杨丹丹
- 作品数：9 被引量：8H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 骨髓基质细胞介导的微环境对人肝癌细胞株SMMC-7721的作用以及机制研究
- 2013年
- 目的:探讨肿瘤微环境中人骨髓基质细胞HS-5对人肝癌细胞SMMC-7721的作用及机制。方法:采用HS-5细胞条件培养基(HS-5 cell-conditioned medium,HS-5-CM)处理肝癌细胞SMMC-7721,分别通过MTT、划痕和Transwell实验分析对SMMC-7721细胞增殖、迁移和侵袭的影响;采用Transwell小室间接共培养SMMC-7721细胞与HS-5细胞,应用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)、ELISA或Western blotting分别测定SMMC-7721细胞中趋化因子CCL5及其受体CCR5的mRNA和蛋白表达;此外加入PI3K抑制剂LY294002后,通过Western blotting检测SMMC-7721细胞中PI3K-Akt通路的相关蛋白Akt及其磷酸化水平的变化,以及qRT-PCR和ELISA检测SMMC-7721细胞中CCL5的变化。结果:HS-5-CM可以促进SMMC-7721细胞增殖、迁移和侵袭;间接共培养后,SMMC-7721细胞中CCL5及CCR5 mRNA和蛋白表达均有增高;PI3K抑制剂LY294002可有效抑制共培养后SMMC-7721细胞中PI3K-Akt通路的激活,并减少其CCL5的分泌。结论:HS-5细胞可以促进SMMC-7721细胞的增殖、迁移和侵袭能力;与HS-5细胞间接共培养,激活了肝癌细胞SMMC-7721的PI3K-Akt通路,从而增加SMMC-7721细胞的CCL5分泌。
- 白慧丽李宝林何方张汝益严树涓刘晨杨丹丹施琼
- 关键词：骨髓基质细胞SMMC-7721细胞微环境
- miR-30a抑制BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2的成骨分化被引量：2
- 2013年
- 目的:确认miR-30a在BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化中的作用。方法:首先用Ad-BMP9处理间充质干细胞C3H10T1/2,通过碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒检测早期成骨指标ALP、Western blot和PCR检测晚期成骨指标OPN,茜素红S染色检测钙盐沉积了解BMP9对C3H10T1/2细胞的成骨分化作用,同时用Real-time PCR检测miR-30a在该成骨分化中的变化。然后用BMP9条件培养基分别作用Ad-mmu-miR-30a和Ad-RFP预处理10h的C3H10T1/2细胞,检测早期成骨指标ALP、晚期成骨指标钙盐沉积和骨钙素OPN的表达。最后探讨miR-30a在BMP9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化中的可能作用机制。结果:Ad-BMP9处理C3H10T1/2细胞5d,7d后,ALP的活性的表达增高;第9d后,OPN的表达增加;第14d后,钙盐的沉积明显增多。而miR-30a过表达后,抑制了这一现象。同时发现过表达miR-30a后,Runx2蛋白水平较对照组下降而mRNA水平基本没有变化。结论:miR-30a可以抑制BMP9诱导C3H10T1/2细胞的成骨分化,其作用机理可能和Runx2相关。
- 李宝林白慧丽张汝益严树涓何方杨丹丹刘晨施琼
- 关键词：成骨分化
- 我国研究生教育的改革思路被引量：2
- 2011年
- 研究生教育是学生本科毕业之后继续进行深造和学习的一种教育形式,广义上包括了硕士研究生教育和博士生教育。作为我国高等教育的重要构成要素,近些年来研究生教育得到了很大发展,作者通过对研究生教育的发展现状和教学改革思路进行分析,简要阐述了我国研究生教育的发展方向和可能前景。
- 施琼杨丹丹蒋凤兵
- 关键词：高等教育教育改革
- BMP9对骨肉瘤细胞系143B生物学行为的影响
- 骨肉瘤是最常见的恶性骨肿瘤之一。尽管治疗模式不断发展，但因其肿瘤细胞的侵袭和迁移，导致其致死率居高不下。骨形态发生蛋白(BMPs)是信号分子转录生长因子β(TGFβ)超家族的一员，之前已有研究表明，它与骨肉瘤的生物学行为...
- 杨丹丹
- 关键词：骨肉瘤肿瘤细胞腺病毒感染
- miR-450a腺病毒对体外培养小鼠早期胚胎发育的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨miR-450a腺病毒对体外培养小鼠早期胚胎发育的影响。方法取小鼠2、4、8细胞期胚胎,用含不同浓度miR-450a腺病毒(0.01、0.1、1 ng/ml)的M16培养液培养,并设不含miR-450a腺病毒的对照组。倒置显微镜观察胚胎发育情况,并计算2、4、8细胞期的胚胎发育率。结果 miR-450a腺病毒可明显抑制受精卵细胞的正常分裂,导致小鼠胚胎发育异常,且随着miR-450a腺病毒浓度的增加,胚胎发育率明显下降(P<0.05),在较高浓度miR-450a腺病毒培养过程中,有部分胚胎死亡、退化。结论 miR-450a腺病毒对体外培养的小鼠早期胚胎发育具有抑制作用,为胚胎发育异常的研究提供了新的思路。
- 杨丹丹刘晨蒋凤兵李宝林白慧丽施琼
- 关键词：腺病毒小鼠胚胎发育体外培养
- 269例儿童结核病临床分析
- 目的:分析儿童结核病的临床特征,以提高认识及诊疗水平,减少漏诊、误诊。方法:回顾性分析2019年6月至2021年5月在重庆医科大学附属儿童医院初诊为结核病的269例住院患儿临床资料,并通过多因素Logistic回归方程分...
