王明霞
- 作品数：13 被引量：24H指数：4
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- Sonic Hedgehog信号通路对内皮细胞凋亡影响的初步研究被引量：1
- 2013年
- 目的初步探讨类风湿关节炎（RA）滑膜组织血管内皮细胞Smo蛋白的表达，并观察肿瘤坏死因子（TNF）-α作用于人脐静脉内皮细胞系EA．hy926细胞后SonicHedgehog（Shh）信号通路相关分子的表达，及特异性抑制Smo对细胞凋亡的影响。方法收集4例病情中度活动的RA患者的滑膜组织，同时收集4例外伤或半月板损伤（无关节炎）者滑膜组织作为对照组，免疫组织化学法检测滑膜组织血管内皮细胞Smo蛋白表达情况。予不同浓度TNF-α或联合不同浓度环巴胺处理EA．hy926细胞，实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测Shh、Ptchl、Smo、GlilmRNA表达。予不同浓度环巴胺处理EA．hy926细胞，加入TNF-α＋放线菌素D（ActD）诱导细胞凋亡，采用细胞增殖与毒性试剂盒（CCK-8）检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡情况。两样本均数比较采用t检验，多个样本均数比较采用单因素方差分析。结果RA患者滑膜血管内皮细胞Smo阳性表达率为（81±23）％，高于对照组阳性表达率（20±17）％（P〈0．05）。EA．hy926细胞经TNF-α刺激后，Shh、SmomRNA表达上调（P〈0．05），PtchlmRNA表达无明显变化（P〉0．05），GlilmRNA表达下调（P（0．05）。TNF．n与环巴胺共同作用后，Shh、Smo和GlilmRNA表达下调（P〈O．05）。不同浓度环巴胺（分别为2,4、8μmol／L）作用后的细胞存活率分别为（57±6）％、（44±8）％、（32±5）％，低于TNF-α ActD组细胞存活率（64±6）％（P〈0．05），细胞凋亡率分别为（12．4±3．3）％、（14．5±2．7）％、（15．7±2．4）％，高于TNF-αActD组细胞凋亡率（7．1±1．3）％（P〈0．05）。结论Shh信号通路在RA患者滑膜组织血管内皮细胞中存在激活。特异性抑制Shh信号通路，可以促进内皮细胞凋亡。Shh信号通路可能参与TNF-α作用于内皮细胞后的抗凋亡调控机制。
- 朱尚玲黄建林王明霞彭蔚湘林灼锋古洁若
- 关键词：内皮细胞细胞凋亡HEDGEHOG通路
- 类风湿关节炎患者骨质疏松及其相关因素的初步调查被引量：8
- 2011年
- 目的探讨类风湿关节炎(RA)患者中骨质疏松(OP)的发生情况及其相关危险因素。方法采用GE Insight/Achilles express高频率声波(超声波)检测右跟骨的骨质状态,测量90例RA患者和80名年龄、性别基本匹配的健康志愿者的跟骨骨密度(BMD),按WHO确定的诊断标准将RA患者和正常受试者各分为3组,即骨量正常、骨量减少和骨质疏松组。采用问卷形式调查患者的性别、年龄、体重、身高、吸烟史、钙剂摄入、骨折家族史、RA病程及糖皮质激素应用等因素,分析其与OP的相关风险。结果 RA患者骨量正常、骨量减少和骨质疏松组的构成比与对照组相比较差异有统计学意义(P<0.05)。提示RA患者中发生OP的概率较对照组发生更大。在年龄、性别无明显差异的情况下,RA病程、吸烟、激素、骨折家族史是增加OP的危险因素。多因素Logistic分析得到的回归模型:RA伴发骨质疏松=-0.530+0.164×病程+3.304×吸烟+1.783×骨折家族史。结论 RA患者较健康志愿者更易发生骨量减少和骨质疏松。RA患者BMD的降低和OP的发生是多因素的,其中RA病程是RA患者发生OP的独立危险因素,早期诊断与治疗对预防RA患者发生OP具有重要意义。
- 王明霞黄建林罗敏琪巫世瑶朱尚玲彭蔚湘古洁若
- 关键词：骨密度骨质疏松
- 类风湿关节炎滑膜血管内皮细胞中Smoothened的表达及其意义被引量：4
- 2013年
