许万云
- 作品数：19 被引量：140H指数：4
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学哲学宗教更多>>
- 新疆4个绵羊品种内皮型一氧化氮合酶基因第8外显子的PCR-SSCP鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的:对新疆4个绵羊品种内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因第8外显子的多态性进行鉴定。方法:利用PCR-SSCP和测序的方法对76只中国美利奴羊、51只无角陶赛特羊、57只萨福克羊、37只哈萨克羊共4个绵羊品种进行单核苷酸多态性(SNP)检测,并用生物信息学方法对检测出的SNP进行统计分析。结果:在中国美利奴羊、无角陶赛特羊、萨福克羊、哈萨克羊中共检测到AA、AB、BB等3种基因型,AA基因型的频率分别为0.0526、0.0980、0.1754和0.2973,BB基因型的频率分别为0.6316、0.1961、0.5614和0.1892,AB基因型的频率分别为0.3158、0.7059、0.2632和0.5135。通过测序,在eNOS基因第8外显子上发现了一个新的SNP位点(ss974768653),位于绵羊eNOS基因第8外显子142 bp处(A142G)。结论:中国美利奴羊和哈萨克羊的多态性位点(P>0.05)处于Hardy-Weinberg平衡状态,萨福克和无角陶赛特羊的多态性位点(P<0.05)不处于Hardy-Weinberg平衡状态。
- 李建华许万云胡梦薇汪文伦高剑峰
- 关键词：绵羊内皮型一氧化氮合酶PCR-SSCP单核苷酸多态性外显子
- 喉部癌肉瘤(附一例报告及文献复习)
- 2000年
- 许万云王琪
- 关键词：喉部癌肉瘤外科手术
- 绵羊DRA基因外显子2酵母表面展示库的构建及鉴定被引量：3
- 2016年
- 根据绵羊DRA基因序列和酿酒酵母表面展示载体pYD1上的多克隆位点设计特异性引物,从绵羊组织中提取总RNA并逆转录,利用PCR技术扩增得到DRA基因,克隆获得762bp目的片段,并提交GenBank,登录号:KR422362。将该基因通过双酶切连接到表面展示载体pYD1上,成功构建了酿酒酵母表面展示重组质粒pYD1-DRA。将DRA基因外显子2两端进行基因点突变,形成新的酶切位点,继而对外显子2设计特异性引物,对绵羊大样本进行DNA池化,并将外显子2扩增产物测序,分析其多态性获得多态位点。重组质粒双酶切得到246bp具有多态性的外显子2,将其连接到经同样酶双酶切的表面展示重组突变载体pYD1-DRA-TB上,成功构建了酿酒酵母表面展示库。将其转化用于表面展示的酿酒酵母EBY100感受态细胞中,得到酵母转化子,挑取酵母菌的单克隆通过PCR扩增及序列测定证实了DRA基因库已成功整合到酿酒酵母基因组中。经半乳糖诱导后,通过免疫荧光法在荧光显微镜下检测得到DRA基因库已成功展示在酵母细胞表面。
- 许万云王会敏汪文伦胡梦薇严国李建华高剑峰
- 关键词：绵羊DRA外显子2点突变免疫荧光法
- 慢性鼻-鼻窦炎伴与不伴鼻息肉患者临床特征的比较被引量：7
- 2020年
- 目的比较慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSwNP)与不伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis without nasal polyps,CRSsNP)的临床特征,为制定合理治疗策略提供依据.方法回顾性分析2018年11月~2019年12月住院手术的苏皖地区225例慢性鼻-鼻窦炎(CRS)患者术前血常规、血生化、血清总IgE(total IgE,tIgE)、特异性IgE(specific IgE,sIgE)、鼻窦CT及术后病理检查等临床资料,进行统计学分析.结果225例中,CRSwNP组148例(65.8%),CRSsNP组77例(34.2%).患者的性别、年龄、住院时间、外周血白细胞及分类、血生化指标在两组间差异无统计学意义(P>0.05).CRSwNP和CRSsNP患者中至少1种变应原阳性分别占34.5%和40.3%,其中尘螨过敏最多见,阳性率分别为23.0%和26.0%,两组间差异均无统计学意义(P>0.05).血清tIgE阳性率、20种变应原slgE浓度等级和阳性率、吸入性及食物性变应原阳性率在两组间差异也均无统计学意义(P>0.05).鼻窦CT扫描Lund-Mackay评分中,两组各鼻窦、窦口鼻道复合体及CT总分CRSwNP组都高于CRSsNP组,差异均有统计学意义(P<0.05).在病理组织中,两组患者淋巴细胞及浆细胞浸润均为60%以上,但嗜酸性粒细胞(Eos)在CRSwNP组的阳性率为43.2%,显著高于CRSsNP组的阳性率22.1%,差异有统计学意义(P<0.05).结论本地区CRS患者目前仍以淋巴细胞/浆细胞性炎症为主,但CRSwNP息肉组织中Eos阳性率达43.2%,需引起重视并进一步关注.CRSwNP和CRSsNP患者变应原阳性率分别为34.5%和40.3%,两者无明显差异,尘螨为主要致敏原.
