郭全义 作品数:226 被引量:483 H指数:11 供职机构: 中国人民解放军总医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 北京市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 化学工程 生物学 自动化与计算机技术 更多>>
壳聚糖和软骨细胞外基质复合组织工程骺软骨支架的性能观察 被引量:3 2009年 背景:在组织工程骺软骨构建过程中,采用何种载体承载已经扩增了的软骨细胞越来越受到人们的关注。目的:探讨软骨细胞外基质与壳聚糖复合构建组织工程骺软骨支架的可行性并对其性能进行初步观察。设计、时间及地点:体外观察实验,于2007-12/2009-03在解放军总医院骨科研究所完成。材料:壳聚糖(脱乙酰度90%,Mr10×105)由青岛海汇生物工程公司提供。市售猪关节软骨。方法:将新鲜的猪关节软骨在液体中粉碎,梯度离心后制备成3%软骨微丝悬液,将其按1︰1的比例与2%的壳聚糖溶液混合,采用冷冻冻干法制备脱细胞软骨基质三维多孔支架。主要观察指标:对梯度乙醇处理再次干燥后支架材料进行组织学及扫描电镜观察,测定支架孔径和孔隙率、吸水率,并采用MTT法分析支架浸提液毒性。分离培养兔骨髓间充质干细胞,用转化生长因子β1成软骨诱导后种植至支架,倒置显微镜、电镜观察细胞在支架上的生长、分化情况。结果:支架内孔洞相互连通,孔大小(161±31)μm,孔隙率为(90.1±1.6)%,吸水率为(2361±132)%。组织学观察显示,三维多孔支架甲苯胺蓝染色、番红O染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均呈阳性。MTT法结果显示支架无细胞毒性。细胞在支架表面黏附良好,分布均匀,并有基质分泌。结论:制备的软骨细胞外基质和壳聚糖复合三维多孔支架结合良好,含有软骨细胞外基质主要成分,无毒,具备合适的孔径和孔隙率,生物相容性良好。 卢强 彭江 黄靖香 张莉 郭全义 卢世璧关键词:软骨 软骨渗透性测量装置 本实用新型提供一种软骨渗透性测量装置,由可透X射线材料制成,包括装置主体、多孔压头、上加压件及下加压件;该装置主体的标本室用以盛放软骨标本,其上腔室和标本室由一圆形开孔连通;该多孔压头为与开孔直径一致的圆柱体,侧壁上开有... 孟昊业 彭江 汪爱媛 郭全义 王玉 刘舒云 许文静 卢世璧文献传递 兔膝骨关节炎进程中软骨下骨血管生成的实验研究 被引量:13 2013年 目的探讨兔膝骨关节炎发展进程中软骨下骨血管生成的时间依从性的变化,研究软骨下骨血管新生在OA发病机制中的作用。方法 30只新西兰大白兔随机分为前交叉韧带切除组(ACLT组)、对照组,每组15只。ACLT组右膝前交叉韧带切除造模,对照组不作任何处理。分别于术后4周、8周、12周取材。取兔膝关节标本进行大体观察,切片行组织学番红O染色及OARSI病理评分,评价软骨退变。行免疫组化VEGF染色,观察软骨下骨中血管生成情况,同时用Image Pro Plus6.0图像分析软件进行骨软骨交界血管数量密度的计数检测。结果 ACLT组术后4周即可见软骨退变,8周和12周时退变进一步加重,番红O染色基质丢失、软骨变薄及裂隙生成、软骨下骨裸露。对照组无明显软骨退变,不同组关节软骨OARSI评分有统计学差异(F=440.828,P<0.01)。切片免疫组化血管内皮生长因子(VEGF)染色示ACLT组阳性表达,ACLT组的血管入侵软骨数目明显高于对照组,且OA各时间点之间有统计学差异(F=72.733,P<0.01)。结论软骨下骨的血管生成是OA的早期病变,OA中骨-软骨复合单元的血管增生与软骨退变相关。血管侵入软骨的数量密度与OA发展呈时间依从性增加变化。 袁雪凌 汪爱媛 孟昊业 王永成 李丙岩 王程 彭江 郭全义 陈继营 卢世璧关键词:骨关节炎 软骨 新生血管化 病理性 人脐带Wharton胶细胞外基质对软骨种子细胞的作用 被引量:1 2013年 目的观察人脐带Wharton胶细胞外基质(hWJECM)对兔软骨细胞增殖的影响。