陈彦
- 作品数：7 被引量：22H指数：3
- 供职机构：西南大学医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RNA干扰沉默STAT3基因表达对膀胱癌细胞生长影响的实验研究被引量：4
- 2008年
- 目的探讨应用RNA干扰技术沉默信号转导和转录激活因子3(STAT3)基因对膀胱癌T24及5637细胞的影响。方法针对STAT3 mRNA序列设计合成3对编码小干扰RNA(siRNA)的DNA模板,构建pGenesil-1-shRNA-STAT3重组质粒,转染人膀胱癌T24及5637细胞。通过半定量RT-PCR、Western印迹检测STAT3基因不同水平的表达情况,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)实验、流式细胞仪检测转染后细胞增殖及细胞周期的变化。结果成功构建pGenesil-1-shR-NA-STAT3重组质粒,并成功转染T24及5637膀胱癌细胞;半定量RT-PCR、Western印迹检测结果显示,重组质粒实验组细胞的STAT3基因表达在RNA及蛋白水平上显著低于对照组(P<0.05);MTT实验、流式细胞仪检测结果显示,重组质粒实验组细胞的增殖明显受到抑制并出现凋亡现象。结论pGenesil-1-shRNA-STAT3转染T24及5637膀胱癌细胞后,可有效抑制STAT3的表达,并抑制膀胱癌细胞的生长及增殖。
- 郭金英陈彦文阳安涂植光
- 关键词：膀胱肿瘤RNA干扰
- 巨噬细胞特异性启动子调控的真核表达载体的构建及靶向性研究被引量：1
- 2008年
- 目的:构建巨噬细胞特异性启动子调控的靶向巨噬细胞的真核表达载体。方法:PCR方法合成巨噬细胞特异性启动子,并将其插入带有绿色荧光蛋白(GFP)基因的真核表达载体pEGFP-N1中,替代CMV启动子。利用脂质体转染法,将其与红色荧光蛋白真核表达载体(pERFP-N1)共转染巨噬细胞和非巨噬细胞,通过荧光显微镜观察GFP和RFP在不同细胞中的表达水平来鉴定启动子的靶向性。结果:成功构建了巨噬细胞特异性启动子调控的真核表达载体,并且能在巨噬细胞中高效特异性地表达报告基因。结论:构建的靶向巨噬细胞的真核表达载体能提高目的基因的表达特异性,为提高基因治疗胞内菌感染的靶向性及降低毒副作用奠定了实验基础。
- 文阳安郭金英余晓林岑东刘靳波陈彦张健涂植光
- 关键词：巨噬细胞细胞特异性启动子真核表达载体
- 肿瘤患者外周血活化血小板测定及其临床意义被引量：8
- 2008年
- 目的:比较不同疾病状态下活化血小板测定值的差别及使用阿司匹林防治血栓的效果。方法:采用流式细胞仪测定126例肿瘤患者和60例非肿瘤患者外周血活化血小板CD62p和CD63的表达量,以及服用阿司匹林后的变化。结果:肿瘤患者外周血的活化血小板CD62p和CD63的表达量明显高于非肿瘤患者(P<0.05),有血栓形成的肿瘤患者外周血的活化血小板CD62p和CD63的表达量明显高于无血栓形成的肿瘤患者(P<0.05),有血栓的肿瘤患者的活化血小板经过阿司匹林干预治疗后明显下降(P<0.05)。结论:测定活化血小板可以预测肿瘤患者存在高凝状态风险性的大小。同时,服用小剂量肠溶阿司匹林可以降低外周血活化血小板CD62p和CD63的值。
- 郭金英陈彦文阳安姜习新刘靳波涂植光
- 关键词：血栓
- 人幽门螺杆菌热休克蛋白A编码基因的克隆及表达被引量：1
- 2007年
- 目的扩增人幽门螺杆菌(Hp)热休克蛋白A(HspA)编码基因并构建其重组表达载体,进行核苷酸序列分析,并在E.coli BL21中表达,为疫苗的开发奠定了基础。方法利用PCR技术从Hp基因组DNA中扩增热休克蛋白A(HspA)基因片段,目的基因经SacⅠ和XhoⅠ双酶切、纯化后,插入pET32a(+)载体。以含目的基因片段的重组载体转化大肠杆菌BL21并表达。结果经PCR、酶切、测序分析表明,插入的基因片段为Hp HspA编码基因,与GenBank报道的相比较,核酸同源性达98%。经SDS-PAGE分析,表达的融合蛋白分子量约为33 KD,其中目的蛋白的分子量约为13 KD。结论成功地克隆并表达了Hp HspA编码基因,为HspA蛋白质疫苗的研制和快速诊断试剂盒的开发奠定了良好的基础。