- 胡万玉敖天殷敏许万云陆美萍崔昕燕崔昕燕朱歆洁
- 关键词：鼻窦炎鼻息肉变态反应和免疫学嗜酸细胞疾病特征
- 中国美利奴羊eNOS基因exon8多态性及其与布鲁氏菌病易感性相关性分析
- 2015年
- 本试验旨在研究内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因exon8多态性与中国美利奴羊布鲁氏菌病易感性的相关性。利用生物信息学方法对人和中国美利奴羊eNOS基因exon8序列进行比对,并对NCBI SNP数据库上人eNOS基因exon8多态性进行了统计分析。通过PCR-SSCP对101只中国美利奴羊阴性样本和61只中国美利奴羊阳性样本eNOS基因exon8的多态性进行检测,然后对不同等位基因进行PCR产物测序,旨在确定该基因exon8多态性位点,并对SNP位点的等位基因频率、基因型频率进行统计分析。在eNOS基因exon8序列142bp处检测到一个新的SNP位点(ss974768653:A142G),该位点在病例组和对照组之间的等位基因频率及各基因型间不存在显著差异性(P>0.05)。eNOS基因exon8A142G多态性位点与中国美利奴羊布鲁氏菌病易感性可能无相关性。
- 许万云王会敏李建华汪文伦胡梦薇高剑峰
- 关键词：ENOSPCR-SSCP多态性外显子
- 鼻内镜下腺样体切除术对儿童慢性鼻窦炎和分泌性中耳炎转归的影响被引量：82
- 2005年
- 目的:探讨鼻内镜指导下吸切器切除腺样体对儿童慢性鼻窦炎和分泌性中耳炎临床转归的影响。方法:对15例并发慢性鼻窦炎和(或)分泌性中耳炎的腺样体肥大患儿,在鼻内镜指导下采用Xomed电动吸切器行腺样体切除术,再辅以药物治疗后观察其转归情况。结果:15例患儿睡眠打鼾停止,无腺样体残留及并发症发生。术后慢性鼻窦炎和(或)分泌性中耳炎经药物治疗后均痊愈。结论:鼻内镜下吸切器腺样体切除术,是一种微创、有效的手术,且对与腺样体肥大有关的慢性鼻窦炎和分泌性中耳炎亦有良好的治疗效果。
- 李华斌许万云邢光前卜行宽
- 关键词：腺样体切除术鼻窦炎儿童
- 鳃裂囊肿及瘘管诊断和治疗
- 目的：总结临床经验,提高对鳃裂囊肿及瘘管的认识诊断水平,达到最佳治疗效果。方法：(1)临床上分为五类：①两端均有开口者为瘘管,②仅皮肤有外口者为不完全瘘管或窦道,③仅开口于咽腔者为不完全瘘管,④合并囊肿的不完全瘘管,⑤孤...
