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15-羟基前列腺素脱氢酶基因转染对人胃癌细胞生长和迁移的影响被引量：2: 2009年; 目的:探讨含有NAD+依赖性l5-羟基前列腺素脱氢酶(NAD+-dependent 15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase,15-PGDH)的真核表达质粒(pcDNA3/15-PGDH)转染对人胃癌细胞生长和迁移的影响。方法:Real time PCR检测多种胃癌细胞株中15-PGDH的表达情况。双酶切方法鉴定15-PGDH真核表达质粒pcDNA3/15-PGDH后,应用Lipofectamine 2000将其转染入胃癌细胞SGC7901中。MTT法检测质粒转染对胃癌细胞增殖的影响,划痕实验观察质粒转染对胃癌细胞迁移的影响,软琼脂克隆形成实验观察质粒转染对胃癌细胞克隆形成的影响。结果:SGC7901细胞中15-PGDH表达显著偏低。pcDNA3/15-PGDH质粒转染入SGC7901细胞的效率较高,转染后24 h及48 h时pcDNA3/15-PGDH组的15-PGDH mRNA表达量分别是pcDNA3空质粒组的188倍和271倍。pcDNA3/15-PGDH质粒转染后SGC7901细胞增殖、迁移和克隆形成能力均显著低于空质粒组和未转染组(P<0.05)。结论:15-PGDH基因转染可显著抑制人胃癌SGC7901细胞的增殖、迁移和克隆形成能力,推测15-PGDH可能是抑制胃癌发生、发展的重要因素之一。; 申玉翠张庆华叶赛杨燕青王弢靖大道; 关键词：胃肿瘤转染细胞运动

稳定转染15-PGDH基因对人胃癌细胞生长和迁移的影响: 2009年; 背景：前期研究表明胃癌组织中NAD＋依赖性15-羟基前列腺素脱氢酶（15-PGDH）表达明显减低，瞬时转染15-PGDH对人胃癌细胞的生长和迁移有一定抑制作用。目的：建立稳定转染15-PGDH基因的人胃癌细胞株SGC7901．观察恢复15-PGDH表达对胃癌细胞生长和迁移的影响，探讨15-PGDH与胃癌发生、发展的关系。方法：以双酶切和质粒测序鉴定真核表达质粒pcDNA3／15-PGDH，采用脂质体法将质粒转染人SGC7901细胞，G418筛选稳定转染株．实时聚合酶链反应（PCR）和蛋白质印迹法鉴定。分别以甲基噻唑基四唑（MTT）实验和细胞划痕实验检测稳定转染15-PGDH基因的SGC7901细胞株的增殖情况和迁移能力。结果：经4周G418筛选以及实时PCR和蛋白质印迹法鉴定，得到4株可稳定、较高水平表达15-PGDH的SGC7901细胞株。稳定转染15-PGDH基因的SGC7901细胞株．细胞生长和迁移能力显著低于空质粒组（P〈0．01）。结论：成功建立了稳定转染15-PGDH基因的SGC7901细胞株．恢复15-PGDH表达可显著抑制人胃癌细胞的生长和迁移。15-PGDH表达减低或缺失与胃癌的发生、发展密切相关。; 申玉翠靖大道叶赛王弢张庆华; 关键词：胃肿瘤转染细胞增殖细胞迁移

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王弢