王守春
- 作品数：15 被引量：71H指数：5
- 供职机构：青岛农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 禽腺病毒-Ⅰ群PCR-RFLP分型方法的建立被引量：1
- 2019年
- 为快速确定临床禽腺病毒-Ⅰ群(FAdVs)的血清型,本研究根据FAdVs的Hexon基因设计引物,对12个血清型FAdVs标准毒株进行PCR扩增,并根据扩增目的片段进行酶切位点分析和相应酶切反应研究,建立聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法。结果显示,利用该引物可同时扩增12个血清型FAdVs标准毒株,扩增片段大小为894 bp;扩增片段酶切位点分析显示,Eco130Ⅰ、Pf123Ⅱ、MluⅠ、PsyⅠ和BgⅡ为主要酶切位点,这5种酶切反应结果显示12个血清型FAdVs标准毒株可以得到不同的酶切图谱,且能区分12种血清型FAdVs;应用该酶切方法对本实验室保存的2株已知血清型的分离株进行分析,其结果与已确定的血清型一致。表明本试验建立的PCR-RFLP方法简便、特异性和区分度好,可用于12个血清型FAdVs的分型。
- 江之瑶王守春栾庆东尹燕博王建琳
- 关键词：PCR-RFLP限制性内切酶HEXON
- 不同致病性H9N2亚型禽流感病毒诱导鸡TLR-7和Mx表达的研究
- 本试验研究不同致病性H9N2 亚型禽流感病毒诱导SPF 鸡、SPF 鸡胚和鸡胚成纤维细胞中TLR-7 和Mx 表达的动态变化,为不同致病性H9N2 亚型禽流感病毒诱导IFN-I 产生差异的机制提供依据.150 只6 周龄...
- 王建琳曹志伟王冬冬王守春尹燕博
- 63株H9N2亚型禽流感病毒NA基因序列分析
- NA是AIV表面的主要糖蛋白之一,也是其主要表面抗原之一,NA诱导产生的抗体能提供保护作用。NA蛋白的主要作用是裂解血凝素与细胞表面唾液酸的连接,使病毒与细胞分离,在病毒出芽时防止病毒粒子聚集。针对NA酶活性的抑制剂在治...
- 王守春尹燕博王晓红李海英张毅郭妍妍
- 文献传递
- 我国Ⅰ群禽腺病毒主要流行血清型hexon蛋白序列分析及抗原表位预测被引量：7
- 2018年
- 为了解我国Ⅰ群禽腺病毒(FAdV-Ⅰ)主要流行血清型hexon蛋白序列和抗原表位的差异,对43株FAdV-Ⅰ分离株的hexon进行了序列和遗传进化分析,利用DNAStar中Protean预测了4个流行血清型代表株hexon蛋白的抗原表位。结果显示:同型分离株间hexon氨基酸序列同源性高,其中FAdV-4分离株的氨基酸序列同源性为100%。hexon蛋白氨基酸序列在第132～289位、第363～507位和第793～878位存在3个主要可变区,分别对应于hexon的L1、L2和L4区。在FAdV-11中,分离株QDPD100808和YTLY081010氨基酸序列在第97-138位区段发生缺失,分离株HNQX120913在第693-720位突变为HVQEHERALRHVHQLARERPVASTQPVS。预测到FAdV-4、FAdV-8a、FAdV-8b和FAdV-11的代表株hexon蛋白分别有40、37、38和37个抗原表位,FAdV-4的特异性抗原表位最多,为16个,FAdV-8a、FAdV-8b和FAdV-11特异性抗原表位较少,分别为3个、6个和3个。研究结果为我国FAdV-Ⅰ主要流行血清型基于hexon基因的诊断提供了理论依据。
- 邹开宇高倩文江之瑶孙举王守春徐守振尹燕博
- 关键词：HEXON遗传进化抗原表位
- 63株H9N2亚型禽流感病毒NA基因序列分析
- 为了从分子水平上掌握我国H9N2亚型禽流感病毒NA基因变异情况和流行规律，作者汇集了我国部分省市的63株H9N2亚型禽流感毒株，采用RT-PCR技术对其NA基因进行扩增、克隆和测序，并对所得序列进行同源性和进化分析。结果...
- 王守春尹燕博王晓红李海英王建林张毅郭妍妍
- 关键词：禽流感神经氨酸酶遗传进化分析
- I群禽腺病毒12个血清型毒株Hexon蛋白全基因序列测定和酶切位点分析
- (目的)I群禽腺病毒的不同血清型对禽类的致病性各有不同，快速准确区分I群禽腺病毒的同血清型对临床诊断和治疗有十分重要的意义。为了对I群禽腺病毒12个血清型进行分型，本试验对12个血清型毒株进行了Hexon全基因序列测定和...