方法用差速离心法制作hWJECM,制成0.5%浓度浆料分别铺于六孔细胞培养板和96孔细胞培养板上,形成1 mm厚的薄膜,包被有此膜的培养板作为试验组,未铺膜单纯培养液组作为空白对照组,在培养板上培养兔关节软骨细胞。通过倒置显微镜观察,甲苯胺蓝染色观察两个组的兔软骨细胞5,10,15天的生长形态和增殖情况,用CCK8细胞增殖实验比较两组的1、3、5、7 d的增殖情况,来评估软骨种子细胞的增殖和表型维持情况。结果倒置显微镜观察5、10、15 d的细胞增殖情况好于单纯培养液组,5、15 d的甲苯胺蓝染色的结果也证明这个观点,CCK8细胞增殖试验1,3天时试验组和对照组的增殖没有明显的统计学差异(P=0.7142;P=0.0657),第5,7天显示hWJECM组在细胞增殖方面明显地优于单纯培养液的对照组(P=0.0001;P=0.0006)。结论 hWJECM免疫原性低,无细胞毒性作用,能够很好地促进软骨细胞的增殖。 高钺 刘舒云 黄靖香 郭维民 陈继凤 张莉 赵斌 彭江 汪爱媛 王玉 许文静 卢世璧 郭全义关键词:细胞外基质 脐带 软骨细胞 细胞增殖 干细胞在软骨再生中的应用 被引量:4 2016年 软骨损伤是最常见的膝关节疾病之一。由于软骨无血管、神经、淋巴组织,营养成分主要来自膝关节的滑液,这些组织学的特点使得软骨损伤的自我修复能力极为有限。创伤性的软骨损伤和早期的骨性关节炎(OA)会引起患者关节的疼痛和肿胀,若损伤不予处理则会加速关节的退变,引起更严重的功能障碍。 王明杰 刘舒云 郭维民 张雨 彭江 卢世璧 郭全义关键词:软骨损伤 软骨再生 膝关节疾病 软骨分化 成软骨 微骨折 等离子体处理胶原锚定PLGA/脱细胞骨基质骨软骨双层支架材料的制备和评估 被引量:7 2007年 目的:分别以胶原锚定方法修饰的聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)为组织工程软骨支架材料,以脱细胞骨基质为组织工程骨支架材料,将二者结合制备出结合良好的组织工程骨软骨双层支架,并观察结构特征,以评估其作为组织工程化骨软骨复合体支架材料的可行性。方法:实验于2006-02/2007-02在解放军总医院骨科研究所完成。①支架的制备:以犬新鲜松质骨为原料,制备脱细胞骨基质作为骨支架材料;将脱细胞骨基质浸于盛有PLGA溶液的模具中,采用固-液相分离法结合致孔剂溶出法制备出多孔的PLGA/脱细胞骨基质双层支架,然后对PLGA支架部分进行等离子体处理和Ⅰ型胶原锚定修饰。得到的新型组织工程骨软骨双层支架的上层为多孔PLGA,下层为脱细胞骨基质。②支架的特征观察:对支架行扫描电镜检测,并采用乙醇置换法测定PLGA层孔隙率,采用北京亚林公司提供的扫描电镜图像分析系统测定PLGA层支架的平均孔径。结果:扫描电镜显示双层支架的PLGA部分具有良好的孔隙贯通结构,孔径为(211±33)μm,孔隙率为(95.0±1.5)%;脱细胞骨基质骨支架部分具有天然骨的孔径和空隙率;PLGA材料渗入骨支架部分,双层支架结合良好。结论:等离子体处理后胶原锚定修饰的PLGA/脱细胞骨基质双层支架具有良好的结构和孔隙率,结合良好,可作为支架载体应用于组织工程骨软骨复合体的构建。 杨强 彭江 郭全义 黄靖香 杨飞 王身国 卢世璧关键词:PLGA 脱细胞骨基质 3D生物打印负载转化生长因子β3的软骨复合支架 被引量:4 2021年 背景:通过募集内源性干细胞原位再生软骨损伤的治疗策略,是未来软骨组织工程研究的新方向。目的:构建既能募集干细胞又能促进其黏附和增殖,且有利于新生组织成熟的组织工程软骨复合支架。方法:将脱细胞软骨细胞外基质(extracellular matrix,ECM)与甲基丙烯酸酯化明胶(methacrylated gelatin,GelMA)混合配制光敏性生物墨水,利用3D生物打印技术分别制备单纯聚己内酯[poly(Ɛ-caprolactone),PCL]支架、PCL/GelMA/ECM支架。将转化生长因子β3(transforming growth factorβ3,TGF-β3)负载于生物墨水中制备PCL/GelMA/ECM/TGF-β3支架,检测其缓释性能。从形态学、组织学、生物化学、生物力学等角度评价PCL/GelMA/ECM支架的物理化学性质。