许颂霄
- 作品数:22 被引量:77H指数:5
- 供职机构:浙江大学医学院附属邵逸夫医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- HtrA基因缺陷对肺炎链球菌毒力影响的研究被引量:5
- 2006年
- 目的HtrA基因可编码肺炎链球菌的一种重要蛋白酶,本文目的是探索HtrA基因缺陷对细菌毒力的影响.方法用插入复制失活的方式使HtrA基因缺失,通过RT-PCR分析毒力因子表达,并通过动物试验观察HtrA基因缺陷株毒力改变情况.结果RT-PCR显示HtrA缺陷株毒力因子表达低于野毒株,两组比较P<0.05;转化试验发现缺陷菌株转化力下降;小鼠毒力试验表明野毒株半数致死时间22h,而缺陷株半数致死时间8d,P<0.01,有显著性差异;缺陷菌在小鼠体内被清除速度也显著快于野毒株.结论HtrA基因缺陷使肺炎链球菌多种毒力因子表达减弱,自然转化能力下降,毒力降低.
- 黄远帅许颂霄朱旦阳强刘明芳陈淑惠张雪梅尹一兵
- 关键词:肺炎链球菌毒力因子密度感应系统
- 肺炎链球菌comX基因可影响细菌毒力基因表达被引量:2
- 2007年
- 目的:探讨肺炎链球菌的转化相关基因comX与其毒力表达的关系.方法:采用插入失活的方法制备肺炎链球菌的相关基因缺陷菌株,通过小鼠毒力实验观察它们毒力的变化,并应用RT-PCR测定肺炎链球菌的主要毒力因子透明质酸酶(phd),分泌型IgA结合蛋白(sIgA),肺炎链球菌自溶酶(lytA),肺炎链球菌神经氨酸酶A(nanA)和肺炎链球菌溶血素(ply)在细菌感受态发生过程中的表达,并比较其在野生和缺陷菌株中的表达的异同.结果:野生菌株的毒力基因受感受态刺激因子(CSP)诱导表达增加;虽comX基因缺陷菌株与野生菌株感染小鼠的能力无显著差异,但其ply基因的表达与comE基因缺陷菌株一样显著低于野生菌株的表达.结论:comX可通过细菌转化的通路影响细菌毒力基因的表达.
- 张雪梅尹一兵孟江萍许颂霄王虹黄远帅
- 关键词:毒力基因
- 新型duplex scorpion探针技术在结核分枝杆菌定量PCR检测中的应用
- <正>结核病仍然位于全球传染病首位,特别是随着艾滋病的传播与流行、吸毒、贫困等原因,各国发病率、死亡率都有上升趋势。我国属于全球22个结核病高负担国家之一,而且结核病人
- 王虹钟敏许颂霄尹一兵
- 文献传递
- PspA免疫小鼠抗肺炎链球菌侵袭性感染研究被引量:5
- 2007年
- 目的:获取原核表达的肺炎链球菌PspA重组蛋白并研究其作为疫苗的价值.方法:分离培养肺炎链球菌TIGR4,获取其染色体DNA,采用基因体外重组法将编码PspA抗原表位在内的部分序列克隆到原核表达载体PET-32(a)内,酶切及测序鉴定重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,将获得的重组蛋白用Western Blot鉴定,镍柱纯化并透析除盐.用重组蛋白免疫动物,观察PspA抗体对肺炎链球菌感染小鼠的保护作用.结果:DNA序列与Gen-Bank中的数据相符,所表达纯化的蛋白经Western Blot证实为PspA,其抗体在肺炎链球菌感染中对小鼠有保护作用.结论:重组PspA刺激产生的抗体能够有效抵抗肺炎链球菌TIGR4侵袭性感染,该重组蛋白可作为肺炎链球菌多肽联合疫苗的组成部分之一.
- 胥文春曹炬许颂霄罗进勇朱旦尹一兵
- 关键词:疫苗
- 基因芯片在感染性疾病研究中的应用被引量:1
- 2005年
- 人类基因组计划、病原体基因组测序的完成,以及基因芯片技术的出现,为研究感染性疾病的致病分子开拓了新的天地。基因芯片技术因具有检测快速、高效、并行等特点,加速了对微生物和宿主之间复杂的遗传学过程的认识,有利于发现病原体毒力相关基因和宿主防御策略,从而有助于感染性疾病的诊断、治疗和预防。
- 朱建军许颂霄尹一兵
- 关键词:基因碱基序列传染病
- CK1介导磷酸化调控OREBP低渗透压条件下的核浆转运
- 渗透压反应增强子结合蛋白(Osmolarity Response EnhancerBinding Protein,OREBP或称Tonicity Enhancer Binding Protein,TonEBP),又名:活...
