李静宜
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：河北医科大学基础医学研究所更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人SM22α在巴斯德毕赤酵母中的表达、纯化及抗体制备被引量：1
- 2006年
- 目的:用酵母表达重组人平滑肌22α(SM22α)蛋白,制备兔抗人SM22α多克隆抗体。方法:利用PCR从pGEM3z-SM22α质粒扩增得到人SM22α基因编码区,重组至pPIC9构建酵母表达载体,转染巴斯德毕赤酵母,进行分泌型表达。表达产物经分步盐析和CM-纤维素柱层析纯化后,免疫家兔,制备兔抗人SM22α多克隆抗体。结果:所构建的pPIC9-SM22α酵母表达载体转染酵母感受态细胞后,外源性SM22α可整合至酵母染色体中,经甲醇诱导84 h,可实现SM22α的高效表达与分泌。用70%硫酸铵处理上清液,收集沉淀进行离子交换层析纯化后,经变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)可见一分子量为22 kD的单一区带。用该纯化产物免疫家兔制备的兔抗人SM22α抗血清可用于检测人或大鼠血管壁中SM22α的表达水平。结论:重组人SM22α可在巴斯德毕赤酵母中进行高效表达与分泌,纯化蛋白可用于抗体制备,为研究SM22α功能提供了检测工具。
- 温进坤聂磊李静宜程云会韩梅
- 关键词：巴斯德毕赤酵母分泌表达抗血清
- 人SM22α在巴斯德毕赤酵母中的表达及抗体制备与应用研究
- 该研究利用巴斯德毕赤酵母表达系统表达人SM22α(hSM22α)蛋白,经分离纯化后用其免疫新西兰白兔,制备兔抗hSM22α多克隆抗体后,用以检测VSMC表型转化过程中SM22α的表达变化,为研究SM22α表达与VSMC分...
- 李静宜
- 关键词：血管平滑肌细胞巴斯德毕赤酵母分泌表达多克隆抗体
- 文献传递
