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NKG2D mAb对自发性NOD小鼠同种胰岛移植的作用研究: 2010年; 目的探讨NKG2D mAb能否单独作为共刺激信号阻断剂延长自发性非肥胖型糖尿病(NOD)小鼠移植移岛的有功能存活期;NKG2D mAb和CD154 mAb是否有协同作用。方法将分离、纯化的BABL/c小鼠胰岛植入自发糖尿病的NOD小鼠左肾包膜下,移植成功的小鼠分成4组:对照组,NKG2D mAb治疗组,CD154 mAb治疗组和联合治疗组(NKG2D mAb+CD154 mAb)。通过小鼠尾静脉血监测血糖,记录胰岛移植物有功能存活期;胰岛移植物所在肾脏行HE染色和CD3、CD4、CD8免疫组织化学染色。结果 NKG2D mAb治疗组移植物有功能存活期无延长(5~11 d,对照组6~11 d,两者差异无统计学意义),CD154 mAb治疗能明显延长移植物有功能存活期〔20~64 d,中位期41 d,和NKG2D mAb治疗组及对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)〕,联合治疗组较CD154 mAb治疗能延长移植物有功能存活期(23~84 d,中位期51 d,但差异无统计学意义)。各组发生排斥时胰岛移植所在肾脏均见淋巴细胞浸润,CD3、CD4、CD8染色结果无明显差异。结论 CD154 mAb能明显延长NOD小鼠胰岛移植物有功能生存期;单独使用NKG2D mAb治疗,不能延长胰岛移植物有功能生存期;联合治疗有效,但仍不能诱导移植物长期存活。; 潘华陆燕蓉张肇达金曦魏玲玲袁宇陆慧敏麦刚; 关键词：NKG2D MAB CD154 MAB 胰岛移植

大鼠胰岛的分离纯化方法改进与功能鉴定被引量：14: 2008年; 目的通过改进胰腺消化和分离的技术条件,提高成年大鼠胰岛分离纯化产率和质量。方法用胶原酶Ⅺ液灌注消化成年SD大鼠胰腺,对胰岛分离纯化方法加以改进:以4种比重的Euro-Ficoll(F1:D=1.132,F2:D=1.108,F4:D=1.069)Hank’s(F5:D=1.023)不连续密度梯度离心,以离心半径15cm,2000r/min于4℃缓慢升降离心20min,收集位于F1和F2界面的胰岛。双硫腙特异染色法鉴定胰岛纯度;二醋酸酯荧光素/碘化丙啶染色法计算胰岛成活率;放射免疫分析法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌量,计算刺激指数。将胰岛当量(islets equivalent quantity,IEQ)为1000的胰岛移植于同品系糖尿病大鼠肾包膜下,9d内隔日观察动物血糖的变化,评价胰岛功能。比较分离条件优化前后收获胰岛的产率和质量。结果改进纯化方法后每只大鼠胰岛收获量为(920±122)IEQ,胰岛纯度>90%,胰岛细胞成活率为91%±2%。胰岛细胞功能良好,在低糖和高糖刺激后培养液中胰岛素浓度分别为(18.25±0.32)mU/L和(36.70±3.57)mU/L,刺激指数为2.01±0.15。1000 IEQ胰岛移植于糖尿病大鼠肾包膜下,观察期内可维持动物血糖水平正常。结论改进后的胶原酶灌注消化和不连续梯度离心方法提高了胰岛的产率,保证了胰岛的高纯度及高成活率。; 袁宇丛聪张静魏玲玲李胜富金熙麦刚李幼平程惊秋陆燕蓉; 关键词：胰岛纯化胰岛素

