王永琦
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：海南医学院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Castleman病1例报告
- 2004年
- 何冬雷王永琦
- 关键词：CASTLEMAN病甲状腺肿物手术切除
- 模块化腹腔镜操作模式在远端胃癌根治术中的应用被引量：3
- 2018年
- 目的探讨模块化腹腔镜操作模式在远端胃癌根治术中的应用效果。方法回顾性分析2013年1月至2016年12月在海南医学院第一附属医院胃肠肿瘤外科行腹腔镜辅助下远端胃癌根治术的101例患者的临床资料,总结腹腔镜在远端胃癌根治术的模块化手术操作模式,并对其效果进行评价。结果本组101例患者中共97例成功按照六大模块化步骤完成了腹腔镜辅助下远端胃癌根治术,4例因过于肥胖、暴露困难而中转开腹。其余患者平均手术时间为(297.54±65.57)min、出血量为(185.00±23.00)m L、术中清扫淋巴结为(22±15)枚,术后胃肠道功能恢复时间为(3.90±1.52)d、术后住院时间为(8.30±3.12)d。结论六大模块化手术操作模式有利于手术者规范化完成腹腔镜远端胃癌根治术的手术操作及淋巴结清扫,简化了手术步骤,提高了手术效率及手术质量。
- 谢小明何冬雷许荣华孟津王永琦陈勇李红海
- 关键词：腹腔镜远端胃癌根治术模块化
- miR-650靶向PRDX2调控幽门螺旋杆菌对胃癌细胞氧化应激的机制研究被引量：6
- 2023年
- 背景与目的:幽门螺旋杆菌(HP)在人类胃部的定植是引起胃癌发生较明确的危险因素,且研究发现,HP感染后胃癌细胞的氧化应激水平有明显改变,但机制尚未明确。因此,本研究探讨HP引起胃癌细胞氧化应激的潜在机制和作用。方法:用HP感染胃癌细胞SNU-1后,分别用DCF-DA荧光法和CCK-8法检测的活性氧(ROS)水平和增殖能力的变化;用高通量测序和siRNA筛选鉴定HP感染后引起SNU-1细胞氧化应激增强的关键基因,随后通过miRDB在线分析和荧光素酶报告系统鉴定引起胃癌细胞SNU-1氧化应激的关键上游miRNA,同时结合功能获得与功能缺失实验验证。结果:SNU-1细胞感染HP后,ROS水平升高,增殖能力增强,但同时使用氧化应激抑制剂乙酰半胱氨酸处理,SNU-1细胞的以上变化被取消(均P>0.05)。siRNA筛选结果发现,敲低过氧化氢酶2(PRDX2)时HP感染的SNU-1细胞ROS水平升高,增殖能力增强,而过表达PRDX2后则相反(均P<0.05),同时Western blot验证显示,HP感染后SNU-1细胞中PRDX2的表达下调。HP感染后,SNU-1细胞中PRDX2的启动子活性没有变化(P>0.05),但PRDX2的mRNA水平下降(P<0.05)。分析结果显示,HP感染的SNU-1细胞中miR-650的表达水平上升(P<0.05),且miR-650靶向PRDX2 mRNA的3’端非编码区。验证结果显示,SNU-1细胞过表达miR-650后,PRDX2的表达下调、ROS水平升高、增殖能力增强,敲低miR-650后则呈反向变化(均P<0.05);HP感染的SNU-1细胞同时敲低miR-650或同时过表达PRDX2,细胞的增殖能力无明显变化(均P>0.05)。结论:HP感染增加胃癌细胞氧化应激水平的机制和作用可能是其上调miR-650的表达,后者靶向PRDX2 mRNA的3’端非编码区抑制PRDX2 mRNA与蛋白表达,导致ROS水平升高,从而促进胃癌细胞的增殖。
- 王永琦何冬雷梁月祥刘丽杰
- 关键词：氧化性应激微RNAS
- 上调Numb通过调控铁死亡途径增加胃癌细胞化疗敏感性的机制研究
- 2024年
- 目的探究在胃癌细胞中上调细胞命运决定子Numb对胃癌细胞化疗敏感性的影响及其作用机制。方法通过脂质体转染技术将pcDNA3.1空质粒、pcDNA3.1-Numb质粒分别转染至胃癌细胞系BGC-823中,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹检测转染后细胞中Numb表达变化,采用不同浓度的多柔比星(doxorubicin,ADM)处理转染后的BGC-823细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率。