- 目的:初步观察Sonic Hedgehog信号通路分子Smoothened(Smo)在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜血管内皮细胞的表达及其生物学意义。方法:收集4例病情中度活动的RA患者的滑膜组织,同时收集4例外伤或半月板损伤(无关节炎)者滑膜组织作为对照组,免疫组化检测滑膜组织Smo蛋白表达情况。采用人脐静脉内皮细胞系EA.hy926作为滑膜血管内皮细胞的模型,予不同浓度肿瘤坏死因子α(TNF-α)处理,West-ern blotting检测Smo蛋白表达;采用RNAi技术转染体外合成的特异性Smo-siRNA,应用Western blotting检测沉默效果;转染siRNA 24 h后,经TNF-α/放线菌素D(actinomycin D,ActD)诱导细胞凋亡,CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:RA患者滑膜组织Smo表达高于对照组,以血管内皮细胞表达尤为明显。EA.hy926细胞经TNF-α刺激后,Smo蛋白表达上调(P<0.05)。RNA干扰EA.hy926细胞Smo表达后,细胞存活率为(24.30±0.45)%,低于阴性对照组的(36.86±0.62)%(P<0.05),细胞凋亡率为(48.00±1.96)%,高于阴性对照组的(31.70±0.82)%(P<0.05)。结论:Smo可能参与了RA患者滑膜组织血管内皮细胞凋亡的调控。
- 朱尚玲彭蔚湘罗敏琪王明霞林灼锋黄建林
- 关键词：类风湿SMOOTHENEDRNA干扰内皮细胞
- 来氟米特活性代谢产物抑制人单核细胞系细胞CD147基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶-9表达的研究
- 2011年
- 目的观察来氟米特活性代谢产物（A771726）对豆蔻佛波醇乙±（PMA）诱导的人单核细胞系（THP-1）细胞CDl47、基质金属蛋白酶（MMP）-2及MMP-9表达的影响。方法THP-1细胞悬浮生长于含10％胎牛血清的RPMI-1640培养液中，细胞密度达5±107ml时用于实验。细胞无血清化处理12h后，加入PMA和（或）不同剂量的A771726（5、15、45±g／m1），培养24h，实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞CDl47、MMP-2及MMP-9mRNA的表达，流式细胞术检测细胞表面CDl47的表达，明胶酶谱法检测细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9的活性。多个样本均数比较采用单因素方差分析或Kmskal—wallis秩和检验。结果细胞经PMA刺激后CDl47、MMP-2及MMP-9三者表达量均较与空白组有增高（P〈0．01）。A771726干预后，细胞表面CDl47平均荧光强度（MFI）有不同程度的下降，对照组MFI为109．5±3．8，A771726干预组（5、15、45μg／m1）MFl分别为73．3±2．5、64．5±2．3、40．9±2．7（P〈0．01）；不同浓度A771726干预后MMP-2、MMP-9mRNA表达量及细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9活性与对照组比较均有不同程度的下降（心0．01）。各干预组CDl47mRNA表达量与对照组比较，未见下降（P〉0．05）。结论来氟米特活性代谢产物A771726可以抑制PMA诱导的THP-1细胞CDl47、MMP-2及MMP-9的表达。
- 巫世瑶黄建林谢宝钊王明霞古洁若
- 关键词：明胶酶A明胶酶BCDL47
- 类风湿关节炎患者外周血单个核细胞Sonic Hedgehog信号通路表达的初步研究被引量：5
- 2012年
- 目的:初步探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)和滑膜组织中SonicHedge-hog(Shh)信号通路相关因子表达及意义。方法:收集符合1987年美国风湿病学会(ACR)RA分类标准、28个关节疾病活动度评分(DAS28)≥3.2,病情活动RA患者(35例)及年龄、性别相匹配的健康志愿者(35例)外周血2 mL,分离PBMCs,提取总RNA,采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测Shh信号通路中信号肽Shh、膜受体Ptch1和核转录因子Gli1 mRNA的表达。收集10例病情中度活动(DAS28≥3.2)RA患者的滑膜组织,同时收集5例外伤或半月板损伤(无关节炎)者滑膜组织作为对照组,免疫组化检测Shh、Ptch1和Gli1的蛋白表达情况。结果:RA患者PBMCs中Shh和Gli1 mRNA的相对表达量分别为1.36±1.48和1.15±0.68,对照组上述信号分子的mRNA表达量分别为0.47±0.25和0.49±0.05,2组差异有统计学意义(P<0.05),Ptch1 mRNA表达在2组间的差异无统计学意义(P>0.05);免疫组化示Shh和Gli1蛋白表达的阳性细胞百分率均高于对照组(P<0.05),Ptch1蛋白表达阳性细胞百分率2组无显著差异(P>0.05)。结论:RA患者PBMCs与滑膜组织中检测到Shh通路相关信号分子Shh和Gli1的表达上调,提示RA患者中可能存在Shh信号通路的激活,其在RA发病机制中的作用值得进一步研究。