- 许颂霄
- 关键词:渗透压磷酸化修饰
- 文献传递
- 定量PCR的荧光技术被引量:9
- 2005年
- 荧光定量PCR是在普通PCR基础上,利用荧光技术对核酸进行绝对定量的一项新兴技术,其灵敏度高、特异性高、操作简便和定量准确,已被广泛应用于临床和科研中。为更好地发挥荧光定量PCR的优点,荧光技术领域的研发工作十分活跃。
- 许颂霄王虹尹一兵
- 关键词:荧光定量PCR荧光探针
- 表皮葡萄球菌黏附机制的研究被引量:7
- 2006年
- 目的了解我院表皮葡萄球菌ica操纵子、表达产物PIA的阳性率及其与黏附的关系。方法采用PCR对ica操纵子中icaA基因进行扩增并进行琼脂糖电泳检测;采用刚果红琼脂检测基因产物PIA;采用输液器管壁黏附表皮葡萄球菌量评价其对输液器管壁的黏附能力。结果表皮葡萄球菌ica操纵子中icaA基因检出率为51.5%,PIA检出率为50.0%;PIA阳性、阴性两组菌落计数均值分别为4.94×105CFU/ml、1.40×105CFU/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PCR检测表皮葡萄球菌icaA方法简便易行,能可靠地反映其PIA的表达情况;PIA阳性、阴性表皮葡萄球菌的黏附能力差异有统计学意义。
- 黄长武邱君凤许颂霄李兴禄
- 关键词:表皮葡萄球菌
- BRAFV600E检测和Bethesda甲状腺细胞病理报告系统在TIRADS4-5类甲状腺结节良恶性诊断中的应用被引量:15
- 2017年
- 目的 比较BRAFV600E检测和Bethesda甲状腺细胞病理报告系统(BSRTC)在TIRADS 4-5类甲状腺结节良恶性诊断中的应用价值,探索两种方法联合应用的诊断意义.方法 回顾性分析浙江大学医学院附属邵逸夫医院行超声诊断诊为TIRADS 4-5类的甲状腺结节共187个(187例患者),均予超声引导下细针穿刺细胞学检查(FNAC)及BRAFV600E检测,构建受试者工作特征曲线(ROC)来评估各方法的诊断价值,探讨其联合应用的意义.采用SPSS 17.0软件对数据进行统计学分析.结果 123个结节为恶性,均经手术病理结果证实,64个结节为良性,经细胞学结果或手术病理结果证实,或经长期随访诊为良性.BSRTC诊断恶性结节的灵敏性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别是62.6%、93.8%、95.1%、56.6%(χ2=54.4,P=0.000);BRAFV600E检测诊断恶性结节的灵敏性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别是69.1%、98.4%、98.8%、62.4%(χ2=77.3,P=0.000);联合应用后诊断的灵敏性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别是87.8%、92.2%、95.6%、79.7%(χ^2=112.6,P=0.000),其ROC曲线下面积(AUC)高于其他两种方法(0.900比0.858、0.838).结论 BRAFV600E检测、BSRTC对TIRADS 4-5类甲状腺结节良恶性的诊断具有重要价值,两者联合对恶性结节的检出价值更高.
- 韩英赵博文李世岩吕江红寿金朵余海珊楼海亚许立龙高力许颂霄朱江
- 关键词:甲状腺肿瘤
- 新型二聚体蝎型探针技术在结核分枝杆菌荧光定量聚合酶链反应中的应用被引量:1
- 2006年
- 目的利用二聚体蝎型荧光探针技术,建立一种敏感特异、快速价廉且能广泛应用的结核分枝杆菌DNA荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测方法。方法构建重组质粒pMD18-T-senX3-regX3 IR作为标准品,自行设计二聚体蝎型探针,优化定量PCR体系,并进行方法学评价及初步临床应用。结果(1)成功构建了重组质粒pMD18-T-senX3-regX3IR。(2)建立了利用二聚体蝎型荧光探针的荧光定量PCR方法,其线性范围:10^1~10^7拷贝/μ1;灵敏度:10^1拷贝/μ1;重复性:批内变异系数(CV)为2.35%,批间CV为3.17%,日间CV为4.06%;特异性100%;(3)初步临床应用证明:该方法比商品化Taqman方法阳性检出率更高,检测时间更短和成本也明显降低。结论本研究首次建立了以二聚体蝎型荧光探针技术为平台的结核分枝杆菌荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法,这为应用二聚体蝎型荧光探针技术开辟检测结核分枝杆菌的分子诊断新途径奠定了一定的基础。
- 王虹钟敏许颂霄尹一兵
- 关键词:分枝杆菌结核聚合酶链反应分子探针