恒河猴骨髓间充质干细胞分离培养及其生长特性被引量：5: 2007年; 采用密度梯度离心和贴壁筛选方法分离纯化了恒河猴骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells from bone marrow of Rhesus monkey,RhBMSCs);通过表面抗原检测和核型分析对细胞进行了初步鉴定;通过生长曲线的绘制和细胞凋亡的检测探讨了细胞的生长特点。本实验获得的RhBMSCs形态以梭型为主,核型正常,CD29表达率为99.2%,CD34、CD45、HLA-DR表达率均低于3.2%,RhBMSCs表型符合间充质干细胞的特点,且纯度较高,细胞生长旺盛,但倍增时间有随传代数的增加而逐渐延长的趋势。本实验探讨了RhBMSCs的体外分离、扩增培养及鉴定的方法,并对其生长特点进行了初步观察,这不仅有助于进一步了解与之近似的人的骨髓间充质干细胞的相关特性,而且为以猕猴为对象的BMSC定向分化和组织修复等动物体内实验打下了基础。; 高昆陆燕蓉李胜富丛聪袁宇张杰程惊秋李宏霞王莉; 关键词：骨髓间充质干细胞恒河猴细胞培养细胞特性

大鼠骨髓间充质干细胞对淋巴细胞增殖的负调节作用被引量：2: 2008年; [目的]探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)的免疫负调节作用。[方法]分离和鉴定大鼠MSCs,用MTS法观察该细胞对淋巴细胞增殖活性的影响,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测MSCs与淋巴母细胞混合培养液24h后上清中LDH活性。[结果]大鼠MSCs表型为CD29+、CD44+、CD45-、CD54+、CD95+和SH-2+,具有诱导分化成脂肪和成骨的潜能力,对ConA刺激的淋巴细胞增殖有显著的抑制作用,能够诱导淋巴母细胞裂解,释放LDH。[结论]MSCs能够抑制淋巴细胞的活化增殖,这种负向免疫调节功能有可能在免疫耐受诱中发挥作用。; 丛聪袁宇魏玲玲陈又南金熙李幼平程惊秋陆燕蓉; 关键词：骨髓间充质干细胞淋巴细胞增殖抑制

枯草芽孢杆菌PY-1对柑橘采后病害的生物防治被引量：10: 2008年; [目的]以枯草芽孢杆菌PY-1为拮抗菌研究其对柑橘果实采后由指状青霉引起的绿霉病的防治作用。[方法](1)体外实验:在混有病原菌孢子的PDA平板上接种PY-1和PY-1发酵滤液。(2)体内实验:对柑橘果实人工接种绿霉病,测定PY-1菌悬液、发酵液、无菌发酵液、热处理发酵液对绿霉病以及对菌斑扩展的抑制作用。[结果](1)体外实验中PY-1及其发酵滤液均表现出对病原菌的抑制作用。(2)与对照组相比,PY-1的四种处理液均对绿霉病以及菌斑的扩展有较好的抑制作用,抑制效果强弱依次是:发酵液,菌悬液,无菌发酵液,热处理发酵液。[结论]PY-1可作为生物拮抗菌应用于柑橘果实采后绿霉病的生物防治。; 张静龚萌袁宇杨浩陆燕蓉程惊秋; 关键词：柑橘枯草芽孢杆菌生物防治绿霉病

免疫抑制剂依维莫司对大鼠胰岛细胞的毒性作用: 2010年; 目的观察依维莫司等免疫抑制剂对大鼠胰岛瘤细胞(INS-1)和SD大鼠正常胰岛细胞代谢活性和功能的影响,旨在探讨依维莫司在胰岛移植免疫抑制治疗中的安全性和可行性。方法不同浓度梯度免疫抑制剂依维莫司、西罗莫司、环胞霉素A和霉酚酸酯处理INS-1和正常胰岛细胞,用MTT法检测细胞的代谢活性;用葡萄糖刺激胰岛素分泌实验检测胰岛细胞的胰岛素分泌功能。结果临床血药浓度以上的依维莫司和西罗莫司高浓度组胰岛细胞增殖抑制率低于环胞霉素A和霉酚酸酯(P<0.05);依维莫司在临床血药浓度范围和其它免疫抑制剂一样可以抑制胰岛细胞的胰岛素分泌功能,各组间的刺激指数差异无统计学意义。结论依维莫司和西罗莫司对INS-1细胞及SD大鼠胰岛的毒性作用较小,环胞霉素A和霉酚酸酯对INS-1和SD大鼠胰岛具有较为明显的毒性作用,依维莫司有望作为新型免疫抑制剂应用于临床胰岛移植。; 金熙丛聪袁宇麦刚魏玲玲陈又南程惊秋陆燕蓉; 关键词：依维莫司免疫抑制剂胰岛毒性

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袁宇

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