- 王明霞黄建林朱尚玲彭蔚湘谢宝钊林灼锋古洁若
- 关键词：HEDGEHOG通路单核细胞滑膜
- A771726对经豆蔻佛波醇乙酯活化的人单核细胞系-1细胞CD147基质金属蛋白酶-2及9表达的影响
- 巫世瑶黄建林谢宝钊王明霞古洁若
- 广东汉族类风湿关节炎患者肿瘤坏死因子α启动子区单核苷酸多态性与肿瘤坏死因子α拮抗剂疗效的关系被引量：7
- 2011年
- 目的探讨广东汉族类风湿关节炎(RA)患者肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因启动子区单核苷酸多态性(SNPs)与TNF-α拮抗剂疗效的关系。方法以100例健康志愿者为对照组,以54倒RA患者为RA组。RA组中24列接受英夫利西单抗3 mg·kg^(-1),分别于wk 0、2、6给药;30例接受阿达木单抗40 mg或80 mg,每2 wk皮下注射1次,疗程12 wk,所有患者继续服用原剂量的甲氯蝶呤(MTX)。记录治疗前和治疗后wk 10(英夫利西单抗)或wk 12(阿达木单抗)的相关临床指标,疾病的活动度用28关节计数的疾病活动评分(DAS28)进行评价,DAS28的变化作为主要临床疗效指标。对TNF-α启动子区约1 300 bp的片段进行直接基因测序,分析RA患者TNF-α基因的基因型与TNF-α拮抗剂临床疗效之间的关系。结果与对照组相比,RA组SNPs位点rs1799724(-857C/T)等位基因T频率较高,差异有显著意义(P<0.05),而rs 1799964(-1031C/T)和rs 1800630(-863A/C)位点在RA组和对照组之间的基因型频率分布未发现显著差异。RA组中,rs 1799724(-857C/T)携带T等位基因的患者较携带C等位基因的患者在接受TNF-α抑制剂治疗后DAS28改善更显著(P<0.05)。结论在广东汉族人群中,TNFα的启动子区的rs 1799724.(-857C/T)可能是RA的一种遗传易感标记;携带-857T的RA患者对TNF-α拮抗剂临床治疗效果优于携带-857C者。
- 谢宝钊黄建林王明霞朱尚玲曹双燕魏秋静古洁若
- 关键词：关节炎类风湿肿瘤坏死因子Α单核苷酸肿瘤坏死因子拮抗剂
- Sonic hedgehog信号通路在成纤维样滑膜细胞中的表达及意义
- 为研究Soni ehedgehog(Shh)信号通路中信号肽Shh、下游核转录因子Gli1在类风湿关节炎(RA)患者成纤维样滑膜细胞(FLS)中的表达及其生物学意义。体外诱导RA患者和半月板损伤(无关节炎)者的成纤维样滑...
- 王明霞黄建林朱尚玲彭蔚湘谢宝钊巫世瑶古洁若
- A771726对经PMA活化的THP-1细胞MMP-2及MMP-9表达的影响
- 2011年
- 目的观察来氟米特活性代谢产物A771726对经PMA活化的THP-1细胞MMP-2及MMP-9表达的影响。方法 THP-1细胞悬浮生长于含10%胎牛血清的RPM I 1640培养液中。细胞密度达5×105.mL-1时用于实验。THP-1细胞经PMA刺激24 h(诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞)后,细胞进行无血清化处理12 h,继而加入不同剂量的A771726(5、15、45μg/mL),干预24 h。实时荧光定量PCR检测细胞MMP-2、MMP-9mRNA的表达,明胶酶谱法检测细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9的活性。结果细胞经不同浓度的A771726处理后,MMP-2、MMP-9 mRNA表达量均有下降(P<0.01)。中、高剂量的A771726(15、45μg/mL)可降低PMA活化的THP-1细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9活性(P<0.01)。结论来氟米特活性代谢产物A771726可以降低经PMA活化的THP-1细胞MMP-2及MMP-9的表达。
- 巫世瑶黄建林谢宝钊王明霞古洁若
- 关键词：A771726基质金属蛋白酶THP-1细胞
- 类风湿关节炎滑膜组织Shh的表达及其生物学意义初步探讨
- 为了解初步探讨类风湿关节炎(RA)患者滑膜组织中Shh(Sonichedgehog)信号通路信号肽Shh的表达及其生物学意义。收集符合1987年美国风湿病学会RA分类标准,5例病情中度活动(DAS28≥3.2)的RA患者...
- 王明霞朱尚玲彭蔚湘巫世瑶谢宝钊黄建林
