魏兰珍
- 作品数:25 被引量:33H指数:4
- 供职机构:华东师范大学更多>>
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- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 环境因子对转hGM-CSF基因鱼腥藻生长与光合的调节被引量:4
- 2007年
- 以转hGM-CSF基因鱼腥藻7120为对象,分别探讨了温度、pH、光强等环境因子和外加碳、氮等基本营养源对转基因藻生长与光合活性的影响.结果表明:当基本环境因子为30℃、pH9.5和90μmol·m-2·s-1光强时,转基因藻生长最快.添加10mmol·L-1的NaHCO3或5g·L-1的葡萄糖对转基因藻的光合活性促进最大;但外加氮源却抑制了转基因藻的光合活性.
- 魏兰珍康升云严君君马为民王全喜
- 关键词:鱼腥藻7120转基因蓝藻环境因子光合活性
- 一种体外高效提高蓝藻藻胆体向光系统II传能的SGB缓冲液
- 本发明公开了一种体外高效提高蓝藻藻胆体向光系统II传能的SGB缓冲液,由以下组分组成:0.6-0.9M蔗糖,0.4-0.6M磷酸盐,0.2-0.4M柠檬酸盐和0.5-1.2M甜菜碱。与常规SPC缓冲液相比,本发明SGB缓...
- 马为民陈李萍高复旦马宇恒魏兰珍王全喜
- 文献传递
- hGM-CSF基因穿梭表达载体的构建及其在鱼腥藻7120中的克隆被引量:7
- 2005年
- 人粒—巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)作为一种造血生长因子,能够刺激T细胞和巨噬细胞增殖、成熟和分化,具有极其重要的免疫调解功能。本研究运用PCR方法,从质粒pAG-MT-8中克隆该基因,并在其5′端添加有利于在蓝藻细胞中高效表达的SD序列,然后插入到表达载体(pRL-439)强启动子PpsbA的下游,进一步与穿梭表达载体pDC-08相连构建成穿梭表达载体pDC-GM。利用三亲接合转移方法将该穿梭表达载体(pDC-GM)转入丝状鱼腥藻7120,通过相应抗生素筛选后得到能稳定遗传的转基因藻。以该转基因藻的基因组DNA为模板进行PCR检测,结果表明hGM-CSF基因已转入鱼腥藻7120。这是首次尝试把蓝藻作为制备重组hGM-CSF的新宿主,具有潜在的经济价值和社会效益。
- 魏兰珍金锐马为民施定基甘人宝王全喜
- 关键词:鱼腥藻7120基因克隆造血生长因子
- 启动子Pcpcβ提高集胞藻6803中外源eGFP表达效率的研究
- 蓝藻又称蓝细菌(cyanobacteria),是一类能进行光合放氧作用的原核生物。因其作为表达外源基因的宿主具有下游加工过程简单、不含内毒素等特点,目前受到人们的广泛关注。然而,外源基因表达效率低下一直制约着蓝藻基因工程...
- 康升云魏兰珍王全喜
- 文献传递
- groESL启动子提高集胞藻6803中外源egfp基因表达效率的研究
- 蓝藻是一类能进行光合放氧的原核生物,其适应性强,兼有植物及细菌的一些特性,因此又被称为蓝细菌。蓝藻的光合机制与高等植物叶绿体类似,有些种类还具有能进行固氮、氢代谢的异型胞,现已成为光合、固氮、叶绿体起源以及植物进化等研究...
- 郭正红魏兰珍王全喜
- 关键词:增强型绿色荧光蛋白集胞藻6803
- 文献传递
- groESL启动子提高集胞藻6803外源egfp基因表达效率的研究
- 2010年
- 利用聚球藻7942中热激蛋白基因groESL的启动子(PgroESL)驱动外源egfp基因在集胞藻6803(Syn-echocystis sp.PCC6803)中的表达,通过蛋白免疫印迹技术研究不同温度条件下该外源基因的表达情况。结果表明,42℃诱导30min后,PgroESL启动子能显著提高转基因藻Pg中外源egfp基因的表达,使外源基因的表达量比正常温度条件下提高3.4倍。研究表明,聚球藻7942中groESL操纵子的启动子区域是一类可以受温度诱导的强启动子,能够显著提高宿主细胞中外源基因的表达效率。
- 郭正红魏兰珍王全喜
- 关键词:增强型绿色荧光蛋白集胞藻6803
- NaHSO3对盐胁迫下盐生杜氏藻光合机构的调控
- <正>盐生杜氏藻(Dunaliella salina,简称盐藻)是一种单细胞无细胞壁真核光合自养绿藻,属杜氏藻科杜氏藻属,是真核生物中抗盐性最强的一种藻类,可在含0.05-5.5mol·L-1NaCl的培养液中生存。同时...
- 程建峰马为民魏兰珍沈允钢
- 关键词:亚硫酸氢钠盐胁迫光合机构
- 文献传递
- 利用同源重组构建蓝藻集胞藻6803ndhO基因突变株及其分子鉴定被引量:3
- 2010年
- 蓝藻NADPH脱氢酶(NDH-1)是一种重要的光合膜蛋白复合体,参与CO2吸收、围绕光系统I的循环电子传递和细胞呼吸。迄今为止,人们在蓝藻细胞中已鉴定出15种NDH-1复合体亚基(NdhA-NdhO)。然而,人们对NdhO亚基的研究尚不够,至今未见有反向遗传学等方面的研究。在通过构建同源重组载体、自然转化和多次继代筛选后,对转化子进行了PCR和蛋白免疫印迹鉴定。结果表明,卡那霉素基因已成功地插入到ndhO基因的保守区域,并完全破坏了ndhO基因的蛋白表达,从而获得了ndhO基因缺失的突变株,为进一步研究NdhO亚基对NDH-1复合体的稳定性和生理功能等奠定了实验基础。
- 龙宗娟赵娇红魏兰珍王全喜马为民
- 关键词:集胞藻6803
- 鱼腥藻Ⅱ型果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达被引量:7
- 2006年
- 随着更多蓝藻全基因组序列测定完成,蓝藻基因工程研究现已进入后基因组时代。2001年Kaneko等完成了鱼腥藻7120全基因组序列测定,随后人们利用生物信息学的方法对其中一些基因的功能进行了预测,包括II型果糖1,6二磷酸醛缩酶(FBA)基因,但该基因是否编码II型果糖1,6二磷酸醛缩酶及该产物的相关酶学特性至今尚未见报道。通过PCR克隆到鱼腥藻7120中预测的II型FBA基因,插入到质粒pET32a的相应位点,构建成原核表达载体pETFBAII。蛋白电泳结果显示,重组蛋白的表达量占总蛋白含量的23.4%,与蛋白分子标记相比,其分子量约为40kDa。酶学活性测定结果表明,其蛋白粗提物的比活力为11.8U(mgprotein)-1,具有标准II型FBA活性。证实了Cyanobase中关于该基因功能的预测,也为进一步研究该基因表达产物的生理生化特性及功能提供了重要资料。
- 魏兰珍崔轶文马为民王全喜
- 关键词:果糖-1,6-二磷酸醛缩酶鱼腥藻7120酶活
- 外源基因在集胞藻6803中高效表达及调控的研究
- 蓝藻是一类能进行光合放氧作用的原核生物。集胞藻6803 /(Synechocystis sp. strainPCC 6803/)是一种单细胞蓝藻。该株系具有天然DNA转化系统,细胞结构简单,生长速度快,适应性强,是第一个...
- 魏兰珍
- 关键词:集胞藻6803增强型绿色荧光蛋白SD序列
- 文献传递