- 乔明哲许万云
- NO/ADMA在布鲁菌侵染小鼠机体过程中的响应特征被引量：1
- 2016年
- 本试验旨在研究布鲁菌侵染小鼠过程中一氧化氮(NO)的作用,以及NO和非对称性二甲基精氨酸(ADMA)在此过程的相互作用关系。以布鲁菌标准疫苗株M5侵染小鼠,首先用小鼠的血清进行虎红平板凝集(RBPT)和试管凝集试验(SAT),再用Griess试剂法和ELISA法测定对照组和侵染组不同组织和血清中的NO和ADMA含量,对小鼠肝脏和脾脏的各个侵染时间段进行CFU计数观察。结果显示,用布鲁菌M5侵染小鼠后,RBPT和SAT在14d时检测到有阳性反应。侵染组和空白对照组NO总含量上变化不大,但侵染组血清中的NO含量随时间出现下降,而肝脾中NO含量随时间出现上升,其他各组织NO含量波动不明显。而ADMA的总趋势与NO相反。CFU计数结果显示,小鼠肝脾内布鲁菌的数量在14d时一直处于增长状态,28d时布鲁菌的数量下降,表明布鲁菌的分裂繁殖和机体NO的含量存在一定的关系。
- 胡梦薇许万云刘朋涛严国汪文伦高剑峰
- 关键词：一氧化氮非对称性二甲基精氨酸
- 人乳铁蛋白的沙漠小球藻表达系统的构建与鉴定被引量：2
- 2017年
- 为获得人乳铁蛋白的沙漠小球藻(Chlorella sp.GTD8A1)的表达系统和稳定的小球藻GTD8A1-h LF工程藻种,将人乳铁蛋白基因导入小球藻细胞中进行表达鉴定。以人血c DNA为模板,RT-PCR扩增得到人乳铁蛋白基因(Gen Bank登录号NM-002343.4),经KpnⅠ和XbaⅠ双酶切后,连接到植物表达载体p CAMBIA2300-35S-OCS中,获得重组质粒载体p CAMBIA2300-35S-h LF-OCS,将重组质粒电击转入GTD8A1中,通过菌落PCR鉴定后扩大培养,在DNA和RNA水平分析人乳铁蛋白基因的整合和转录,SDS-PAGE和Western Blot分析获得70 ku的目的蛋白;将转基因藻种(GTD8A1-h LF)在BBM培养基中进行培养周期优化。结果表明,重组人乳铁蛋白在沙漠小球藻细胞中表达成功;通过Elisa测其人乳铁蛋白表达量在20 d时达到最大,浓度为13.28 mg/L。
- 牟云汪文伦许万云胡梦薇王丹严国王会敏高剑峰
- 关键词：小球藻人乳铁蛋白SDS-PAGEWESTERNBLOT
- 中国美利奴羊OLA-DQB1基因exon 2遗传多态性与布鲁氏菌病易感性的关联分析被引量：2
- 2015年
- 本试验采用PCR-SSCP方法对148只布鲁氏菌阴性和60只布鲁氏菌阳性中国美利奴羊白细胞表面抗原DQB1(OLA-DQB1)基因exon 2单核苷酸多态性(SNPs)进行了检测,之后挑选不同等位基因进行PCR产物测序,旨在确定该基因的多态性位点,并对每个SNP位点的等位基因频率、基因型频率进行统计分析,从而分析其多态性与布鲁氏菌病易感性的相关性。测序结果表明,在270bp的序列内共检测到43个SNPs,其中G196A位点的等位基因频率在病例组和对照组中的分布存在极显著差异(P<0.01),其基因型频率存在显著差异(P<0.05);C211T位点的等位基因频率在病例组和对照组中存在显著差异(P<0.05)。由此表明,OLA-DQB1基因exon 2多态性与中国美利奴羊布鲁氏菌病易感性呈显著相关。
- 王文文许万云胡梦薇李建华刘朋涛高剑峰
- 关键词：PCR-SSCP中国美利奴羊
