田亚南
- 作品数：5 被引量：143H指数：4
- 供职机构：德克萨斯大学更多>>
- 发文基金：福建省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 应用多聚酶链式反应（PCR）技术检测和定量分析柑桔黄龙病病原被引量：107
- 1996年
- 应用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）技术对柑桔黄龙病病原进行检测和定量分析。研究结果表明：ＰＣＲ技术能准确、快速地检测出田间和温室内罹病的柑桔、长春花以及带菌柑桔木虱样本中的柑桔黄龙病病原（ＢＬＯ），而健康植株和柑桔木虱样本则呈阴性反应。采用的ＰＣＲ引物（Ｐｒｉｍｅｒｓ）是根据柑桔黄龙病病原亚洲株系的ＤＮＡ序列（Ｉｎ－２．６，基因库号码：Ｍ９４９１）设计的。应用竞争性定量多聚酶链式反应（Ｑ－ＰＣＲ）方法能测定病原在不同样品中的含量。该技术关键在于：病原ＤＮＡ和浓度系列稀释后的竞争物ＤＮＡ，在同一试管中进行ＤＮＡ扩增反应时，共用相同的引物。由于彼此互相竞争反应引物的结果，病原的ＰＣＲ产物和竞争物的ＰＣＲ产物在数量上呈反向线性相关。因竞争物的浓度为已知，便可从线性关系中推算出病原的含量。
- 田亚南柯穗柯冲
- 关键词：柑桔黄龙病多聚酶链式反应柑桔类果树
- 柑桔黄龙病诊断法的研究进展被引量：31
- 1998年
- 研究柑桔黄龙病的困难，在于它的病原无法人工培养。因此，长期以来对黄龙病的诊断，主要依据典型的黄梢和叶片斑驳症状。在柑桔园管理不良，缺乏营养或其它病虫混合为害时，便难依据症状作出正确的诊断。这是造成对黄龙病认识上种种混淆的主要原因。７０年代应用电镜观察到黄龙病病原（ＢＬＯ）之后，电镜便成为诊断黄龙病的重要手段。但因病原在病树体内的浓度较低，分布又不均匀，致电镜的检出率偏低。８０年代，应用兔丝子将黄龙病ＢＬＯ转到长春花上增殖、提纯，作为抗原，制备了多抗和单抗的血清，由于多抗血清的效价很低和单抗血清的专化性太狭，均难用于诊断。最近，在病原ＤＮＡ序列测定的基础上，合成了引物Ｐ１及Ｐ２，并在引物Ｐ１及Ｐ２之间合成另一段ＤＮＡ片段Ｐ３作为探针。使ＰＣＲ（多聚酶链式反应）及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术可能用于黄龙病的诊断。研究结果证明ＰＣＲ技术比其他方法具有更大优点，能快速而准确地检测出病原；而Ｑ－ＰＣＲ（竞争性定量多聚酶链式反应）方法则能测定病原在不同样品中的含量，进行定量分析。
- 田亚南柯穗柯冲
- 关键词：柑桔黄龙病电镜抗血清多聚酶链式反应
- 应用电镜与PCR技术检测琯溪蜜柚黄龙病病原被引量：32
- 2000年
- 福建省产区发生琯溪蜜柚叶片斑驳、果实变小及全株矮化的病树是柑桔黄龙病引起的。采用电镜技术与 PCR技术研究 ,证明其病原 BL O在形态、大小与构造上和柑桔黄龙病病原 (BL O)相同 ,其病原 DNA、PCR扩增及 Southern Blot分子杂交的结果 ,证明它与柑桔黄龙病病原 PCR的产物具有很高的同源性。本病具有传染性 ,能通过病梢嫁接传染给琯溪蜜柚的健苗。
- 田亚南柯穗李韬徐平东柯冲
- 关键词：GUAN溪蜜柚黄龙病电镜PCR技术
- 琯溪蜜柚黄龙病病原的克隆及序列分析被引量：5
- 2002年
- 溪蜜柚是中国大陆柚类中的优质品种。近年来 ,在福建省的产地发现溪蜜柚叶片表现斑驳的病树 ,其叶片斑驳与柑桔黄龙病的叶片病状十分相似。据实验结果证明 :该病能通过病梢嫁接传染到柚和柑桔的健苗 ;在电镜下观察到病株韧皮部寄生着大量 BL Os,其形态和构造均与柑桔黄龙病病原 (L iberobacter asiaticum)相似 ;经PCR扩增与 Southern Blot分子杂交测定 ,表明该病原 DNA PCR产物与柑桔黄龙病病原 PCR产物之间具有很高的同源性。初步认为该病很可能是柑桔黄龙病引起的。为了进一步明确该病与柑桔黄龙病的关系 ,对病原 DNA片段进行扩增、克隆和序列分析 ,并与柑桔黄龙病病原基因相应序列进行比较 ,结果表明该病原与亚洲柑桔黄龙病病原 (L.asiaticum)相应基因序列的同源率达 94 .2 % ,而与非洲柑桔黄龙病病原 (L.africanum)的同源率仅为75 .0 %。进一步证明溪蜜柚叶片斑驳是柑桔黄龙病引起的 ,其病原是 L.
- 田亚南柯穗李韬柯冲
- 关键词：黄龙病病原克隆
- 柚类果树叶片斑驳病的病原鉴定与检测被引量：2
- 1999年
- 柚类是柑桔中的一类重要品种，在我国有广泛的分布。近年来，在福建等产区发现柚类病树日趋增多，其病状为叶片斑驳、小果、植株矮化，暂称为叶片斑驳病。本病能通过组织嫁接从病柚树传染到柚健苗和芦柑健苗。在电镜下观察，其病原菌体的形态和细胞壁构造与柑桔黄龙病的病原（Ｌｉｂｅｒｏｂａｃｔｅｒａｓｉａｔｉｃｕｍ）十分相似。应用柑桔黄龙病病原ＤＮＡ的特异性引物进行ＰＣＲ试验产生的ＰＣＲ产物，其分子量与柑桔黄龙病病原ＤＮＡＰＣＲ产物的基本相同，为５６３ｂｐ．；以及应用柑桔黄龙病病原的特异性探针与其ＰＣＲ产物进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交试验，能产生杂交反应；这些都表明在柚树病原ＤＮＡ与柑桔黄龙病病原ＤＮＡ之间存在着十分高度的同源性。综上结果证明：柚类叶片斑驳的病原很可能与柑桔黄龙病病原是相同的，或其关系是十分密切的。
- 田亚南柯穗李韬徐平东徐平东
- 关键词：柚类
