雷迎峰
- 作品数：125 被引量：222H指数：6
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学文化科学更多>>
- 丙型肝炎病毒C区截短型基因原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2005年
- 目的建立稳定表达丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白的原核表达系统,获得高产量的纯化核心蛋白。方法应用多聚酶链反应(PCR),以HCV-H株全长cDNA序列为模板,扩增获得C区羧基端部分缺失的基因片段,克隆入原核表达载体pBVIL1,构建原核表达载体pBVIL1-Ct,转化HB101宿主菌,通过温度诱导表达截短型C蛋白。结果扩增得到目的基因长度为462bp,构建pBVIL1-Ct表达载体,在HB101宿主菌中通过温度诱导获得稳定表达,表达蛋白占菌体总蛋白含量的24%。Western-Blot及ELISA检测证实表达产物可与HCV患者阳性血清发生特异性结合反应。结论羧基端部分缺失的HCV C区基因片段可在大肠杆菌中稳定表达并具有良好的反应原性。
- 胡刚董晓慧薛小平楚雍烈尹文雷迎峰
- 关键词：核心蛋白大肠杆菌
- 天花粉蛋白的定点突变及聚乙二醇修饰
- 2008年
- 目的对天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)进行定点突变及聚乙二醇(PEG)修饰,并对修饰产物进行DNA酶活性分析。方法选择TCS分子上可能的抗原决定簇位点(YFF81-83和KR173-174)进行定点突变,将所构建的两个突变体(TCSYFF81-83ACS和TCSKR173-174CG)在大肠杆菌中表达,并纯化表达产物。通过第82位和173位引入的半胱氨酸残基,分别对突变体蛋白进行PEG定点修饰。通过与突变型TCS比较,分析两个PEG修饰型TCS的DNA酶活性。结果突变的TCS经酶切鉴定及测序分析,证明质粒构建正确,表达的目的蛋白相对分子质量约为30000,经PEG修饰后,相对分子质量约为40000。初步分析显示,与突变型TCS相比,所构建的两个PEG修饰型TCS也显示出类似DNA酶活性。结论成功进行了TCS的定点突变及PEG修饰,为基因工程及化学修饰方法改造TCS提供了一条可行的途径。
- 安群星雷迎峰穆士杰张献清陈蕤夏爱军陈晨易静吴原茹徐志凯
- 关键词：天花粉蛋白定点突变聚乙二醇修饰
- 抗HBV与HCV免疫乳的实验免疫研究被引量：3
- 2005年
- 确定重组HBV表面抗原和HCV核心抗原对奶牛的最适免疫剂量、免疫次数及间隔时间,观察牛奶中抗HBV与抗HCV的效价与消长规律。表达HBV表面抗原和HCV核心抗原的重组菌经IPTG诱导后,目的蛋白以包涵体形式存在。放大发酵工艺,菌体发酵密度达40g/L,目的蛋白表达量为26%～30%。将包涵体变性、复性后,测定蛋白含量,并用SDS-PAGE鉴定。采用不同的剂量和不同的抗原处理方法免疫奶山羊和奶牛,检测HBV抗体、HCV抗体、干扰素与白介素等细胞因子。免疫奶山羊羊奶中的HBV抗体效价最高为1∶80,HCV抗体效价最高为1∶20;6个月后,HBV抗体效价无明显下降,HCV抗体效价下降明显。对奶牛5个批次的免疫结果显示,免疫次数应多于3次,免疫剂量以每头牛300μg为宜,间隔时间以1个月为宜。免疫牛奶中HBV抗体的阳性率约为66.0%,抗体效价最高为1∶160;HCV抗体阳性率约为17.0%,维持时间较短;孕牛比旺奶牛产生抗体的效价高。免疫牛奶中检测到了干扰素和白介素等细胞免疫活性因子。
- 尹文雷迎峰杨敬张为吕欣薛小平徐志凯韦三华李毅刘兵
- 关键词：乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒
- HCVNS3-5B转基因小鼠模型的构建
- 目的：构建表达HCV NS3-5B 蛋白的转基因小鼠模型。方法：显微注射线性化pIRES2-EGFP-NS3-5B 载体到小鼠受精卵，制备并传代筛选HCV NS3-5B 转基因小鼠;通过血清ALT、AST 检测和肝脏HE...