- 杨丹丹
- 关键词：结核病儿童
- 腺病毒介导的BMP9过表达抑制人骨肉瘤细胞系143B的增殖与迁移被引量：1
- 2013年
- 目的探讨骨形态发生蛋白9(BMP9)过表达对人骨肉瘤细胞系143B的生物学行为的影响。方法用RT-PCR和Western blot检测骨肉瘤细胞系中BMP9的内源性表达,用表达BMP9的腺病毒重组体(adBMP9)感染内源性表达BMP9相对较低的骨肉瘤细胞系,Transwell法检测细胞侵袭,划痕愈合实验检测细胞迁移,MTT法和结晶紫染色法检测细胞的增殖,Hoechst 33258染色法检测凋亡,平板集落形成实验检测集落形成能力。结果 adBMP9可以明显减弱骨肉瘤细胞系143B的增殖、迁移、侵袭及集落形成能力(P<0.05),并促进细胞凋亡。结论 adBMP9能抑制人骨肉瘤细胞系143B的增殖和迁移,促进细胞凋亡。
- 杨丹丹刘晨白慧丽李宝林何方张汝益施琼
- 关键词：骨肉瘤生物学效应
- MicroRNA-450a-3p通过抑制Bub1基因的表达调控小鼠细胞增殖和胚胎发育
- 2012年
- 目的:探讨microRNA-450a-3p(miR-450a-3p)对小鼠细胞增殖和胚胎发育的调控是否通过抑制Bub1基因的表达实现。方法:用萤光素酶报告基因实验检测miR-450a-3p能否特异性结合于Bub1基因的3’-非翻译区(untranslated region,UTR);用Western blotting和实时荧光定量RT-PCR检测miR-450a-3p对Bub1蛋白和mRNA表达;分别通过MTT、Hoechst染色、流式细胞术等分析miR-450a-3p对小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)增殖、凋亡和细胞周期等生物学功能的调控;利用染色体核型分析技术检测miR-450a-3p对MEFs染色体数目的影响。结果:miR-450a-3p能与靶基因Bub1的3’-UTR结合,在翻译水平抑制MEFs中Bub1的表达,然而其转录水平的表达却不受影响。miR-450a-3p通过下调靶基因Bub1的表达,抑制MEFs的增殖,促进细胞的凋亡;而且miR-450a-3p还能使大多数细胞停滞在G1/G0期,使细胞分裂受阻,导致细胞染色体数目异常。结论:miR-450a-3p能够调控靶基因Bub1的表达,抑制MEFs增殖,并最终影响小鼠胚胎的发育。
- 刘晨杨丹丹蒋凤兵白慧丽李宝林罗敏湛晓琴施琼
- 关键词：小鼠胚胎成纤维细胞胚胎
- SDF-1/CXCR4在BMP9介导C2C12细胞成骨分化过程中的作用研究被引量：2
- 2013年
- 为了观察SDF-1/CXCR4信号轴在BMP9促C2C12细胞成骨分化过程中的作用,通过重组腺病毒过表达BMP9,检测对C2C12细胞中SDF-1及受体CXCR4 mRNA和蛋白表达水平的影响;同时利用重组腺病毒或中和抗体干扰SDF-1/CXCR4,与BMP9先后作用于C2C12细胞,通过定量测定碱性磷酸酶(ALP)、染色测定ALP表达、免疫细胞化学测定骨钙蛋白(OCN)表达、茜素红S染色测定钙盐沉积、Real-time PCR检测成骨相关转录因子Runx2和Osx的表达、Western blot检测成骨分化信号通路MAPK和Smad的变化。结果显示,BMP9能明显抑制C2C12细胞中SDF-1、CXCR4的表达(P<0.01),且具有剂量和时间依赖性;预先干扰SDF-1/CXCR4能明显影响由BMP9介导的早、中期成骨标志物ALP、OCN及早期转录因子Runx2、Osx的表达(P<0.01)和MAPK、Smad信号通路相关蛋白的变化(P<0.05);外源性SDF-1并不能影响晚期成骨标志物钙盐沉积。提示SDF-1/CXCR4信号轴在由BMP9介导的C2C12细胞成骨分化早、中期过程中发挥重要作用。
- 刘晨杨丹丹白慧丽李宝林何方张汝益严树涓施琼
- 关键词：CXCR4成骨分化C2C12细胞
