耿信笃 作品数:243 被引量:671 H指数:16 供职机构: 西北大学化学与材料科学学院现代分离科学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 陕西省自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 理学 生物学 化学工程 医药卫生 更多>>
液相色谱中的一个新的表征参数Z——V.反相液相色谱中Z和S间的非平行关系 被引量:4 1995年 对反相液相色谱中溶质计量置换保留模型(SDM-R)中的计量参数Z与常用经验公式中的线性参数S间的相同及不同性进行了比较性研究.从理论上指出了S和Z间的非平行关系.根据Z的物理意义可以在某些限定条件下用S对溶质分子结构性质、溶剂强度等进行表征.但是,用文献中实验数据验证结果表明,它不如用Z值表征的准确度高.这进一步证实了SDME-R和在反相液相色谱中用Z值为一个新的表征参数的可靠性. 张瑞燕 张玲 耿信笃关键词:反相色谱 高效液相色谱 突变人GM-CSF基因在大肠杆菌中的表达及纯化 2006年 目的构建重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的高效表达质粒,将其表达产物用于分离纯化的研究。方法用人外周血单核细胞获得总RNA作为模板和修饰的5′端密码子的引物经RT-PCR反应扩增到人GM-CSF基因,插入温控表达载体pDH构建了突变的hGM-CSF表达质粒,并将在E.coli中获得表达的突变rhGM-CSF包含体8 mol/L脲提取液进一步用离子交换色谱柱分离纯化。结果rhGM-CSF在大肠杆菌表达占菌体总蛋白量的22%,用弱阴离子交换色谱对rhGM-CSF的工程菌表达产物8 mol/L脲提取液直接经35 m in分离纯化,所得产物纯度可达95%,质量回收率可达到60%。结论这表明用离子交换色谱可进行rhGM-CSF的复性与同时纯化。 马莉 白泉 王骊丽 耿信笃关键词:重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 大肠杆菌 离子交换色谱 分离纯化 金属螯合色谱复性并同时纯化rhG-CSF 本文对金属螯合色谱复性并同时纯化rhG-CSF进行了研究。文章本中的金属鳌台色谱复性并同时纯化方法可以大大缩短rhG-CSF生产过程。这对rhG-CSF的大规模生产更为重耍,而且在氧化过程中采用廉价的铜离子作为催化剂,而... 王超展 王骊丽 耿信笃关键词:蛋白质纯化 色谱分离 文献传递 天然溶菌酶在疏水表面置换吸附焓的盐浓度影响研究 <正>天然溶菌酶(Lys)在适度疏水表面置换吸附焓((?)H)的盐浓度影响研究,是探讨变性Lys在适度疏水表面上折叠复性时置换吸附焓的变化(?)H随外界因素影响的基础,对于研究变性蛋白折叠自由能和蛋白药物纯化都有重要的理... 耿信鹏 郑美荣 王保怀 耿信笃 刘爱玲文献传递 用疏水色谱法纯化基因重组牛朊病毒正常成熟蛋白 被引量:1 2001年 研究并比较了高效疏水相互作用色谱 (HPHIC)的流动相组成、固定相、p H值和梯度方式对分离基因重组大肠杆菌高效表达的牛朊病毒正常成熟蛋白的影响 .在此基础上 ,确定了牛朊病毒正常成熟蛋白分离纯化的最优化条件 ,即仅用高效疏水色谱法进一步便可得到纯度和质量回收率均大于 90 %的目标蛋白 .还讨论了用 HPHIC对变性 b Pr Pc L 的分离机理 . 耿信笃 王超展 张养军 申烨华 王大伟 田波关键词:朊病毒 基因工程 前沿色谱中溶质突破曲线的计量置换模型 1994年 依据质量守恒及固定相表面活性点数目的不变性,推导出溶质在前沿色谱中突破曲线的计量置换模型,并对此模型的性质进行了初步讨论。 耿信笃 边六交关键词:色谱分析 淫羊藿属药材反相高效液相色谱指纹图谱及质量评估研究 被引量:29 2006年 用一种新的多台阶梯度洗脱的反相高效液相色谱(RPLC)法,首次建立了秦岭山区产4种产地及亚属均不相同的淫羊藿属药材的由9种成分组成的色谱指纹图谱.并以淫羊藿甙为内标作为相对标准,对其质量进行了评估.然而,因其产地和亚属的不同,指纹图谱又各有特征,发现产地不同的两种淫羊藿亚属,箭叶淫羊藿的RPLC指纹图谱由12个色谱峰组成.还提出用相对含量比较法对各种类淫羊藿中9种成分的含量进行了质量评价.本工作所建立的淫羊藿属药材的RPLC指纹图谱法从试样提取的精密度、稳定性、图谱重复性等方面均符合《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》中的有关规定.该方法具有重现性好,特征性强,方法简便、快速等特点,有可能成为淫羊藿药材种属判断、质量评估的标准,也会对未来开发淫羊藿中其他有效成分提供科学的依据. 王丽霞 王超展 耿信笃关键词:淫羊藿甙 指纹图谱 反相高效液相色谱 基因重组人肿瘤坏死因子的同时纯化及复性新工艺 被引量:3 2001年 目的建立一套新的同时纯化和复性工艺,用于基因重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)的纯化。方法采用高效疏水作用色谱直接从表达rhTNF-α的大肠杆菌裂解液中纯化rhTNF-α,并采用稀释法和透析法对上述样品进行复性研究。结果高效疏水作用色谱在纯化rhTNF-α的同时,可获得高复性效率。同时,也使原来需要几步才能完成的操作,在疏水作用色谱上一次完成,大大简化了操作步骤。用SDS-PAGE和考马斯亮兰染色,对纯化的rhT-NF-α进行分析和鉴定,其一步纯化的纯度达到95%以上,活性回收率分别较稀释法和透析法高2倍和3.5倍。结论建立的纯化及同时复性的新工艺,具有简单、快速和纯度高的优点。 郭立安 黄亚渝 耿信笃关键词:HPLC 肿瘤坏死因子-Α 复性 重组蛋白质 基因重组 α-淀粉酶及α-糜蛋白酶的脲变动力学研究 被引量:1 2002年 用疏水色谱(HIC)对8.0mol/L脲变性的α-淀粉酶(α-Amy)和α-糜蛋白酶(α-Chy)的变性动力学进行了研究。结果表明:α-Amy的变性为平缓的渐变过程,其变体数目较多,且绝大多数变体的疏水性都小于天然蛋白;α-Chy是骤变(可能是瞬间变性)过程,相对而言α-Chy的变体数目较少,且疏水性均大于天然蛋白。认为两种蛋白不同的脲变动力学行为,可能是因蛋白中α-螺旋含量以及蛋白质自身稳定性不同所致。 耿信笃 薛卫华 卫引茂关键词:Α-淀粉酶 Α-糜蛋白酶 疏水色谱 在疏水色谱中蛋白质保留的热力学研究 2002年 研究了 0— 5 0℃温度范围内五种蛋白在疏水色谱 (HIC)中的热力学行为 .用非线性 Van't Hoff作图求得蛋白的热力学参数 (Δ H°,ΔS°,ΔCp°,Δ G°) .发现蛋白的保留由熵控制 .除自由能ΔG°外 ,其余 3个热力学参数与温度间存在线性关系 .蛋白保留过程存在焓—熵补偿 ,并且补偿温度是实验温度的函数 . 赵建国 卫引茂 耿信笃关键词:疏水色谱 生物大分子 热力学