王阳 作品数:4 被引量:12 H指数:3 供职机构: 上海第二医科大学 更多>> 发文基金: 上海市科学技术发展基金 国家杰出青年科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
NUP98-HOXA9融合基因转基因小鼠的建立及乙烷亚硝基脲诱变的研究 被引量:4 2004年 目的从整体动物水平阐明NUP98 HOXA9融合蛋白在白血病发病机制中的作用。方法采用分子克隆技术构建含有NUP98 HOXA9的转基因质粒 ,经显微注射建立含有该融合基因的转基因小鼠 ,并对其细胞表型进行分析 ;采用PCR、RT PCR等技术进行转基因整合和表达检测 ;对表型正常的转基因小鼠用乙烷亚硝基脲 (ENU)诱变 ,观察转基因小鼠的表型变化。结果 5个单系的转基因小鼠在骨髓细胞中检出NUP98 HOXA9融合基因的稳定表达 ,但血常规、骨髓象及肝、脾等未见异常改变。ENU诱变后部分转基因阳性小鼠出现类似人类慢性髓系白血病的表现。结论NUP98 HOXA9融合基因产物能在转基因小鼠中表达 ,但不足以诱发白血病 ; 陆顺元 顾鸣敏 王阳 谭轶 孙岳平 王龙 孔辉 陆振虞 王铸钢关键词:转基因小鼠 染色体畸变 白血病 NUP98-PMX1转基因小鼠发生髓系白血病样表型 2004年 目的 在整体动物水平研究NUP98 PMX1融合蛋白的致白血病作用。方法 采用分子克隆技术构建含有NUP98 PMX1的转基因质粒 ,显微注射法建立转NUP98 PMX1基因的小鼠 ,以PCR、RT PCR方法检测融合基因的表达 ;用流式细胞仪检测骨髓细胞表型。结果 转染NUP98 PMX1融合基因的NIH3T3细胞生长加快 ,软琼脂上可形成集落 ,并使裸鼠致瘤。出现病态的 8只NUP98 PMX1转基因小鼠中有 4只发生粒细胞白血病样表型 ,其中 3只表现为人类慢性髓系白血病样表型。结论 NUP98 PMX1融合基因具有致瘤性 ,其表达在髓系白血病的发生中起着极为重要的作用。 王阳 顾鸣敏 谭轶 陆顺元 王龙 孔辉 孙岳平 陆振虞 陈赛娟 王振义 王铸钢关键词:髓系白血病 CML 骨髓细胞 HRX-EEN融合基因转基因小鼠的建立 被引量:3 2003年 目的 建立 HRX- EEN融合基因转基因小鼠为新药的筛选提供理想的动物模型。 方法 通过拼接 ,用 3个不同来源的 DNA构建成 HRX- EEN融合基因 ,并将其装入 h CG转基因载体中 ;通过显微注射将上述 DNA导入受精卵雄核中 ,植入养育母鼠输卵管 ,发育获得 G0 代小鼠 ;PCR检测融合基因的整合 ,逆转录 -聚合酶链反应 (reverse transcription- polymerase chain reaction,RT- PCR)检测融合基因的表达。结果 测序证实拼接的 HRX- EEN融合基因正确 ;PCR共检测出 7个 HRX- EEN转基因阳性的 G0 代小鼠 ,将这些小鼠与野生型的 C5 7系小鼠交配 ,结果除 35号死亡外 ,其余 G0 代转基因阳性小鼠均产下 F1代 ,建成 6个单系的 HRX- EEN转基因小鼠。用 RT- PCR方法检测其中 5个系小鼠 HRX- EEN融合基因的表达状况 ,证实该融合基因在 3个单系中稳定表达。表达融合基因的转基因小鼠迄今未发现明显异常。 结论 构建完成的 HRX- EEN转基因小鼠模型能稳定表达。 孙岳平 熊慧 王阳 王龙 黄秋花 张庆华 孔辉 张丽君 陈赛娟 陈竺 王铸钢 陆振虞关键词:转基因小鼠 动物模型 细胞遗传学 染色体易位 NUP98基因融合的研究进展 被引量:5 2003年 基因融合是白血病发生的重要原因之一 ,其中涉及多种不同的基因 ,产生多种不同的致癌效应。 NU P98是一种主要参与调节核内外蛋白质和 RNA转运的基因 ,其野生型不具有致癌能力。但当 NU P98与伴侣基因发生融合后 ,其产物具有恶性转化能力 ,目前已发现这类伴侣基因有 13种。本文主要综述 NU P98的生物学特征、NU 顾鸣敏 王阳 陆振虞 王铸钢关键词:白血病 基因融合