李方涛
- 作品数：7 被引量：26H指数：3
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- 用PCR法检测致肾盂肾炎大肠杆菌papA基因
- 2001年
- 目的：用PCR方法检测致肾盂肾炎大肠杆菌(UPEC)的papA基因，探索建立UPEC的鉴定方法。方法：根据已发表的F13型papA基因序列设计引物，采用PCR方法扩增700bp左右的papA基因，并与血凝试验相比较，用于不同血清型P菌毛菌株和尿源性大肠杆菌的检测。结果：7个血清型P菌毛粘附基因群的papA PCR扩增均出现阳性结果，阴性对照株均无非特异性反应。39株尿源性大肠杆菌中MRHA阳性菌株的检出率为74.4％，papA PCR扩增的阳性率为71.8％，两组结果无显著性差异(P＞0.05)。菌细胞悬液直接用于PCR检测的敏感性为3×105～3×106cfu/ml。结论：papAPCR方法用于UPEC菌株的鉴定有良好的应用前景。
- 陈锦英李方涛康宁李宝艳
- 关键词：大肠杆菌肾盂肾炎聚合酶链反应
- 肺炎克雷伯菌表面成分的免疫调节作用被引量：4
- 2001年
- 目的:观察肺炎克雷伯菌(Kp)表面成分对机体细胞免疫和体液免疫功能的影响。方法:行体外ConA淋转刺激增殖试验(MTT法)观察提取物在不同剂量下对T淋巴细胞增殖程度的影响,并用溶血空斑实验检测体液免疫功能。结果:Kp菌表面成分对T淋巴细胞的增殖呈剂量依赖性,同时可提高机体体液免疫功能。结论:Kp菌表面成分作为非特异性免疫调节剂用于感染的防治有良好的应用前景。
- 李晓霞冯津津李方涛康宁张瑛陈锦英
- 关键词：肺炎克雷伯菌免疫调节作用
- 致肾盂肾炎大肠杆菌粘附基因群DNA多态性的研究被引量：3
- 2000年
- 目的 研究临床分离的致肾盂肾炎大肠杆菌粘附基因群DNA的多态性。方法 以血凝试验 (MRHA)为基础 ,分别用编码P菌毛主体结构和尖端粘附素的基因探针 ,采用DNA杂交方法对临床分离的 95株尿源性大肠杆菌的粘附基因群进行分析。结果MRHA +++～ ++++占 37 9% (36株 ) ,++占 32 6 % (31株 ) ,MRHA阴性占 2 9 5 % (2 8株 )。菌落原位杂交和DNA斑点杂交试验在MRHA +++～ ++++,++和阴性菌株中两个探针均为阳性的分别为 91 7%、9 7%和 2 1 4% ;在MRHA ++和阴性菌株中单一探针阳性的分别为 6 4 5 %和 35 7%。同时 ,选 10株MRHA ++++大肠杆菌提取染色体DNA ,经EcoRⅠ酶切后Southern杂交进行限制性片段长度多态性分析 ,同源性DNA片段大小不一 ,杂交信号的强弱程度也不同。结论 提示致肾盂肾炎大肠杆菌pap粘附基因群的多样性。
- 陈锦英李宝艳李方涛陈贻锴
- 关键词：肾盂肾炎大肠杆菌DNA杂交多态性
- 致肾盂肾炎大肠杆菌papA基因的克隆及序列分析被引量：20
- 2000年
- 目的 对致肾盂肾炎大肠杆菌 (UPEC) 132株的papA基因进行克隆和序列分析。方法根据F13型papA基因序列设计引物 ,并在二引物 5′端加上限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ的酶切位点。采用此引物扩增 132菌株p菌毛粘附基因群的papA基因 ,扩增产物克隆入质粒 ,选取阳性重组质粒进行核苷酸序列分析。结果 UPEC132株经PCR法扩增获得约 70 0bp的papA片段 ,经克隆获得阳性重组质粒pCT2 0 ,对其进行序列分析显示papA编码 184个氨基酸多肽 ,与UPECJ96株papA相比较同源性达 98%以上 ,于 +4 3位和 +73位的错义突变对该菌毛的免疫学特性没有影响 ,保守的信号肽序列 16位出现同义突变 , 3位缺失三联体密码使 1, 3位切割三联体由ANN变为ANV。结论 pa pA信号肽序列变异可能影响其正确的切割 ,致使 132株 (Mr为 16 6× 10 3)和J96株 (Mr为 19 6× 10 3)p菌毛蛋白的相对分子质量不同。
- 陈锦英康宁李方涛
- 关键词：肾盂肾炎大肠杆菌克隆
- 致肾盂肾炎大肠杆菌粘附素血清型的研究被引量：4
- 1999年
- 研究致肾盂肾炎大肠杆菌Ｐ菌毛粘附素血清型，为该菌的临床鉴定奠定基础。方法：利用６个带有致肾盂肾炎大肠杆菌不同血清型Ｐ菌毛粘附素基因群的克隆株免疫新西兰白兔获得抗血清，经吸收后仅保留对各血清型粘附基因群的特异性。采用单价和多价抗血清建立了全菌ＥＬＩＳＡ方法，用于９５株尿源性大肠杆菌的研究，并与血凝试验进行比较。结果：９５株受检菌株中，ＭＲＨＡ阳性菌株中３７．３％（２５／６７株）全菌ＥＬＩＳＡ阳性，其中ＭＲＨＡ＋＋＋～＋＋＋＋菌株占 ８８．０％（２２／２５）株，ＭＲＨＡ阴性菌株中全菌ＥＬＩＳＡ阳性者仅为 ３．６％（１／２８）株。２６株全菌ＥＬＩＳＡ阳性菌Ｐ菌毛粘附素，Ｆ１３型为８８．５％，Ｆ７型为１１．５％。结论：采用Ｆ１３型或多价抗血清建立的全菌ＥＬＩＳＡ方法可用于ＵＰＥＣ的鉴定。
- 李方涛李宝艳陈锦英陈贻锴
- 关键词：细胞粘着分子血清学肾盂肾炎
- 致肾盂肾炎大肠杆菌(UPEC)粘附特性的研究
- 陈锦英李方涛李宝艳何健民康宁苏琦华郑铃何庆
- 主要内容：该项目从分子水平研究UPEC，建立简便快捷和易于推广的全菌EIJSA表型鉴定方法和papA PCR基因型鉴定方法，填补了临床细菌学鉴定的空白。阐明了国内UPEC菌株分布、毒力特征及与国外菌株的差异，首次发现F1...
- 关键词：
- 关键词：致病细菌大肠杆菌
- 致腹泻肠杆菌内毒素及其亚单位分子特异性致病的研究
- 钟启平陈恩临徐建设李方涛董亚利
- 主要内容：酚水法LPS主要缺点为纯度低、对某些抗原有影响等。该项目以酶解法增加去除核酸程序，筛选254nm波长作监测，验证245nm检出对不同来源LPS有适用性。以志贺菌、EIEC及不致病的大肠杆菌互为对照，研究其LPS...
- 关键词：
- 关键词：腹泻