- 赵海卫吕欣雷迎峰姚敏乔卿华韩佩君张芳琳徐志凯尹文
- 关键词：丙型肝炎病毒动物模型
- 基孔肯雅病毒疫苗的研究进展
- 2015年
- 基孔肯雅热是由基孔肯雅病毒(Chikungunya virus,CHIKV)引起的一种急性传染病。基孔肯雅病毒属披膜病毒科甲病毒属。近年来,该病毒死灰复燃,在全球多处引发大规模疫情暴发,是重要的全球性公共卫生问题之一。目前尚无针对CHIKV的疫苗和有效抗病毒药物。疫苗一直是CHIKV研究的热点领域,目前已经取得了很大的进展,就基孔肯雅病毒疫苗的研究进展进行了综述。
- 陈学敏雷迎峰
- 关键词：基孔肯雅病毒疫苗疫情暴发公共卫生问题
- 肥大细胞在病毒感染中的作用被引量：4
- 2017年
- 自从Paul Ehrlich于1878年首次发现肥大细胞以来,肥大细胞作为过敏反应中非常重要的效应细胞之一被广泛研究。直到近20年,人们才逐渐认识到肥大细胞参与多种病理、生理过程,尤其是在机体抗感染、免疫与免疫病理损伤中也发挥着重要作用。随着人们对肥大细胞在细菌和寄生虫的抗感染、免疫中作用的理解不断深入,肥大细胞在病毒感染及病毒引起的相关疾病中的作用逐渐成为备受关注的研究热点,现就肥大细胞在不同病毒感染中的作用作一综述。
- 宫铭郑安佑雷迎峰
- 关键词：肥大细胞病毒病毒感染
- 聚乙二醇修饰前后天花粉蛋白性质的比较研究被引量：1
- 2008年
- 目的对天花粉蛋白（TCS）进行定点突变、聚乙二醇（PEG）修饰，并将修饰前后TCS的诸多性质加以比较。方法选择TCS分子上可能的抗原决定簇位点YFF81-83进行定点突变，并将所构建的突变体TCSYFF81-83 ACS在大肠杆菌中表达及纯化。随后通过该突变体第82位刚引入的半胱氨酸残基进行PEG定点修饰。通过比较研究，分析所构建PEG修饰型TCS的DNA酶活性、致核糖体失活活性、免疫原性、急性毒性以及药代动力学性质。结果所构建的突变型TCS其活性与野生型TCS（wTCS）活性几乎相当，而免疫原性已显著降低。PEG修饰型TCS虽有活性下降，但其免疫原性比wTCS低（P〈0．05），急性毒性比wTCS低，LD50值约为wTCS的1．8倍（P〈0．05），血液内平均滞留时间和半衰期明显长于wTCS（P〈0．05）。结论通过基因工程及化学修饰方法改造TCS是可行的，所构建的突变型及PEG修饰型TCS值得进一步研究。
- 安群星雷迎峰穆士杰张献清陈蕤夏爱军陈晨易静吴原茹余瑞徐志凯
- 关键词：聚乙烯二醇类药代动力学HIV
- 融电子教案与传统教案于一体的新型电子教案的制作设计被引量：2
- 2008年
- 利用Powerpoint2000的“备注”栏功能，将纸质文件教案的注释和内容等写入备注栏；利用计算机设置功能，把win—dows桌面扩展到另一台监视器上。结果是教员使用的电脑显示器可以同时显示幻灯和备注内容，而学员观看的投影大屏幕上只显示幻灯内容，隐去备注内容，由此设计出集传统纸质教案与传统电子教案于一体的新型电子教案，极大的方便了教员上课，提高了教学效果，省时省力，具有推广使用前景。
- 尹文吕欣雷迎峰柏银兰杨敬徐志凯
- 关键词：教案电子教案
- gas6基因修饰小鼠骨髓间充质干细胞的构建及鉴定
- 2016年
- 目的:制备携带生长停滞特异性基因6(gas6)的慢病毒,并构建和鉴定稳定表达生长停滞特异性蛋白6(GAS6)的小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)。方法:采用全骨髓贴壁法分离培养MSCs,用流式细胞术检测MSCs标志分子;根据Gen Bank中小鼠gas6基因序列设计并合成上下游引物,以MSCs提取的m RNA制备的c DNA为模板扩增gas6基因片段,克隆入慢病毒表达载体,获得Lenti-gas6-GFP-zeocin质粒并测序鉴定;采用三质粒包装系统(穿梭质粒p Lenti-gas6-GZ、包装质粒p SPAX2和p MD2.G)包装慢病毒,并验证其表达目的基因情况;将浓缩的慢病毒离心感染第4代MSCs,用吉欧霉素(zeocin)筛选培养后获得稳定表达GAS6的MSCs,采用流式细胞术检测其阳性率以及表面标志分子表达情况。结果:构建了携带gas6基因的慢病毒,建立了gas6基因修饰的MSCs。结论:慢病毒载体可介导gas6基因在小鼠MSCs中过表达,且不会干扰MSCs的生物特性,为进一步研究gas6基因修饰的MSCs的治疗作用奠定了实验基础。
- 边培育叶传涛韩佩君董阳超叶伟马宏炜陈何嵩张芳琳雷迎峰贾战生
- 关键词：慢病毒载体骨髓间充质干细胞
- 登革病毒复制分子机制的研究进展被引量：1
- 2011年
- 登革病毒（dengue virus,DV）是登革热（dengue fever,DF）、登革出血热/登革休克综合征（DHF/DSS）的病原体,按血清型分为四型（DV1～4）。DV以埃及伊蚊和白纹伊蚊为传播媒介,广泛流行于全球热带及亚热带的60多个国家和地区[1]。
- 雷迎峰徐志凯
- 关键词：登革病毒宿主蛋白
