李超斯
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 抗A型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及抗原捕获ELISA检测方法的建立被引量：3
- 2013年
- 为建立A型口蹄疫病毒(FMDV)病原学诊断方法,本研究应用纯化的A型FMDV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选获得一株稳定分泌单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株5F7。经IFA特异性鉴定,5F7为一株血清型特异性MAb。亚类为IgG1/κ。间接ELISA检测杂交瘤细胞上清和腹水抗体效价分别为1∶12 800和1∶105。硫氰酸盐洗脱法测定其相对亲和力常数为1.5 mol/L。应用该A型特异性MAb及实验室已制备的MAb 3D9初步建立了检测A型FMDV的抗原捕获ELISA方法。该方法可以检出2.0 ng纯化FMDV和1.0×104TCID50病毒,与O型、Asia1型FMDV及牛肠道病毒、牛呼肠孤病毒、牛传染性鼻气管炎病毒等均无交叉反应,组内及组间重复性试验显示变异系数小于8%。本研究建立的抗原捕获ELISA方法为A型FMDV抗原检测提供了一种实用有效的技术手段。
- 孙静周国辉王幸李超斯魏萍于力
- 关键词：A型口蹄疫病毒单克隆抗体
- 分泌犬p27单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用
- 本发明公开了一种犬p27单克隆抗体的制备及其应用。本发明提供了一种保藏号为CGMCCNO.9457的小鼠杂交瘤细胞3G8，还提供了由保藏号为CGMCCNO.9457的小鼠杂交瘤细胞3G8产生的单克隆抗体。本发明所述的杂交...
- 刘云杨超包军姚薇李超斯童津津李情
- 文献传递
- 口蹄疫病毒非结构蛋白3B单克隆抗体(MAb)的制备及基于MAbELISA方法的初步建立被引量：2
- 2014年
- 为建立区分口蹄疫病毒(FMDV)疫苗免疫和自然感染动物的血清学鉴别检测方法,本研究采用杆状病毒表达的FMDV非结构蛋白3ABC免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,并以原核表达的FMDV非结构蛋白3B作为抗原筛选融合细胞的培养上清液,获得一株稳定分泌抗3B蛋白单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞。经间接免疫荧光鉴定其为一株抗FMDV非结构蛋白3B的特异性MAb,为IgG1/κ亚类,间接ELISA检测杂交瘤细胞上清液和腹水的抗体效价分别为1∶12 800和1∶106。硫氰酸盐洗脱法测定其相对亲和力常数为1.5 mol/L。采用该MAb作为包被抗体并特异性的结合原核表达的3B重组蛋白用于检测血清中抗FMDV的非结构蛋白抗体,初步建立了以MAb为基础的ELISA方法。其MAb包被浓度为5μg/mL,3B重组蛋白浓度为1.1μg/mL,被检血清1∶100稀释,通过检测猪血清并与3B间接ELISA和prioCHECKRNSP ELISA试剂盒进行比较,表明该方法具有更强的特异性。
- 李超斯周国辉孙静刘云于力
- 关键词：口蹄疫病毒MABELISA
- Asia1型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立被引量：5
- 2016年
- 为建立Asia1型口蹄疫(FMD)快速病原学诊断方法,本研究采用纯化的Asia1型口蹄疫病毒(FMDV)免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合并筛选到一株能够稳定分泌抗Asia l型FMDV单克隆抗体(MAb)2E10。经间接免疫荧光试验特异性鉴定,2E10为FMDV型特异型MAb。其抗体亚类为Ig G1/资,杂交瘤细胞上清和腹水抗体效价分别为1颐256和1颐104,相对亲和力常数为2.5 mol/L。在此基础上,以本实验室前期制备的MAb 2D8为包被抗体,以HRP标记的MAb 2E10为检测抗体建立了检测Asia1型FMDV抗原的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)方法。该方法针对FMDV细胞毒的最低检出量为103TCID50,对O型FMDV、A型FMDV、牛肠道病毒、牛呼肠孤病毒及牛传染性鼻气管炎病毒检测结果均为阴性。本研究建立的Asia1型FMDV DAS-ELISA方法为Asia1型FMD病原学诊断试剂盒的研发奠定了基础。
- 梁伟峰周国辉刘文铭李超斯刘云于力
- 关键词：ASIA1型口蹄疫病毒单克隆抗体双抗体夹心ELISA
