陈宵
- 作品数：34 被引量：47H指数：4
- 供职机构：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生行业科研专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术环境科学与工程更多>>
- 代谢组学在天然产物毒性评价和毒理学研究中的应用进展被引量：10
- 2019年
- 为了尽可能避免毒性效应并安全使用天然产物,更全面的毒性认知已成为迫切需要。通常认为小分子代谢产物可以代表生物体的生理或病理状态,因此,基于代谢组学的毒理学研究既可以用于评价毒性,也可以鉴定天然产物的毒理学生物标志物,有助于指导临床用药并减少药物不良反应。近几十年来,代谢组学在中药单体成分、提取物和复方制剂诱导的肾毒性、肝毒性、心脏毒性和中枢神经系统的毒性评价中应用广泛。综述常用的代谢组学技术,包括样品制备、样品检测、数据处理和分析方法,以及基于代谢组学的天然产物毒理学研究等方面的进展,并对该研究的潜在问题进行探讨并对今后的发展方向进行展望。
- 陈宵孙承业
- 关键词：代谢组学毒性生物标志物急性中毒
- CYP2E1依赖的丙烯酰胺神经突触前损伤研究
- 2021年
- 目的揭示丙烯酰胺(Acrylamide,ACR)原型及其主要代谢产物环氧丙酰胺(Glycidmide,GA)对神经突触前的损伤效应。方法构建pWSLV-07-Cyp2e1过表达质粒及未插入CYP2E1基因片段的pWSLV-07空载质粒,构建CYP2E1过表达HepG2 E47细胞株与低表达HepG2 C34细胞株,与人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y分别建立HepG2 E47/SH-SY5Y和HepG2 C34/SH-SY5Y体外共培养系统,以梯度浓度ACR(0、50、100、150、200、250和500μg/ml)分别染毒HepG2 E47/SH-SY5Y和HepG2 C34/SH-SY5Y共培养细胞24、48和72 h,CCK-8法检测各组SH-SY5Y细胞存活率以确定最终染毒浓度和时间。HPLC法检测SH-SY5Y细胞内ACR和GA含量,电子显微镜观察突触前微结构变化和线粒体损伤,Western blot检测SH-SY5Y中损伤关键蛋白SynapsinⅠ、GAP-43和SNAREs复合体蛋白(SNAP-25、Syntaxin 1A及VAMP-2)的表达。结果根据CCK-8结果确认ACR染毒浓度梯度为0、50、100和150μg/ml,染毒时间为24 h。随染毒浓度升高,与对照比较,两组SH-SY5Y细胞中ACR和GA的含量升高(P<0.05)、突触微结构异常,线粒体出现损伤性变化、Ca^(2+)-ATPase和Na^(+)-K^(+)-ATPase活性下降(P<0.05)、SynapsinⅠ和GAP-43蛋白表达下调(P<0.05),上述指标在HepG2 E47/SH-SY5Y组变化明显高于HepG2 C34/SH-SY5Y组;而SNAREs复合体各蛋白表达上调(P<0.05),且HepG2 E47/SH-SY5Y组上调程度明显高于HepG2 C34/SH-SY5Y组,差异均有统计学意义。结论在本共培养体系内,一定剂量时间的ACR作用后,ACR代谢产物GA在ACR所致突触前损伤中发挥重要作用,为ACR神经毒作用的全面解析提供一定的线索和依据。
- 付豪王海华陈宵刘黎张意吕佳琦李雨露杨海涛肖经纬李斌
- 关键词：丙烯酰胺细胞共培养
- 铅、镉、汞、砷联合暴露SH-SY5Y细胞损伤和可能机制初探
- 2024年
- 目的探讨铅(lead,Pb)、镉(cadmium,Cd)、汞(mercury,Hg)和砷(arsenic,As)联合暴露对SH-SY5Y细胞损伤和可能作用机制。方法构建SH-SY5Y和HMC3 Transwell共培养细胞模型,另以SH-SY5Y细胞单细胞培养作为组织阴性对照,以1、10、20和40倍的Pb、Cd、Hg和As模拟混合物暴露浓度(metal mixture,MM)处理细胞,其中40 MM分别为Pb 2.00μmol/L、Cd 0.01μmol/L、Hg 0.07μmol/L和As 0.06μmol/L,以含10%胎牛血清和1%青链霉素的DMEM/F12培养基为重金属联合暴露的阴性对照;CCK8检测细胞存活率,Real-time PCR检测APP和MT1G转录水平;以ELISA检测培养基上清液中TNF-α、IL-6和IFN-γ的含量。为评估重金属联合暴露后共培养细胞的氧化应激水平,采用流式细胞术检测SH-SY5Y/HMC3暴露于0、1、10、20和40 MM金属混合物后的ROS水平,以DMEM/F12完全培养基单细胞培养SH-SY5Y作为组织阴性对照。结果Pb、Cd、Hg和As联合暴露后,共培养模型和单培养模型中的SH-SY5Y细胞生长受到抑制(P<0.05)、MT1G mRNA表达增加、APP mRNA无明显变化,上清液中TNF-α含量剂量依赖性增加趋势,IL-6和IFN-γ呈下降趋势;与单一SH-SY5Y细胞损伤指标的测定结果相比较,共培养模型中SH-SY5Y细胞生长抑制程度较轻,APP mRNA相对较低,MT1G mRNA较高,TNF-α含量增加幅度较小,IL-6和IFN-γ下降趋势更明显。随暴露浓度的升高,ROS相对含量呈剂量依赖性增加[F(4,10)=320.4,P<0.05]。ROS相对含量与MT1G呈正相关(r=0.98,P=0.0015)。结论重金属联合暴露的神经炎症反应与ROS生成相关联,共培养的HMC3细胞可减轻共培养模型中SH-SY5Y细胞损伤的程度,MT1G可能在SH-SY5Y细胞损伤过程中提供保护作用。
- 乔梦芸段爱茹鱼涛郑敏陈宵张意吴思雨吕书俊于常艳王海华刘黎肖经纬牛勇李斌
- 关键词：炎性反应
- 脑源性神经营养因子对丙烯酰胺致NB-1细胞损伤的保护作用被引量：4
- 2014年
- 目的在体外实验条件下探讨脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)对丙烯酰胺(acrylamide,ACR)所致神经损伤的干预效应。方法 MTT法检测不同剂量ACR(0、10、20、40、60、80和100μg/ml)作用时NB-1细胞的相对存活率并计算半数抑制浓度(IC50);根据ACR细胞毒性测试结果设对照组、ACR染毒组(60μg/ml ACR)、BDNF干预组:BDNF1(50 ng/ml BDNF+60μg/ml ACR)、BDNF2(75 ng/ml BDNF+60μg/ml ACR)、BDNF3(100 ng/ml BDNF+60μg/ml ACR);光学显微镜观察神经细胞形态变化,MTT法检测细胞相对存活率,流式细胞术检测胞内游离钙离子浓度;Western-blot检测突触素I(synapsin I)蛋白表达。结果 ACR对NB-1细胞的IC50为69.8μg/ml(48 h)。50和75 ng/ml BDNF对ACR所致神经损伤具有一定的干预作用,与60μg/ml ACR单独染毒组比较,神经细胞形态异常减轻,细胞相对存活率增加,胞内钙离子浓度降低,synapsin I蛋白含量增加(P<0.05);BDNF剂量增加到一定水平(100 ng/ml),干预效果减弱,细胞相对存活率、胞内钙离子浓度及synapsin I蛋白表达与60μg/ml ACR单独染毒组差异无统计学意义(P>0.05)。结论适当剂量的BDNF在体外条件下对ACR所致神经损伤具有一定的保护作用,可能是通过对抗胞内钙超载,上调synapsin I蛋白表达,维持突触结构完整来实现的。
- 肖经纬孙彦彦王秀会陈宵张斌李斌
- 关键词：丙烯酰胺脑源性神经营养因子突触素I
- 人源化肝细胞共培养系统为基础的代谢活化系统研究被引量：1
- 2020年
- 目的从不同组合的人源化肝细胞系共培养模型中构建并筛选优势共培养体系,为人源化代谢活化系统在遗传毒性和致突变性中的应用提供理论基础。方法以HepG2/C3A人源肝癌细胞作为代谢活化系统的支持细胞,应用穿孔法对HepG2/C3A、LX-2肝星形细胞和Caco-2人源肠腺癌细胞三细胞进行不同组合的共培养模型的构建和筛选,CCK-8法测定模型中每个细胞的4 d生长曲线以确定能稳定生长的共培养模型,RT-qPCR测定在不同类型培养模型中HepG2/C3A细胞CYP3A4、CYP2E1、CYP1A2、CYP2B6、CYP2C9、GSTA1/2和UGT1A1基因的表达情况。结果由HepG2/C3A-Caco2-LX2细胞构建的三细胞共培养(COL)模型中各细胞生长状态稳定。RT-qPCR结果显示在不同的共培养模型中,肝细胞的Ⅰ相及Ⅱ相代谢酶基因的表达差异较大,COL模型中HepG2/C3A细胞CYP1A2、CYP2C9、CYP3A4、UGT1A1和GSTA1/2基因表达水平分别是单培养组的3.41、4.20、2.88、4.75和5.11倍,差异有统计学意义(P<0.05)。双细胞共培养模型中HepG2/C3A-Caco2(CO-C)和HepG2/C3A-LX2(CL)的肝细胞仅CYP2E1或GSTA1/2相对单培养组表达略有升高,差异有统计学意义(P<0.05),CYP3A4、CYP1A2、CYP2B6和UGT1A1基因的表达水平均有所降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同细胞共培养模型对肝细胞的Ⅰ相及Ⅱ相代谢酶基因的表达产生较大影响,相比本研究中的双细胞共培养体系,HepG2/C3A-Caco2-LX2三细胞共培养体系可更稳定的生长,且主要的Ⅰ相及Ⅱ相代谢酶基因表达水平明显升高,有望作为代谢活化系统的优势共培养体系。
- 蔡文建张意陈宵付豪吕佳琦李忠生肖经纬李斌
- 关键词：代谢活化
- 突触素Ⅰ及其磷酸化级联网络在丙烯酰胺所致突触可塑性损伤中的作用研究
- [目的]通过检测丙烯酰胺(acrylamide,ACR)对突触素Ⅰ(SynapsinⅠ)上游磷酸化激酶的影响,进一步探讨SynapsinⅠ磷酸化的级联网络的启动过程,完善神经突触功能损伤中SynapsinⅠ磷酸化与非磷酸...