- 郭金英陈彦刘靳波姜习新陈曼涂植光
- 关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白A基因表达
- 抗菌肽PR39真核表达载体的构建及其在巨噬细胞中的表达和抗菌作用被引量：7
- 2008年
- 目的构建抗菌肽PR39的真核表达载体,转染后观察PR39在小鼠巨噬细胞RAW264.7中的表达及抗菌作用。方法采用拼接PCR法合成抗菌肽PR39基因,克隆到真核表达载体pIRES2-GFP中,经鉴定后用阳离子脂质体转染小鼠巨噬细胞RAW264.7,通过RT-PCR和免疫荧光法检测目的基因的表达,并对其抗菌活性进行初步检测。结果成功构建了抗菌肽PR39的真核表达载体pIRES2-GFP/PR39,并能在小鼠巨噬细胞RAW264.7中表达抗菌肽PR39。表达抗菌肽PR39的巨噬细胞杀灭和清除胞内菌的能力明显增强。结论抗菌肽PR39基因能够在小鼠巨噬细胞RAW264.7中表达并发挥抗菌作用。
- 文阳安郭金英余晓林岑东陈彦张键罗淼涂植光
- 关键词：抗菌肽真核表达载体巨噬细胞
- RNAi沉默STAT3基因表达对膀胱癌细胞T24及5637生长影响的实验研究
- 2008年
- 目的 探讨应用RNA干扰(RNAi)技术沉默信号转导子与转录活化子(STAT3)基因对膀胱癌细胞株T24及5637细胞的影响.方法 针对STAT3 mRNA序列设计合成3对编码小干扰RNA(siRNA)的DNA模板,构建pGenesil-1-shRNA-STAT3重组质粒,转染人类膀胱癌细胞株T24及5637细胞.通过半定量RT-PCR、Western blotting法检测STAT3基因不同水平的表达情况,采用流式细胞仪检测转染后细胞周期的变化.结果 成功构建pGenesil-1-shRNA-STAT3重组质粒,并成功转染T24及5637膀胱癌细胞;半定量RT-PCR、Western blotting结果显示,重组质粒转染组细胞的STAT3基因表达在RNA及蛋白水平上显著低于对照组(P<0.05);流式细胞仪的结果显示,重组质粒转染组细胞明显受到抑制并出现凋亡现象.结论 pGeneSil-1-shRNK-STAT3转染膀胱癌细胞株T24及5637细胞后,可有效抑制STAT3的表达,并抑制膀胱癌细胞的生长.
- 马文明郭金英陈彦文阳安涂植光
- 关键词：膀胱肿瘤RNA干扰STAT3转录因子
- miRNA-146a真核表达载体的构建及其对肿瘤细胞恶性增殖的影响被引量：1
- 2011年
- 目的构建miRNA-146a真核表达质粒,探讨其在宫颈癌HeLa细胞株中的表达及对HeLa细胞恶性表型的影响。方法人工合成miRNA-146a基因序列,将miRNA-146a基因克隆到的真核表达载体pGeneSil-1中,构建成重组质粒pGeneSil-miR-146a。将miRNA-146a重组表达载体瞬时转染宫颈癌HeLa细胞株,通过荧光定量聚合酶链反应法(PCR)检测miRNA-146a在转录水平的表达。通过MTT法检测miRNA-146a对细胞增殖的影响,通过流式细胞术检测细胞周期的变化。结果经酶切和测序鉴定,证明重组质粒pGeneSil-miR-146a构建成功。重组质粒转染HeLa细胞后,荧光定量PCR证明能有效表达miRNA-146a。MTT检测结果显示转染miRNA-146a后的HeLa细胞活细胞数目明显增多。流式细胞术细胞周期检测结果表明转染miRNA-146a后的HeLa细胞S期细胞数明显增多。结论成功构建了miRNA-146a基因真核表达载体pGeneSil-miR-146a,转染宫颈癌HeLa细胞株后能有效表达miRNA-146a,miRNA-146a基因表达可以促进HeLa细胞的增殖。
- 罗婷婷陈彦文阳安
- 关键词：宫颈肿瘤细胞增殖MIR-146A
