雒燕婷
- 作品数:7 被引量:10H指数:2
- 供职机构:河南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金河南省教育厅科学技术研究重点项目河南省高校科技创新团队支持计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 淇河鲫IL-8cDNA克隆及组织表达分析
- IL-8是最早发现的趋化因子,属于CXC亚家族,与鱼类非特异性免疫水平关系密切.本文采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)方法,从淇河鲫(Carassius auratus in Qihe river)总RNA反转录产物...
- 王俊丽雒燕婷郝光孙君君段艳艳卢荣华李学军孔祥会聂国兴
- 关键词:IL-8克隆
- 鲫鱼TLR9基因克隆及其表达的生殖调控
- TLR9属于Toll样受体家族,是一种在天然免疫系统中发挥重要作用的模式识别受体,主要识别细菌和病毒DNA中的CpG基序.为揭示TLR9在鲫鱼(CarassiusauratusL.,Ca)免疫过程中的作用,本研究利用RT...
- 郝光王俊丽雒燕婷聂国兴刘臻
- 关键词:鲫鱼TOLL样受体天然免疫人绒毛膜促性腺激素生殖调控
- 鲫TLR9基因克隆及生殖因素对其在肠道表达的影响被引量:2
- 2014年
- 为揭示Toll样受体家族基因TLR9在鲫(Carassius auratus L.,缩写为Ca)免疫过程中的作用,本研究利用RT-PCR和RACE技术克隆获得了鲫TLR9(CaTLR9)基因cDNA,并就注射外源性人绒毛膜促性激素(hCG)和不同性腺周期对该基因在鲫肠道表达的影响进行了分析。结果表明,CaTLR9 cDNA全长3 509 bp,包含3 195 bp的开放阅读框(ORF)、72 bp的5′非编码区和242 bp的3′非编码区。ORF编码1 064个氨基酸组成的蛋白质。该蛋白包含19个氨基酸组成的信号肽,15个富含亮氨酸的重复结构域(LRR),1个跨膜区和1个TIR结构域。系统进化分析表明,CaTLR9与其他鲤科鱼类同源性较高,与鲤(Cyprinus carpio)相似度为92%,其次是草鱼(Ctenopharyngodon idella)和斑马鱼(Danio rerio),分别为83%和79%。实时荧光定量PCR结果表明,CaTLR9在鲫脾中表达量最高,其次为肾和鳃,其他组织的表达量均较低。鲫肠道TLR9在非繁殖期的表达水平明显低于繁殖期,注射适当剂量的外源hCG可显著上调鲫肠道TLR9的表达。本研究对揭示鲫非特异性免疫能力调节机制,提高鲫健康养殖水平具有一定参考价值。
- 王俊丽郝光雒燕婷刘臻孔祥会李学军聂国兴
- 关键词:克隆生殖基因表达肠道
- 淇河鲫IL-8原核表达系统的构建及多克隆抗体的制备与鉴定被引量:2
- 2017年
- 为揭示淇河鲫(Carassius auratus var.Qihe)白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)的功能,本研究构建了原核表达系统,并制备了兔抗鲫IL-8多克隆抗体。首先采用RT-PCR法扩增淇河鲫IL-8基因编码序列中不含信号肽的基因片段,克隆到pET-32a(+)载体后转化入Rosetta菌株构建原核表达系统。经IPTG诱导表达出相对分子质量约27.8 kD的目标融合蛋白。将纯化的融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,效价达1︰10~5。经免疫亲和层析纯化的抗体能特异性识别重组和天然的淇河鲫IL-8蛋白。比较不同组织的免疫组化和荧光定量PCR结果,IL-8蛋白量和mRNA的表达量在不同组织间变化趋势一致,在肌肉、脾和头肾均检测到较高的表达量,肠道的表达量较低。本研究为进一步探讨淇河鲫IL-8的生物学功能奠定了基础。
- 王俊丽陈金顶卢荣华雒燕婷聂国兴
- 关键词:白细胞介素-8原核表达系统多克隆抗体免疫组化
- 地黄和小肽对鲤鱼生长性能及IL-8表达的调节
- 本研究考察了地黄和深海鱼源活性小肽对鲤鱼生长和免疫功能的调节作用,探讨其作为鱼类饲料添加剂的可行性.试验一选取540尾平均体重为7.46±1.06g的鲤鱼,随机分为9组,分别饲喂:基础日粮(对照组,CK),2%...
- 王俊丽雒燕婷郝光闫潇吴春聂国兴
- 关键词:地黄小肽鲤鱼IL-8抗病力
- 地黄和小肽对鲤鱼生长性能及IL-8表达的调节被引量:2
- 2014年
- 研究了地黄和深海鱼源活性小肽对鲤鱼生长和免疫功能的调节作用,探讨其作为鱼类饲料添加剂的可行性。试验一选取540尾平均体质量为(7.46±1.06)g的鲤鱼,随机分为9组饲喂基础日粮及添加了2%生地黄粉,4%生地黄粉,2%熟地黄粉,4%熟地黄粉,0.5%生地黄水提物,1%生地黄水提物,0.5%熟地黄水提物,1%熟地黄水提物的饲料。试验二选取360尾平均体质量为(5.47±0.3)g的鲤鱼,随机分为4组饲喂基础日粮和添加5%、10%和15%小肽的饲料。饲养80d后,测定鲤鱼的生长指标和抗病性能,并检测鲤鱼脾脏IL-8的mRNA表达情况。结果显示,各种地黄制剂和不同剂量的小肽均可提高鲤鱼脾脏IL-8的表达,其中试验一的2%熟地黄粉、4%熟地黄粉、1%生地黄水提物、0.5%熟地黄水提物组和试验二的5%、10%小肽组与对照组均有显著性差异。地黄还可显著促进鲤的生长,提高其抗病力。因此,地黄和深海鱼源活性小肽均有望成为具有免疫调节作用的鱼类饲料添加剂。
- 王俊丽雒燕婷郝光闫潇吴春聂国兴
- 关键词:地黄小肽鲤鱼IL-8
- 淇河鲫IL-8cDNA克隆及组织表达分析被引量:4
- 2013年
- IL-8是最早发现的趋化因子,属于CXC亚家族,与鱼类非特异性免疫水平关系密切。实验采用同源克隆和cDNA末端快速扩增(RACE)方法,从淇河鲫总RNA反转录产物中获得了641 bp IL-8cDNA序列,其中包含102 bp的5'非编码区,242 bp的3'非编码区和297 bp的开放阅读框。该基因编码由98个氨基酸残基组成的前体蛋白,前22个氨基酸残基为信号肽。肽链中含有4个保守半胱氨酸,前2个半胱氨酸被1个精氨酸分隔,形成CXC结构。第一个半胱氨酸前缺乏ELR基序,其组成是DPR。由氨基酸同源性分析和进化分析可知,淇河鲫IL-8与鲤、鳙、草鱼、鲢等鲤科鱼类的进化关系较近,与鲤IL-8的同源性最高(94%)。通过实时荧光定量PCR检测,淇河鲫IL-8在被检测的8个组织中都有表达,其中在肌肉中的表达量最高,其次为脾脏、头肾和脑等。研究结果对调控淇河鲫非特异性免疫能力,提高淇河鲫健康养殖水平具有一定参考价值。
- 王俊丽雒燕婷郝光孙君君段艳艳卢荣华李学军孔祥会聂国兴
- 关键词:IL-8克隆