- 李海英尹燕博徐守振王建琳王晓红王守春
- 关键词：PCR-RFLP
- 两株不同致病力H9N2亚型禽流感病毒全基因组序列分析被引量：5
- 2015年
- 为了找到H9N2亚型禽流感病毒毒株致病力增强的分子线索,对致病力存在明显差异的2株H9N2亚型禽流感病毒进行了全基因组序列测定和分析。遗传进化分析表明,2株H9N2亚型禽流感病毒发生了基因重配,内部基因来源具有多样性。氨基酸序列分析表明,强致病力毒株A/chicken/Shandong/818/2010和A/chicken/Shandong/196/2011在HA受体结合位点、NA唾液酸结合位点和潜在糖基化位点处存在显著差异,SD/818在PA蛋白55位氨基酸和336位氨基酸等重要功能位点处出现了与致病力增强有关的突变,这种致病力增强的分子机制需要进一步探究。
- 刘琳琳张毅郭学金范丹丹朱梅胜王守春徐守振王建琳毕玉海尹燕博
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒致病力全基因遗传进化
- 2007年～2010年H9N2亚型禽流感病毒分离株对SPF鸡的致病特性研究被引量：5
- 2013年
- 本研究对2007年～2010年我国H9N2亚型禽流感病毒分离株的鸡胚平均死亡时间(MDT)进行分析,发现自2008年下半年来分离的H9N2亚型禽流感病毒对鸡胚的致病性有增强的趋势,在此基础上,选择MDT在60.5～96.3h之间的9株病毒,比较其对SPF鸡的致病力。结果表明,对鸡胚致病性强的毒株,对SPF鸡的致病性也较强,能引起气管、肺、十二指肠、肾和脑等多器官的系统性感染,而且病毒在各组织器官的复制能力与致病性呈正相关。在感染SPF鸡后,所有毒株均呈现不同程度的排毒,而致病力较强毒株的感染组,排毒的比例更高,排毒时间也更长。这些数据表明,H9N2病毒在进化过程中,致病力发生了一定的变化,新近出现了一些对鸡致病力增强的毒株,这提示我们必须重视对H9N2病毒进化和变异的监测,加强对H9N2病毒的防控。
- 王守春张毅卢春晓王晓红徐守振王建琳李海英周顺王光郭妍妍毕玉海尹燕博
- 关键词：H9N2亚型禽流感SPF鸡
- 12株肉仔鸡包涵体肝炎病毒的分离和PCR鉴定被引量：27
- 2010年
- 从临床疑似肉仔鸡包涵体肝炎病例的肝组织中,通过SPF鸡胚连续传代和鸡胚肾细胞培养,分离到12株疑似肉仔鸡包涵体肝炎病毒毒株。通过形态学、致细胞病变和PCR检测等对12株疑似肉仔鸡包涵体肝炎病毒分离物进行了鉴定。结果显示,该病毒为球形、无囊膜、二十面体对称,直径70～80nm;接种鸡胚后鸡胚肝在不同时期表现不同程度的病变;在鸡胚肾细胞(CEK)上可致细胞病变。根据Ⅰ群禽腺病毒CELO株的Hexon保守区基因序列,设计合成了1对引物。用这对引物对12株病毒的核酸模板进行了PCR扩增,结果均特异性地扩增出了与设计片段大小相一致的508bp片段,序列分析表明,分离株确为Ⅰ群禽腺病毒。从病毒形态,鸡胚及细胞病变以及PCR检测结果,证明12株分离物确为肉仔鸡包涵体肝炎病毒。建立的鸡包涵体肝炎快速PCR诊断方法可用于鸡包涵体肝炎的临床快速诊断。
- 李海英尹燕博郭妍妍胡永钢许宏伟王晓红王守春
- 关键词：聚合酶链反应
- 1998年～2012年鸡源H9N2亚型禽流感病毒NS基因的分子演化规律分析
- 2013年
- 本研究对1998年～2012年分离自我国的32株H9N2亚型禽流感病毒的NS基因进行了克隆和序列测定,并对这些序列进行了系统分析。进化分析表明,在我国流行的H9N2亚型禽流感病毒的NS基因主要属于等位基因A群的BJ/94分支,而属于G1分支的毒株很少被分离到;我国H9N2流行株不断演化出新的亚分支,2000年之前的毒株主要属于Y280亚分支,2007年之后F/98亚分支的毒株逐渐演化为优势谱系。对毒株氨基酸序列的分析表明,部分H9N2亚型禽流感病毒的NS蛋白具有高致病性毒株的分子特征。
- 郭学金张毅王守春毕玉海郭妍妍刘琳琳尹燕博
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒NS基因分子特征
