石文芳
- 作品数：13 被引量：7H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 利用噬菌体环肽库筛选可溶性肿瘤坏死因子受体1的特异性结合肽被引量：1
- 2005年
- 目的 应用噬菌体环肽库筛选肿瘤坏死因子α(TNF- α) 的模拟肽, 为研制模拟TNF -α的新型多肽药物奠定基础。方法 用亲和纯化的可溶性TNF受体1 (sTNFR -1) 作为筛选配基, 对噬菌体随机环肽库进行亲和筛选, 利用胞毒效应进行生物学筛选, 并进一步对某些阳性克隆进行序列测定和分析。结果 经3 轮筛选, 每轮的投入/产出比逐轮提高, 说明筛选具有良好的富集效果。并得到模拟跨膜型TNF -α(TM -TNF- α)、可溶型TNF -α(S- TNF -α) 的模拟肽和拮抗TNF作用的sTNFR 1 封闭肽。获得了TM -TNF -α的模拟肽的氨基酸序列的基序。结论 获得的模拟TM -TNF- α生物学效应的sTNFR -1结合肽, 可望发展成为一种新的TNF- α肽类新药。
- 熊霞辉石文芳张磊李清芬姜小丹龚非力李卓娅
- ICAM-1协同参与TNFRI介导的TM-TNF-α杀瘤作用被引量：2
- 2004年
- 目的 :寻找协同参与TM TNF α杀瘤作用的膜表面分子 ,探讨TM TNF α杀瘤及两型TNF α生物学效应差异的分子机制。方法 :利用抗体封闭实验及RT PCR ,检测ICAM 1及VCAM 1对TNFR1或TNFRII介导的TM TNF α杀瘤效应是否具有协同作用。结果 :封闭表达TNFRI的MCF 7细胞表面的ICAM 1,可显著降低TM TNF α对其杀伤的作用 ;而封闭VCAM 1无明显效应。封闭表达TNFRII的HL 6 0细胞表面的ICAM 1或VCAM 1,均对TM TNF α的杀伤作用无影响。结论 :ICAM 1对于TM TNF
- 郑芳石文芳冯玮姜晓丹徐勇范舫李卓娅
- 关键词：ICAM-1TM-TNF-Α
- 两型TNF-α对HL-60细胞毒效应及其机制研究
- 2005年
- 目的前期研究表明，膜型TNF-α较分泌型TNF-α具有更强和更广的细胞毒作用，本研究拟进一步研究两型TNF-α介导胞毒效应的差异。方法采用对两型TNF-α反应性不同的HL-60为靶细胞；MTT法检测两型TNF-α对HL-60的胞毒活性；RT-SSCP法检测p53基因；通过检测荧光素酶报告基因表达水平，反映NF-kB活性的变化。结果TM-TNF可以有效杀伤HL-60，S-TNF则不能。S-TNF诱导HL-60的NF-kB活性升高，TM-TNF则不能诱导HL-60的NF-kB活性升高。同时我们发现HL-60细胞的p53基因是突变的。结论HL-60细胞对S-TNF胞毒作用耐受，对TM-TNF敏感；此种差异可能在于TM—TNF能够有效抑制NF-kB的激活，进而下调突变p53基因，最终导致其抗凋亡效应减弱，杀伤效应增强，其具体机制有待深入研究。
- 喻明霞王晶石文芳姜小丹李卓娅
- 关键词：P53基因NF-KB
- 跨膜型TNF-α双向信号在AICD中的作用及机制
- 成熟T细胞活化诱导的细胞凋亡(activation induced cell death,AICD) 是机体清除免疫应答中过量的效应T细胞,调节免疫反应,维持免疫稳态和建立外周免疫耐受的重要机制。目前,已证实FasL／F...
- 王晶喻明霞杨林谌奇政石文芳李清芬姜晓丹李卓娅
- 文献传递
- TM-TNF-α模拟肽P18和S-TNF模拟肽P12的体外生物学活性的鉴定
- 2006年
- 目的:获得具有生物学活性的跨膜型TNF-α(TM-TNF-α)模拟肽。方法:以噬菌体扩增及PEG/NaCl沉淀法, 大量制备所需的噬菌体展示肽。采用细胞毒实验、RT-PCR、Western blot印迹、凋亡检测实验分别检测TM-TNF-α模拟肽的杀瘤效应、对SODD mRNA表达水平、NF-κB核转位及致死亡方式的影响。结果:噬菌体展示肽P12和P18分别能模拟sTNF-α和 TM-TNF-α的生物学活性。结论:获得能模拟TM-TNF-α的生物学活性的展示肽,为TM-TNF-α用于临床抗瘤治疗提供新线索。
- 熊霞辉李清芬石文芳冯玮姜小丹徐勇熊平龚非力李卓娅
- 关键词：噬菌体展示跨膜型TNF-ΑSODD
- 跨膜型TNF-α双向信号在AICD中的作用及机制
- 目的:以PHA活化白血病CD4+T淋巴细胞系Jurkat建立体外AICD模型,分别观察跨膜TNF-α(mT- NF-α)的正向与反向信号(reverse signaling)在AICD中的作用,并探讨其分子机制。方法:用...
