统中热诱导表达,表达率为12%。表达产物经蛋白质后加工,得到的去B链羧端三肽人胰岛素(DTEIB28~30人胰岛素)其受体活性和放免活性分别是猪胰岛素的45%和49%。
黄春媚
陈来同
陈仁馨
胡美浩
关键词:
胰岛素
基因表达
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