王丽颖
- 作品数：12 被引量：46H指数：3
- 供职机构：白求恩医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：吉林省卫生厅科研基金国家自然科学基金教育部跨世纪优秀人才培养计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 成纤维细胞生长因子受体1配体精细结合位点的确定被引量：2
- 2001年
- 目的 确定人成纤维细胞生长因子受体 1(FGFR1)的配体精细结合位点。方法 合成肽文库筛选 ,定向点突变 ,原核细胞重组蛋白质表达及受体 配体结合实验。结果 采用1 2 5 I标记的酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF) ,自合成肽文库中筛选到一个五肽序列 (WGPGM) ,其序列及立体结构和FGFR1细胞外段的一个基序 (WTSPEKM)相似。为了证明FGFR1的WTSPEKM基序是结合FGF的重要结构 ,采用定向突变技术将WTSPEKM基序中的P(CCA)突变成A(GCA) ,并在原核细胞中表达了野生型和突变型FGFR1细胞外段重组蛋白质 ,受体 配体结合实验显示突变的FGFR1细胞外段结合aF GF的能力明显降低。结论 FGFR1的WTSPEKM基序是配体结合的一个重要部位。
- 王丽颖于永利Chris WTurk
- 关键词：酸性成纤维细胞生长因子
- 荧光光度法测定大豆提取液中还原型谷胱甘肽被引量：20
- 2001年
- 在Cohn的荧光分光光度法的基础上 ,不加去蛋白试剂 ,用 365nm作为激发波长 ,探讨了用荧光光度法测定大豆提取液中的还原型谷胱甘肽的方法 ,确定了最佳测定条件 .该方法用于测定大豆提取液中谷胱甘肽的含量 ,取得了满意结果 .
- 郭黎平刘国良张卓勇刘思东王丽颖
- 关键词：还原型谷胱甘肽荧光光度法
- 人重组酸性成纤维细胞生长因子在大肠杆菌中的表达及鉴定被引量：2
- 1997年
- 利用逆转录-DNA聚合酶链式反应，从体外传代培养的人肺成纤维细胞中钓出人酸性成纤维细胞生长因子（aFGF）全编码区的cDNA，将其克隆人pKK223-质粒，在大肠杆菌JM105中高效表达出人重组aFGF。此aFGF经Heparin－Sepharose纯化后，表现了很好的生物学活性。
- 王丽颖杨煜于永利
- 关键词：大肠杆菌
- 铜(Ⅱ)-新铜试剂-谷胱甘肽-乙醇体系显色反应研究被引量：16
- 2000年
- 本文研究了铜 ( ) -新铜试剂 -谷胱甘肽 -乙醇体系的显色反应 ,探讨了反应条件。试验中发现乙醇可以使吸光度增加 13.8% ,提高了显色反应的灵敏度。该方法用于测定大豆提取液中谷胱甘肽的含量 ,取得了满意结果。
- 郭黎平刘国良张卓勇刘思东王丽颖
- 关键词：谷胱甘肽光度法乙醇显色反应
- U937细胞表达成纤维细胞生长因子受体
- 1998年
- 以逆转录－ＤＮＡ聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）自Ｕ９３７细胞钓出了两条ｃＤＮＡ片段。将其克隆入ＴＡ克隆载体后进行ＤＮＡ测序。结果证明ｃＤＮＡ片段分别是人成纤维细胞生长因子受体１（ＦＧＦＲ１）的细胞外段和细胞内段ｃＤＮＡ。这一结果表明，Ｕ９３７细胞可以表达ＦＧＦＲ１ｍＲＮＡ。
- 王丽颖于永利
- 关键词：成纤维细胞受体MRNAU937细胞
