陈文勇
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：华南理工大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 棘孢曲霉β-葡萄糖苷酶Ⅰ在毕赤酵母的高效表达及FN3区域功能初步分析
- 棘孢曲霉β-葡萄糖苷酶I(Aspergillusaculeatusβ-glucosidase,ABGL)是GH3家族的重要成员之一，其水解性能优良，能水解多种糖苷底物，如pNPG、七叶苷和纤维二糖等。外源添加ABGL可辅...
- 陈文勇
- 关键词：毕赤酵母棘孢曲霉Β-葡萄糖苷酶分子对接
- 棘孢曲霉β-葡萄糖苷酶I的毕赤酵母多拷贝体系构建及其在高密度发酵中的表达被引量：1
- 2014年
- β-葡萄糖苷酶目前广泛应用于合成烷基糖苷、芳基糖苷和辅助纤维素酶水解纤维素。本研究将来自棘孢曲霉(Aspergilus aculeatus)的β-葡萄糖苷酶I(ABGL)在毕赤酵母中通过构建多拷贝表达盒的方法实现高效表达,利用同尾酶Bgl II/BamH I反复酶切和用DNA连接酶连接的方法,成功构建了含多拷贝表达盒5’AOX-ABGL-TT的pHKA-(ABGL)3的分泌重组质粒,并线性化重组质粒转化毕赤酵母GS115,经过七叶苷显色筛选平板筛选获得高表达的GS115/pHKA-(ABGL)3菌株,且在50升发酵罐实现高密度发酵表达。研究表明,以pNPG为水解底物,在甲醇诱导120 h时摇瓶发酵液上清酶活可达83.15 U/mL,较之前报道的酶活提高了3.35倍;同时在50 L发酵罐实现高密度发酵,在甲醇诱导120 h时发酵罐上清酶活可达979 U/mL,较对照菌株的发酵罐上清液酶活提高2.94倍,且总蛋白表达量可以达到12 g/L。
- 陈文勇胡霞艳康雅君郑穗平
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶毕赤酵母分泌表达高密度发酵