- 王晶喻明霞杨林谌奇政石文芳李清芬姜晓丹李卓娅
- 文献传递
- TNF受体封闭肽对大鼠佐剂性关节炎的影响
- 研究目的:类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种常见的自身免疫性疾病,以关节滑膜组织的炎性增生,关节进行性破坏为特征。资料表明TNF-α在RA的滑膜炎症的不同时期及关节的基质退化的发展过程...
- 石文芳熊霞辉李清芬龚非力李卓娅
- 文献传递
- EST3-EGFP融合蛋白重组体的构建和表达
- 2006年
- 目的构建EST3-EGFP融合蛋白穿梭载体并检测其表达。方法重叠延伸PCR获取EST3-EGFP融合基因,克隆至pTriEx-4穿梭载体中,重组体转化至细菌Rosetta(De3)pLacI,诱导蛋白的表达,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定表达的融合蛋白;免疫印迹法检测重组蛋白的免疫学活性;荧光显微镜观察转化宿主细菌的发光活性。结果成功构建了EST3-EGFP重组体;融合蛋白主要分布于表达菌细胞质中;免疫印迹杂交检测表明重组蛋白具有EST3的免疫原性;诱导后的菌体在荧光显微镜下可见强烈的绿色荧光。结论成功构建的EST3-EGFP穿梭表达载体具有EST3免疫原性和GFP发光特性。
- 华静石文芳李卓娅
- 关键词：增强型绿色荧光蛋白
- 两型TNF-α的细胞毒效应与靶细胞内Ca^(2+)浓度变化的关系被引量：1
- 2004年
- 目的 :比较分泌型TNF α(S TNF α)和跨膜型TNF α(TM TNF α)发挥细胞毒效应时 ,引起靶细胞内Ca2 + 浓度的变化。方法 :采用生物学活性检测法 ,观察两型TNF α对不同靶细胞的杀伤效应 ;用Fura 2检测细胞内Ca2 + 浓度的变化。结果 :TM TNF α可杀伤实验所用 6株靶细胞 ;而S TNF α则仅对其中两株有细胞毒效应。两型TNF α杀伤靶细胞时 ,均伴有明显的Ca2 + 浓度升高。用钙螯合剂EGTA(10mmol/L)预先处理靶细胞30min ,只能降低S TNF α作用的靶细胞内的Ca2 + 浓度 ,并使其细胞毒效应明显减弱 (P <0 .0 1) ;对TM TNF α无影响。结论 :两型TNF α发挥细胞毒效应时 ,均可引起靶细胞内钙离子的重分布 ,导致靶细胞内Ca2 + 浓度的升高 ,但S TNF α的作用还可能与促进胞外Ca2 +
- 石文芳尹丙姣熊平龚非力李卓娅
- 关键词：跨膜型TNF-Α分泌型TNF-Α细胞毒效应CA^2+
- RGD-rAAV2提高卵巢癌细胞体外基因转导效率的研究被引量：1
- 2006年
- 目的进一步证实精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-重组腺相关病毒2(RGD-rAAV2)基因表达系统靶向卵巢肿瘤的能力。方法用流式细胞仪(FACS)检测6种卵巢癌细胞株的硫酸肝素蛋白多糖(HSPG)、整合素(integrin)αvβ3和integrinαvβ5的表达;以及野生型腺相关病毒2(wt-AAV2)对上述卵巢癌细胞感染并介导基因转导的能力;通过配体竞争结合实验进一步验证突变体RGD-rAAV2基因转导的特异性。结果wt-AAV2感染不同卵巢癌细胞的能力各有不同;卵巢癌细胞表达HSPG水平差异很大,而80%卵巢癌细胞表达integrinαvβ3或(和)integrinαvβ5;RGD-rAAV2病毒载体可以有效地感染对wt-rAAV2耐受的卵巢癌细胞SKOV-3ip并介导基因的表达,该效果是非HSPG依赖性的。结论RGD-rAAV2病毒载体具有较高的卵巢肿瘤靶向性,为卵巢癌基因靶向治疗提供了一种新的策略。
- 方光光王迪唐良振石文芳
- 关键词：卵巢癌精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸腺相关病毒基因转导