利用CCK-8法检测PCL/GelMA/ECM支架的细胞毒性。将脂肪间充质干细胞接种于PCL/GelMA/ECM支架上,1,4,7 d后,共聚焦显微镜下观察细胞活性,扫描电镜观察细胞黏附。将PCL/GelMA/ECM支架植入SD大鼠皮下,组织学观察炎性细胞浸润与支架降解。利用Transwell小室实验检测PCL/GelMA/ECM支架、PCL/GelMA/ECM/TGF-β3支架对脂肪间充质干细胞迁移的影响,以单独培养的细胞为阴性对照。结果与结论:①PCL/GelMA/ECM支架呈现三维立体多孔网状结构,无细胞成分,含有Ⅱ型胶原和糖胺聚糖等软骨特异性成分,支架弹性模量为(14.24±2.44)MPa;②PCL/GelMA/ECM支架无明显的细胞毒性;③脂肪间充质干细胞紧密贴附于PCL/GelMA/ECM支架上,细胞活性良好,可分泌细胞外基质;④PCL/GelMA/ECM支架植入大鼠皮下1周后有轻度急性炎症反应,3周后炎性反应减轻,并可见逐步支架降解;⑤PCL/GelMA/ECM/TGF-β3支架具有良好的缓释性能,可持续释放TGF-β3达60 d;⑥相对于阴性对照组,PCL/GelMA/ECM支架、PCL/GelMA/ECM/TGF-β3支架均可促进脂肪间充质干细胞的迁移,其中以PCL/GelMA/ECM/TGF-β3支架促迁移作用更显著;⑦结果表明,3D打印PCL/GelMA/ECM/TGF-β3支架可促 杨振 李浩 李浩 高仓健 姜双鹏 王福鑫 苑志国 孙志强 查康康 田广招 曹福洋 眭翔 眭翔 刘舒云关键词:转化生长因子Β3 软骨损伤 脂肪间充质干细胞 招募 迁移 纯化的多亚型热休克蛋白/肽复合物多联肿瘤疫苗及其制备方法 本发明涉及纯化的多亚型热休克蛋白/肽复合物多联肿瘤疫苗及其制备方法。具体地,本发明提供了一种制备纯化的多亚型热休克蛋白/肽复合物多联肿瘤疫苗的方法,以及通过所述方法获得的纯化的多亚型热休克蛋白/肽复合物多联肿瘤疫苗。所述... 郭全义 李浩江 袁玫 卢世璧 眭翔 刘舒云 崔雪梅文献传递 新型脱细胞骨基质-壳聚糖骨组织工程支架的制备及性能评价 被引量:8 2011年 目的探寻新型脱细胞骨基质(Acellular Bone Extracellular Matrix,ABECM)材料及脱细胞骨基质-壳聚糖(Chitosan,CS)复合多孔支架的制备方法,并对其性能进行评价。方法采用Triton X-100、十二烷基硫酸钠(Sodium Dodecyl Sulfate,SDS)的脱细胞方法对猪股骨进行脱细胞处理,应用溶液共混、冷冻干燥法制备脱细胞骨基质-壳聚糖复合支架。对ABECM材料进行定性分析,观察ABECM-CS复合多孔支架的形态学、孔隙率、力学性能和细胞-支架复合培养的相容性。结果 ABECM材料HE染色、Hoechest33258荧光染色均无细胞残留,茜素红染色、Ⅰ型胶原免疫组织化学染色、骨形态发生蛋白-2抗体染色阳性。扫描电镜显示支架具有多孔结构,孔径50-200μm,孔隙率为(53.50±4.23)%,力学测试支架干燥状态纵向压缩模量为(33.23±14.45)MPa,支架湿润状态下的压缩模量为(2.27±1.13)MPa。细胞-支架复合培养相容性良好。结论制备的ABECM-CS复合多孔支架去细胞彻底,保留了脱细胞骨基质主要成分,具备合适的孔径和孔隙率,细胞相容性良好,是理想的骨组织工程支架。 刘昊 张永刚 郭全义 黄靖香 张莉 黄野 韩雨 赵斌 汪爱媛 王玉 眭翔 许文静 卢世璧关键词:脱细胞骨基质 壳聚糖 骨组织工程 化学去细胞同种异体神经移植术后病人的护理 被引量:7 2008年 [目的]探讨对化学去细胞同种异体神经修复周围神经损伤的护理及康复。[方法]自2003年4月-2006年4月,应用化学去细胞同种异体神经移植治疗完全断裂周围神经损伤患者39例,术后及出院后进行专项护理及康复,术后6个月以上患者随访共21例,对结果进行统计分析。[结果]21例患者中,16例神经损伤恢复效果达到优良,修复优良率达到71.4%。[结论]对化学去细胞同种异体神经移植术后的患者进行康复及护理,可以获得良好的临床效果。 许文静 于海龙 孙明学 彭江 郭全义 张莉 卢世璧关键词:神经移植 去细胞神经 周围神经损伤 护理