郑海学
- 作品数:528 被引量:410H指数:10
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金甘肃省科技重大专项计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- A型口蹄疫重组疫苗株及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种利用反向遗传操作技术制备的A型口蹄疫重组疫苗株及其制备方法和应用,一种是效价高、抗原匹配性和免疫保护率高的A型口蹄疫重组疫苗株,另一种是效价高、抗原匹配性、免疫保护率高且对宿主无致病性的A型口蹄疫重组无致病...
- 刘湘涛郑海学杨帆靳野郭建宏曹伟军张克山田宏何继军董海聚才学鹏
- 文献传递
- 一种利用悬浮细胞系制备塞内卡病毒的方法
- 本发明提供了一种使用悬浮细胞系制备塞内卡病毒的方法,所述方法包括如下步骤:(1)将贴壁的ST细胞系驯化为悬浮ST‑S细胞系;(2)使用步骤(1)得到的悬浮ST‑S细胞系培养制备塞内卡病毒。本发明通过采用驯化得到的悬浮ST...
- 郑海学曹伟军杨帆朱紫祥魏婷郑敏蒋保余田宏张克山刘永杰茹毅党文刘湘涛
- 文献传递
- ANXA1促进Ⅰ型干扰素表达抑制口蹄疫病毒的复制被引量:2
- 2018年
- 【目的】研究膜联蛋白A1(Annexin A1,ANXA1)对Ⅰ型干扰素(I-IFN)表达及口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响。【方法】开展过表达及Knockdown实验,检测ANXA1对FMDV复制的影响。利用双荧光素酶报告系统检测ANXA1对ISRE和IFN-β启动子元件活化的影响。双荧光素酶报告系统鉴定ANXA1调控Ⅰ-IFN通路活化靶分子。Western blotting检测ANXA1对干扰素调解因子3(IRF3)磷酸化的影响。Real-time PCR检测ANXA1对干扰素刺激基因(ISGs)的影响。【结果】过表达ANXA1显著抑制FMDV的复制;下调ANXA1表达促进FMDV复制(P<0.01或P<0.05);ANXA1促Ⅰ型干扰素通路活化,呈现剂量依赖性(P<0.01)。ANXA1显著增强IRF3的磷酸化,促进ISGs的表达(P<0.01或P<0.05)。【结论】ANXA1促进Ⅰ-IFN表达,抑制FMDV的复制。
- 罗志宽马旭升杨孝朴郑海学
- 关键词:膜联蛋白A1口蹄疫病毒
- 一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽及其应用
- 本发明提供了一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽及其应用,属于生物医药技术领域;所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种;所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序...
- 郑海学毛箬青孙德惠周晓丽朱昱茜刘华南张克山刘湘涛
- 文献传递
- 一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽及其应用
- 本发明提供了一类促进猪机体产生广谱性免疫应答的多肽及其应用,属于生物医学技术领域;所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一种或几种;所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序...
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- β-雌二醇和孕酮促进非洲猪瘟病毒体外复制
- 2022年
- 旨在探究雌二醇(β-estradiol,E2)和孕酮(progesterone,P4)对非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)体外复制的影响。采集空怀猪血清(non-pregnant swine serum,NPSS)和怀孕猪血清(pregnant swine serum,PSS)处理后,用添加胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、NPSS和PSS的培养液分别培养猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAMs)和骨髓巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDM)并感染ASFV,利用绝对定量PCR和Western blot检测ASFV复制差异;用E2和P4 ELISA试剂盒检测各组血清中E2和P4含量;并在FBS组中单独或者混合添加E2和P4后感染ASFV,检测ASFV复制差异;用NPSS和PSS培养BMDM 24 h后,相对定量检测β-干扰素及下游抗病毒因子转录差异。PSS培养组ASFV复制高于NPSS培养组;PSS中E2和P4的含量均高于NPSS,且FBS中E2和P4的含量很低;在FBS组中单独或者混合添加E2和P4后ASFV复制量增加;PSS培养BMDM后会抑制β-干扰素及下游抗病毒因子的转录。PSS中高含量的E2和P4促进ASFV复制,本研究为解释临床上猪群感染非洲猪瘟(African swine fever,ASF)后母猪首先发病且怀孕母猪病情较重的现象提供一定的科学依据。
- 袁兴国申超超赵登率杨博崔卉梅郝雨杨金柯陈学辉张婷张克山张克山刘霞郑海学
- 关键词:非洲猪瘟病毒雌二醇孕酮体外
- 非天然氨基酸定点修饰的POP蛋白、制备方法及应用
- 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种基于遗传密码子扩展技术和生物正交翻译系统在脯氨酰寡肽酶(POP)的特定氨基酸残基定点引入非天然氨基酸修饰的方法。所述方法包括使用遗传密码子扩展技术在POP蛋白基因编码区引入提前终止密码...
- 郑海学郝荣增茹毅卢炳州马坤杨洋李亚军刘华南冯涛李丹毛玉涵张越
- 猪水泡病病毒HK′1/70株基因组全长cDNA的构建及其序列测定被引量:1
- 2007年
- 从实验感染猪水泡病病毒(SVDV)的乳鼠组织中提取RNA,利用长距离的RACE技术,扩增出覆盖SVDVHK′1/70株全基因组的2个忠实性的cDNA重叠片段(3′PCR片段和5′PCR片段),分别克隆进pGEM-T Easy载体。利用AatⅡ和BssHⅡ酶切含5′PCR片段的重组质粒,回收目的片段,定向克隆于含3′PCR片段的重组质粒,构建出了SVDV HK′1/70株全长cDNA重组质粒,然后进行序列测定。结果表明,HK′1/70株基因组全基因组序列长7 401 nt(poly A除外),其中5′NCR长743 nt,该毒株蛋白编码区的核苷酸序列为6 558 nt,编码一个长2 185个氨基酸的聚合蛋白,3′NCR长102 nt,其后是至少含有74个A碱基的poly A尾。在HK′1/70株全长cDNA序列的5′端引入了T7启动子序列,在poly A3′端引入了Psp1406Ⅰ识别序列。通过序列同源性和进化树分析,结果表明,HK′1/70属于第Ⅱ抗原遗传群,SVDV与CB5的遗传关系最近,且位于CB5遗传进化树的分支上。HK′1/70株全长cDNA的序列测定及构建,为拯救SVDV和在分子水平进一步深入研究SVDV打下坚实的基础。
- 郑海学刘湘涛尚佑军张淼涛冯霞白兴文吴锦艳吕建亮孙世琪尹双辉郭建宏谢庆阁
- 关键词:猪水泡病病毒RACE全长CDNA克隆分子克隆
- 抗非洲猪瘟病毒P72蛋白中和活性单克隆抗体3F1及其应用
- 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种抗非洲猪瘟病毒(ASFV)P72蛋白中和活性抗体3F1及其应用。本发明利用杂交瘤细胞融合技术,成功获得一株特异性针对ASF VP72蛋白的中和活性单克隆抗体3F1,在体外具有阻止ASF...
- 王琦曹丽艳郑海学孔祥雨万颖张宇孙茂文段月月袁聪
- 一种复制缺陷型口蹄疫病毒、构建方法及应用
- 本发明属于基因工程领域,具体涉及一种复制缺陷型口蹄疫病毒、构建方法及应用。本发明基于遗传密码子扩展技术实现RNA病毒基因组中TAGA四联体密码的高效通读并应用于动物病毒疫苗的研究;本发明将编码口蹄疫病毒L蛋白第42位酪氨...
- 郑海学郝荣增茹毅卢炳州马坤毛玉涵杨洋李亚军刘华南冯涛李丹张越