王光华
- 作品数：94 被引量：218H指数：7
- 供职机构：青海大学畜牧兽医科学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家绒毛用羊产业技术体系建设专项青海省省校合作项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 羊衣原体的分离鉴定及PCR诊断方法的建立被引量：4
- 2013年
- 为了研究青海省乌兰县牧户母羊流产的病因,试验采用临床症状观察、显微镜观察、鸡胚培养和PCR检测等方法对病原进行了鉴定,并建立衣原体PCR诊断方法对病原体进行了敏感性和稳定性检测。结果表明:引起母羊流产的病原为羊流产嗜性衣原体。说明建立的PCR方法能够对羊衣原体病原作出正确的检测,可用于羊衣原体病的实验室诊断。
- 王光华叶成玉周继章陆艳马利青
- 青海湖一株野鸟源H5N1亚型禽流感病毒核酸检测及其基因组序列特性分析
- 2023年
- 2022年8月,青海省刚察县野鸭出现异常死亡。采集死亡野鸭的组织提取核酸,经禽流感病毒(AIV)M基因引物初步鉴定定样品中含有AIV,随后H5/H7/H9分型引物鉴定。进一步二代测序后获得了AIV的8片段基因序列。序列比对分析表明,除了NS基因,其余基因与以往报道或H5亚型AIV标准毒株的内部基因同源性较高,HA基因裂解位点具有高致病性(HPAI)AIV的特征,故将感染野鸭的毒株命名为A/Wigeon/Qinghai/2022(H5N1)。从HA基因的遗传进化分析中发现,A/Wigeon/Qinghai/2022(H5N1)与最近几年在野鸟中流行的H5N1和H5N8同在2.3.4.4b分支,而与2005—2015年在青海湖地区流行的毒株遗传距离较远,表明青海湖野鸟源H5亚型AIV遗传多样性丰富,需要持续对该地区野鸟中携带的AIV进行监测。
- 田野崔明仙颜焰简莹娜王光华王戈平李秀萍胡勇廖敏马利青
- 关键词：野鸟H5N1
- 牛病毒性腹泻病毒牦牛分离株E0基因的克隆表达
- 2012年
- 将青海牦牛牛病毒性腹泻病毒(BVDV)青海泽库(QHZK)株的E0基因亚克隆入原核表达载体pET-32(a),构建了重组表达载体pET-32(a)-E0,然后用重组质粒转化Rosetta(DE3)感受态细胞,并利用IPTG诱导蛋白表达。表达的蛋白用His-Band镍柱进行亲合层析纯化,Western blot鉴定表达蛋白。结果显示,E0基因可在大肠埃希菌中获得表达,表达产物的分子质量约为44ku,与预期的蛋白分子质量大小一致;Western blot分析表明,该蛋白可以与BVDV标准阳性血清产生特异性结合反应。
- 叶成玉王光华蔡其刚王戈平陆艳张芳芳马利青周继章
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒E0基因原核表达抗原性
- 青海省玉树州称多县绵羊流产类疾病血清学检测被引量：1
- 2015年
- 应用虎红平板凝集试验(Rose-Bengal Plate Agglutination Test,RBPT)和间接血凝试验(Indirect Hemagglutination Assay,IHA),对采自青海省玉树州称多县部分乡镇的204份绵羊血清样品进行了布鲁氏菌、衣原体、弓形虫和绵羊肺炎支原体的血清学抗体检测。结果:在所有被检血清样品中,未检出布病、衣原体阳性血清;检出弓形虫阳性血清5份,阳性率2.45%;检出绵羊肺炎支原体阳性血清1份,阳性率为0.49%。此外,对于抗体阳性的血清采用PCR方法进行抗原检测,结果表明称多地区绵羊中存在弓形虫和绵羊肺炎支原体感染。
- 蔡旺陈林李秀萍王光华马利青
- 关键词：绵羊布鲁氏菌衣原体弓形虫传染性胸膜肺炎
- 青海省河南县欧拉型藏羊流产类疾病血清学检测被引量：2
- 2015年
- 应用虎红平板凝集试验(Rose-Bengal Plate Agglutination Test,RBPT)、衣原体、弓形虫和绵羊肺炎支原体间接血凝试验(Indirect Hemagglutination Assay,IHA),对采自青海省河南县部分乡的200份欧拉型藏羊血清样品进行了布鲁氏菌、衣原体、弓形虫和绵羊肺炎支原体的血清学抗体检测。结果:在所有被检血清样品中检测出弓形虫抗体阳性血清数12份,阳性率为6.0%;绵羊肺炎支原体血清抗体阳性数为1份,阳性率为0.5%,未检出布鲁氏菌和衣原体抗体阳性血清。此外,对于抗体阳性的血清采用PCR方法进行了抗原检测,结果表明青海省河南县地区欧拉型藏羊中存在弓形虫和绵羊肺炎支原体感染。
- 王晓燕李秀萍才让南杰王戈平王光华马利青
