郭洁 作品数:9 被引量:6 H指数:2 供职机构: 中国科学院微生物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
一种在体内增强Treg细胞功能的方法 本发明属于免疫技术领域,具体涉及一种在体内增强Treg细胞功能的产品及方法。本发明首先提供了一种用于在体内增强Treg细胞功能的产品,所述产品能够用于干预Treg细胞表达FOXP3Δ2蛋白,并抑制表达FOXP3蛋白。研究... 周旭宇 谷千冲 郭洁2型猪链球菌gene0969基因敲除突变体的构建及毒力分析 被引量:1 2010年 目的:构建2型猪链球菌强毒株05ZYH33毒力岛89K上的Ⅳ型分泌系统组分gene0969敲除突变体,初步分析其活性,为进一步研究猪链球菌假想毒力因子在致病中的作用提供实验基础。方法:以05ZYH33基因组为模板,PCR扩增gene0969基因的上下游片段;以穿梭质粒pSET1为模板,PCR扩增氯霉素抗性基因Cm;采用重叠PCR方法搭建3个片段,并克隆到自杀载体pSET4s上,构建基因敲除载体,通过同源重组构建gene0969突变体,再用小鼠感染模型对突变株和野生株的毒力进行比较。结果:获得了gene0969基因敲除突变体,并发现其毒力与野生型相比有下降趋势。结论:2型猪链球菌假想毒力因子gene0969可能与毒力有关,其作用和机制值得进一步分析。 郭洁 骈亚亚 郑玉玲 袁媛 姜永强 陈福生关键词:2型猪链球菌 基因敲除 猪链球菌2型Ⅳ型分泌系统组分VirD4与毒力相关性分析 被引量:4 2015年 【目的】构建猪链球菌2型强毒株05ZYH33毒力岛89 K上的Ⅳ型分泌系统组分Vir D4敲除突变株,初步分析其活性和毒力,为进一步研究猪链球菌2型在逃避宿主天然免疫杀伤中的作用提供基础。【方法】以05ZYH33基因组为模板,PCR扩增Vir D4基因上下游同源臂,以穿梭质粒p SET1为模板,PCR扩增氯霉素抗性基因Cm,通过重叠PCR技术搭建上述3个片段并连接至温敏载体p SET4s,构建基因敲除载体p SET4s∷Vir D4;通过同源重组构建基因敲除突变株ΔVir D4;通过体外全血杀伤实验、CD1小鼠竞争感染及攻毒实验对突变株和野生株的毒力进行比较分析。【结果】获得了基因敲除突变株ΔVir D4,通过对比发现其毒力与野生株相比有所降低。【结论】猪链球菌2型Ⅳ型分泌系统组分Vir D4与其毒力相关,并在早期抵抗天然免疫细胞杀伤中发挥一定作用。 王俊平 郑玉玲 骈亚亚 郭洁 郝淮杰 姜永强关键词:猪链球菌2型 毒力 埃博拉病毒感染细胞模型的制备与应用 本发明公开了埃博拉病毒感染细胞模型的制备与应用。本发明公开的埃博拉病毒感染细胞模型的制备方法,包括:1)利用Ebola trVLP系统获得埃博拉转录复制相关病毒样颗粒;2)利用埃博拉转录复制相关病毒样颗粒感染重组细胞,获... 周旭宇 高福 赵欣 张会玲 璩骁 郭洁 张建华小鼠T-bet逆转录病毒载体的构建与功能验证 2014年 为在小鼠细胞中表达并研究T-bet功能,首先构建了含有报告基因Thy1.1的小鼠T-bet逆转录病毒载体,并将构建的载体质粒转染病毒包装细胞系包装成重组病毒,再利用重组病毒分别感染NIH-3T3和D9细胞系检测其感染能力。之后,使用该重组病毒感染T-bet敲除小鼠的CD4+T淋巴细胞,流式细胞术检测T-bet及其下游靶基因Ifng的表达情况。经验证,重组的逆转录病毒感染T-bet敲除小鼠T淋巴细胞后可以在细胞中表达T-bet,并进一步引起下游靶基因Ifng的表达上调,证明本研究中外源表达的转录因子T-bet具有正常功能。综上所述,本实验成功构建了含有报告基因的小鼠T-bet重组逆转录病毒载体,为进一步在小鼠细胞中研究T-bet功能奠定了基础。 张雪洁 张建华 张伟 郭洁 周旭宇关键词:T-BET 逆转录病毒 Γ干扰素 猪链球菌2型ABC转运蛋白gene0910敲除突变体的构建及活性分析 被引量:2 2010年 目的:构建猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2)强毒株05ZYH3389K毒力岛上的ABC转运蛋白gene0910敲除突变体,并初步分析其活性,为进一步研究猪链球菌假想毒力因子在致病中的作用提供实验基础。方法:以猪链球菌2型05ZYH33基因组为模板,扩增gene0910两侧各约500bp左右的片段为上下游同源臂,以pSET1质粒为模板,扩增氯霉素抗性基因Cm为中间片段,采用重叠PCR方法搭建三个片段,并克隆到自杀载体pSET4S上,构建基因敲除的载体。电转化05ZYH33感受态细胞,经30℃双交换和40℃质粒丢失,最后点板法筛选出基因敲除突变体△0910。对突变株和野生株的生物学活性及小鼠的致病性进行了初步比较。结果:PCR分析和测序结果均显示gene0910完全被氯霉素抗性基因Cm所替代,基因敲除突变体构建成功。结论:突变株的生物学活性和对小鼠的致病性与野生株相比差异不显著。 骈亚亚 郭洁 郑玉玲 袁媛 姜永强关键词:猪链球菌2型 ABC转运蛋白 基因敲除 一种调控辅助性T细胞功能的方法 本发明属于免疫技术领域,研究了一种调控辅助性T细胞CTLA‑4表达水平的新方法,通过在CD4+辅助性T细胞中过表达Th1,Th17型转录因子,研究这些转录因子对CD4+辅助性T细胞的CTLA‑4水平的调控的能力,而后进一... 周旭宇 张雪洁 张建华 郭洁一种调控辅助性T细胞功能的方法 本发明属于免疫技术领域,研究了一种调控辅助性T细胞CTLA‑4表达水平的新方法,通过在CD4+辅助性T细胞中过表达Th1,Th17型转录因子,研究这些转录因子对CD4+辅助性T细胞的CTLA‑4水平的调控的能力,而后进一... 周旭宇 张雪洁 张建华 郭洁文献传递 埃博拉病毒感染细胞模型的制备与应用 本发明公开了埃博拉病毒感染细胞模型的制备与应用。本发明公开的埃博拉病毒感染细胞模型的制备方法,包括:1)利用Ebola trVLP系统获得埃博拉转录复制相关病毒样颗粒;2)利用埃博拉转录复制相关病毒样颗粒感染重组细胞,获... 周旭宇 高福 赵欣 张会玲 璩骁 郭洁 张建华文献传递