- 发现2个FGFR1细胞外段同源的cDNA片段
- 2000年
- 目的 :克隆表达人成纤维细胞生长因子受体。方法 :采用RT PCR法。结果 :在钓取人cDNA的过程中 ,意外地钓取到 2个与FGFR1细胞外段同源的cDNA片段 ,经克隆和DNA序列分析发现它们是FGFR1细胞外源的cDNA片段。结论 :虽然对这 2个cDNA片段的功能尚不明确 。
- 郭京丽吴秀丽王丽颖杨贵贞
- 关键词：CDNART-PCR
- 酵母蛋白质组氨酸激酶在昆虫细胞中的表达
- 1997年
- 以ＤＮＡ聚合酶链式反应从酵母基因组ＤＮＡ中钓取编码酵母组氨酸激酶（ＹＨＫ）活性区的ＤＮＡ，将此ＤＮＡ克隆入Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ转递质粒（ｐＶＬ１３９３）。然后用ＢａｃｕｌｏＧｏｌｄＤＮＡ与重组质粒ｐＶＬ１３９３共转染昆虫细胞（ＳＦ９），在感染了重组Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ的ＳＦ９细胞中表达了ＹＨＫ活性蛋白，该蛋白在体外组氨酸激酶试验中表现出自身组氨酸残基磷酸化的活性。
- 王丽颖杨贵贞
- 关键词：酵母蛋白激酶组氨酸激酶杆状病毒
- FGFR1‘对细胞增生负调节作用的研究
- 1998年
- 首先以逆转录－ＤＮＡ聚合酶链反应从人肺成纤维细胞中钓取全长成纤维细胞生长因子受体１和成纤维细胞生长因子受体１’ｃＤＮＡ，然后分别克隆入真核细胞表达载体ｐＲＣ／ＣＭＶｒｆｍ ｏｕｇ ｋ ，ｕｑｆ ｔｇｊ
- 张伟王丽颖
- 关键词：成纤维细胞细胞增生
- 人WAF1基因的克隆及其生物调控作用被引量：2
- 2001年
- 目的 克隆人WAF1基因 ,构建成WAF1 pcDNA3真核表达质粒 ,探索WAF1基因的生物调控功能。方法 采用PT PCR和DNA直接测序方法从Hela细胞中扩增人WAF1基因 ,通过克隆到 pcDNA3真核克隆载体上 ,用脂质体法转染Hct 8细胞 ;经免疫荧光和免疫组化方法鉴定WAF1外源基因的表达活性和对Rb基因、cyclinD1基因的调控作用。结果 从Hela细胞扩增的人WAF1基因克隆至真核克隆表达载体 pcDNA3中 ,获得了人WAF1 pcDNA3重组质粒和高效表达P2 1WAF1/CIP1的Hct 8细胞株 ;证实了WAF1具有促进Rb、抑制cyclinD1蛋白表达的调控作用。结论 成功地构建了人WAF1表达质粒WAF1 pcDNA3。
- 侯治富卜丽莎王华郑德明吴晓冬王维忠王丽颖
- 关键词：基因克隆直接测序
- 人重组FGFR1在昆虫细胞膜上的表达
- 2001年
- 目的 :将人重组成纤维细胞生长因子受体 1(FGFR1)表达在昆虫细胞膜表面 ,用作筛选成纤维细胞生长因子(FGFs)拮抗肽探针。方法 :将人FGFR1cDNA克隆入昆虫病毒的转递质粒pFastBacI上 ,然后转座到昆虫病毒Bacmid上。以重组Bacmid转染昆虫细胞Sf9并表达人FGFR1,以Western印迹和ELISA对表达出的蛋白质进行鉴定。结果 :FGFR1cDNA片段2 10 0bp ,重组FGFR1表达产物分子量 78kD。ELISA结果显示 ,人重组FGFR1高效地在昆虫细胞Sf9膜表达。结论 :这个表达系统能很好地表达出人重组FGFR1,并能准确地将其定位到昆虫细胞膜的表面。
- 孙铭一万敏王丽颖周慧
- 关键词：昆虫细胞