将BGC-823细胞分为对照组、NC组、Numb组、Numb+铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1)组,MTT法检测各组细胞增殖抑制率,DCFH-DA荧光探针法检测各组细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,试剂盒检测各组细胞谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,铁离子检测试剂盒测定各组细胞内铁离子浓度,RT-qPCR和蛋白质印迹法检测各组细胞中铁死亡相关途径因子P53、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)和溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)表达水平。结果与对照组、NC组比较,Numb组细胞中Numb mRNA和蛋白相对表达量均显著上调(P<0.05),在不同浓度ADM处理下的细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05)。使用Fer-1干预并进行分组处理后,与对照组、NC组比较,Numb组细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),细胞中ROS水平、MDA含量显著增加(P<0.05),GSH含量显著减少(P<0.05),SOD活性显著降低(P<0.05),Fe^(2+)浓度显著升高(P<0.05),P53 mRNA和蛋白相对表达量显著上调(P<0.05),GPX4、SLC7A11的mRNA和蛋白相对表达量显著下调(P<0.05);与Numb组比较,Numb+Fer-1组BGC-823细胞增殖抑制率显著降低(P<0.05),细胞中ROS水平和MDA含量显著减少(P<0.05),GSH含量显著增加、SOD活性显著升高(P<0.05),同时细胞内Fe^(2+)浓度显著降低(P<0.05),P53 mRNA和蛋白相对表达量显著下调(P<0.05),而GPX4、SLC7A11的mRNA和蛋白相对表达量显著上调(P<0.05)。结论上调Numb能
- 王永琦李强何冬雷陈勇刘丽杰
- 关键词：胃癌化疗敏感性NUMB
- PAD4介导H3cit促结肠癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化的机制研究
- 2024年
- 目的 探究肽基精氨酸脱亚胺酶4(PAD4)介导的瓜氨酸化组蛋白H3(H3cit)在结肠癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化中的作用及其相关机制。方法 收集我院30例结肠癌患者的血清和30例健康受试者的血清,ELISA检测血清中PAD4和H3cit水平,并分析两者相关性。将oe-NC、过表达PAD4(oe-PAD4)和sh-NC、sh-NLRP3载体转染至人结肠癌SW480细胞中,并设为oe-NC组、oe-PAD4组、oe-PAD4+sh-NC组、oe-PAD4+sh-NLRP3组。采用qRT-PCR检测PAD4、NLRP3、IL-1β、IL-18基因表达水平;Western blot检测PAD4、H3cit、NLRP3、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达;CCK-8检测细胞增殖水平;Transwell检测细胞侵袭水平;ChIP-qPCR检测H3cit在NLRP3转录起始位点(TSS)的富集水平。结果 与健康受试者比较,结肠癌患者血清中PAD4和H3cit水平均升高,且两者呈正相关(P<0.05)。与oe-NC组比较,oe-PAD4组PAD4、NLRP3、IL-1β、IL-18基因表达水平升高,PAD4、H3cit、NLRP3、N-cadherin蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低,细胞增殖、侵袭水平升高,H3cit在NLRP3 TSS区富集增加(P<0.05);与oe-PAD4+sh-NC组比较,oe-PAD4+sh-NLRP3组NLRP3、IL-1β、IL-18基因表达水平降低,NLRP3和N-cadherin蛋白表达降低,E-cadherin蛋白表达升高,细胞增殖、侵袭水平降低(P<0.05)。结论 结肠癌患者体内PAD4和H3cit水平升高,PAD4介导的H3cit通过转录调控NLRP3的表达,促进结肠癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化。
- 王永琦刘丽杰何冬雷陈勇
- 关键词：结肠癌转录调控