- 关键词：布鲁氏菌衣原体弓形虫传染性胸膜肺炎
- 羊传染性脓疱诊断方法的建立被引量：1
- 2012年
- 利用MDBK细胞从青海某养殖户发病羊唇部痂皮中分离获得一株病毒,通过临床症状、PCR检测以及组织病理学观察等方法对该株病毒进行了鉴定,证实分离株为羊传染性脓疱病毒(Orf Virus,ORFV),命名为ORFV-QHMH01。参照GenBank中ORFV F1L基因的核苷酸序列,设计合成一对特异性引物,对ORFV-QHMH01株F1L基因进行了克隆、测序,并推导出其氨基酸序列。序列分析表明,分离株F1L基因片段长987bp,编码328个氨基酸,与AF097215、AY040081、AY040082、AY040083、AY040084、AY040085、FJ808075、HM133903、HQ221964、JQ271535株的核苷酸序列同源性分别为:96.7%,95.6%,96.1%,96.2%,97.5%,97.2%,96.5%,48.6%,95.3%,98.3%。系统发育进化树结果表明,ORFV-QHMH01分离株与参考毒株JQ271535和AY040084的亲缘关系较近,这表明不同地区分离株的F1L基因具有较好的保守性。
- 王光华陆艳王戈平蔡其刚李秀萍叶成玉马利青
- 关键词：羊传染性脓疱病毒
- 自然青贮玉米饲料开窖后微生物菌群的动态变化被引量：3
- 2019年
- 本试验对青海省乐都区自然青贮玉米开窖后饲料中的微生物进行了检测,本试验是从开窖开始至当年青贮玉米饲料饲喂结束共计285d。检测结果表明:青贮玉米饲料在开窖后的100d内pH值≤4.01,在100～255d pH值≤4.53,255～285d上升幅度较快达到4.92;在开窖后的第30d(8.67×10~5个·g^(-1))乳酸菌的数量最多,之后随着贮存时间的延长乳酸菌数量呈波浪式的波动,总体呈减少的趋势;酵母菌和霉菌的数量在开窖后的第255d(8.17×10~6个·g^(-1))最高,随着贮存时间的延长呈增加的趋势;好氧细菌的数量在开窖后的第285d(1.44×10~7个·g^(-1))最高,随着贮存时间的延长也是呈增加的趋势。
- 胡勇茹巧红李秀萍董泽生简莹娜王光华王戈平蔡其刚马利青
- 关键词：开窖微生物菌群
- 青海省海晏县犬粪样中贾第鞭毛虫的检测
- 2013年
- 从青海省海晏县采集10只牧羊犬粪样用于贾第鞭毛虫检测。所有样品经饱和盐水浓缩法和蔗糖密度梯度离心等方法处理后采用光学显微镜、免疫荧光试验(IF)和套式PCR方法进行检测。结果显示,其中1个样品为阳性(10%),PCR扩增片段长度为274bp,命名为QHGC201101株。测序结果与肠贾第鞭毛虫3VR株(HQ616609)核糖体小亚基RNA的同源性为100%,表明分离的虫种为肠贾第鞭毛虫,属于人兽共患型病原。
- 王光华蔡其刚王戈平陆艳李秀萍叶成玉牛小迎马利青Panagiotis Karanis
- 关键词：贾第鞭毛虫RRNA套式PCR
- 口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白αvβ6的分子特征被引量：1
- 2007年
- 为研究整联蛋白αvβ6在口蹄疫病毒感染中的作用,本实验从FMDV试验感染康复猪的舌皮和肺组织中克隆到了整联蛋白αv和β6亚基的基因并将新基因β6登录到GenBank中,登录号为EF432729。猪整联蛋白β6亚基基因的编码区含有2 367个核苷酸,编码788个氨基酸残基,其信号肽由26个氨基酸组成,胞外域由681个氨基酸组成,跨膜区由29个氨基酸组成,胞浆域由52个氨基酸组成。β6亚基含有9个潜在的糖基化位点,3个氨基葡聚糖结合位点,1个依赖于cGMP的蛋白激酶磷酸化位点,10个蛋白激酶C磷酸化位点,2个表皮生长因子相似结构域和2个半胱氨酸丰富区。生物学软件分析发现β6亚基和αv亚基都有头部、茎部和胞浆域组成,且二亚基形成了比较复杂的三级结构,是其发挥生物学功能的结构基础。本实验为进一步深入研究FMDV嗜性、与宿主细胞的相互作用、病毒的侵入机制等问题奠定了基础。
- 高闪电独军政常惠芸从国正邵军军林彤周建华王光华谢庆阁
- 关键词：口蹄疫病毒受体分子特征
- 不同处理方法对黄花棘豆中苦马豆素的影响被引量：3
- 2018年
- 本试验采用15种不同方法处理黄花棘豆,检测了不同处理后各组苦马豆素的含量;用处理后的样品进行小鼠饲喂试验,对部分小鼠进行了血清中α-甘露糖苷酶的测定;发现有4种处理方法对苦马豆素具有明显的降解作用,与之对应的小鼠血清中的α-甘露糖苷酶与其它组之间差异显著(P<0.05)。
- 苏忠超李秀萍王戈平蔡其刚王光华马利青
- 关键词：黄花棘豆苦马豆素