- 陈宵王秀会杨义光张意李忠生肖经纬李斌
- 脑源性神经营养因子通过TrkB-MAPK-Erk1/2途径保护丙烯酰胺诱导的神经元和突触损伤
- ＜正＞目的 :建立丙烯酰胺（ACR）神经元染毒及脑源性神经营养因子（BDNF）干预的体外模型,探讨BDNF在暴露于神经毒素ACR后对NB-1细胞的保护作用。方法:将与施万细胞（SCs）共培养的NB-1细胞以及单独培养的N...
- 陈宵蔡文健张意李忠生肖经纬李斌
- 关键词：脑源性神经营养因子
- 文献传递
- 脑源性神经营养因子对丙烯酰胺短期重复剂量神经损伤的体内干预研究被引量：1
- 2014年
- 目的在体内实验条件下探讨脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)对丙烯酰胺(acrylamide,ACR)所致神经损伤的干预效应。方法 30只雌性Wistar大鼠随机分为生理盐水对照组、BDNF对照组(48μg/kg BDNF)、30 mg/kg ACR染毒组(腹腔注射,1次/d,6 d/周,3周)和低、高剂量BDNF干预组(12和48μg/kg BDNF,尾静脉注射,1次/2 d,自第2周始);染毒步态评分、后肢撑力试验评价神经行为改变;检测脑分区、脊髓、坐骨神经及神经外重要的组织脏器的病理改变;ELISA法检测血浆BDNF的含量。结果 BDNF高剂量(48μg/kg)干预组对ACR所致大鼠神经损伤具有一定的保护作用,BDNF高剂量干预组与ACR单独染毒组比较,对于实验动物的神经系统具有一定的保护作用,如试验结束时体重高于ACR染毒组,异常体征弱于ACR染毒组,步态评分显著低于ACR染毒组,后肢撑力距离较ACR染毒组缩短,血浆BDNF含量高于ACR染毒组(P<0.05)小脑皮质空泡略少于ACR染毒组。所检测的神经外重要组织脏器未见明显的病理组织学异常。结论适当剂量外源性BDNF干预在实验动物水平对ACR所致短期重复剂量神经毒效应发挥一定的保护作用。
- 肖经纬陈宵张斌王秀会李斌
- 关键词：丙烯酰胺脑源性神经营养因子神经毒性
- 铅暴露致BDNF/TrkB通路对SH-SY5Y细胞NMDAR1的作用机制研究
- 目的探讨在铅暴露情况下,BDNF/TrkB通路通过调控PI3K/AKT以及PLC/PKC途径对SHSY5Y细胞NMDAR1的作用机制研究。方法 1、设置不同浓度梯度的铅溶液分别处理细胞,CCK-8法检测细胞的增殖活性并确...
- 李雨露杨海涛王海华鱼涛陈宵刘黎张意段爱茹乔梦芸吴思雨吕书俊肖经纬李斌
- 关键词：铅染毒SH-SY5Y细胞
- 丙烯酰胺对大鼠谷氨酸和γ-氨基丁酸神经递质含量的影响被引量：9
- 2016年
- 目的探讨丙烯酰胺(ACR)染毒致大鼠大脑皮层和小脑谷氨酸(Glutamate,Glu)和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的含量变化。方法 60只雄性SD大鼠分为6组,即11 d试验组(生理盐水对照组、30 mg/kg ACR染毒组和50 mg/kg ACR染毒组)和21 d试验组(生理盐水对照组、15 mg/kg ACR染毒组和30 mg/kg ACR染毒组);步态评分评价神经行为改变;LC-MS/MS法测定染毒终点大脑皮层和小脑Glu和GABA含量变化。结果 11 d试验组在染毒终点时,50 mg/kg ACR染毒组与生理盐水对照组、30 mg/kg ACR染毒组相比,体重显著降低(P<0.05),步态评分显著增高(P<0.05);21d试验组在染毒终点时,30 mg/kg ACR染毒组与生理盐水对照组、15 mg/kg ACR染毒组相比,体重显著降低(P<0.05),步态评分显著增高(P<0.05);30 mg/kg 21 d和50 mg/kg 11 d染毒组与对照组相比,大脑皮层和小脑内兴奋性神经递质Glu含量显著降低(P<0.05),且降低幅度一致。结论 ACR引起大鼠大脑皮层和小脑内兴奋性神经递质Glu含量的降低,可能是导致其神经毒性的致病机制之一。
- 张斌肖经纬陈宵李忠生曹鹏朱丹李斌
- 关键词：丙烯酰胺神经递质谷氨酸Γ-氨基丁酸
