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芥菜基因组定点突变系统及其应用: 本发明涉及“芥菜基因组定点突变系统及其应用”，属于生物技术领域。基因组定点突变系统，其特征在于：所述系统由特异识别目的基因两个靶序列的两个转录激活效应因子核酸酶（TALEN）所组成；所述两个靶序列为位于所述目的基因5’端...; 宋明孙梓健李念祖汤青林王志敏; 文献传递

芥菜开花整合子FLC与SVP相互作用的研究: 开花是有性生殖植物从营养生长向生殖生长的关键转折。延缓开花可在生产上避免“未熟抽薹”;提早开花可以加快品种选育进程;调节双亲花期有利于F1制种。芥菜开花时间主要受光照（例如日照长度、日照强度、光周期）、温度等外在环境以及...; 李念祖; 关键词：芥菜; 文献传递

芥菜开花调控因子SVP与FLC蛋白互作的结构域筛选与鉴定被引量：7: 2012年; 为阐明芥菜开花路径核心调节子SVP与FLC相互作用的结构域，从酵母重组质粒pGADT7SVP、pGBKT7FLC分别亚克隆了5个SVP截短体（SVPl～5）和5个FLC截短体（FLCl～5）。SVPI一5与FLCl～5编码蛋白的结构域均分别为MI、MIK、K、IKC和KC。利用酵母双杂交体系，分别构建酵母猎物质粒pGADT7SVPl—5与诱饵质粒pGBKT7FLCl～5，并转化对应的酵母Y187、Y2HGold菌。酵母转化子Y187[pGADT7SVP2～5]能与Y2HGold[-pGBKT7FLC]融合，并可在选择性固体培养基QDO／X／A上长出蓝色菌落，表明FLC能与截短体蛋白SVP2～5异源结合，SVP的K域（SVP3）可独立作用于FLC蛋白。此外，Y187[pGADT7SVP]×Y2HGold[pGBKT7FLC2～5]也能同时激活报告基因AURl．C、HIS3、ADE2、施z，，表明FLC的K域（FLC3）也可独立作用于SVP。进一步研究发现：Y187pGADT7SVP3]xY2Ht30ld[pGBKT7FLC3]正向杂交以及Y187I-pGADT7FLC3]×Y2HGoldl-pGBKT7SVP3]载体互换后杂交均可相互作用，表明SVP的K域（SVP第96～173位氨基酸区域）与FLC的K域（FLC第114～167位氨基酸区域）能够异源结合，是介导SVP与FLC蛋白互作的关键结构域。; 汤青林李念祖宋明丁宁陈竹睿刘智宇王志敏; 关键词：芥菜 SVP FLC 酵母双杂交

花椰菜游离小孢子培养研究进展: 2011年; 分析了影响花椰菜游离小孢子培养的主要因素(材料基因型、小孢子发育时期、预处理和预培养、培养基成分、培养技术),并对胚状体发生与植株再生、DH纯系获得等的研究情况进行了阐述,展望了游离小孢子培养技术发展前景。; 李念祖汤青林王志敏宋明; 关键词：花椰菜游离小孢子

芥菜开花调控蛋白SVP与FLC酵母表达载体的构建及其相互作用研究被引量：14: 2012年; 为深入研究芥菜开花信号整合子的两个核心调节因子SHORT VEGETATIVE PHASE(SVP)与FLOWERING LOCUS C(FLC)相互作用的分子机理,通过PCR扩增,从芥菜材料‘QJ’中分别克隆含EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切位点的SVP和FLC编码区全长,并利用酵母双杂交体系,将FLC与GAL4报告基因DNA激活域融合(pGADT7FLC),SVP与GAL4报告基因DNA结合域融合(pGBKT7SVP)。两种重组质粒分别转化酵母Y187和Y2HGold后未出现自激活和毒性现象。融合的二倍体酵母(pGADT7FLC×pGBKT7SVP)能在选择性固体培养基QDO/X/A(SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-Gal/AbA)上生长,并且菌落呈蓝色。将诱饵质粒(pGBKT7SVP)与猎物质粒(pGADT7FLC)载体互换(pGADT7SVP、pGBKT7FLC),再次转化酵母后仍能融合成二倍体酵母(pGADT7SVP×pGBKT7FLC),并同时激活报告基因AUR1-C、HIS3、ADE2、MEL1,由此表明SVP与FLC蛋白能够相互结合。; 汤青林李念祖丁宁陈竹睿宋明王志敏; 关键词：芥菜 SVP FLC 酵母双杂交

芥菜开花负调因子SVP及FLC同源互作域筛选和作用强度分析被引量：9: 2013年; 为探明芥菜开花负调因子SVP、FLC自身聚合的分子机制及其蛋白作用模式，利用酵母双杂交体系，分别对SVP、FLC蛋白自身聚合及其作用强度进行研究。结果表明：酵母菌Y187转化子Y187-pGADT7SVP和Y187-pGADT7SVP2～5均能与酵母菌Y2HGold转化子Y2HGold-pGBKT7SVP融合，并可在选择性固体培养基QDO／X／A上长出蓝色菌落，而Y187-pGADT7SVP1×Y2HGold-pGBKT7SVP不能在QDO／X／A生长。说明SVP蛋白能自身聚合，且与截短体SVP2～5同源结合，SVP蛋白自身聚合需要核心作用域K域参与。尽管MI域不能单独介导SVP自身聚合，但它的存在却能使SVP自身聚合作用增强，C域有可能会削弱该作用。同时，Y2HGold-pGBKT7FLC和Y2HGold-pGBKT7FLC2～5也能与Y187-pGADT7FLC融合，同时激活报告基因AURl．C、HIS3、ADE2、MEL1，FLC能与截短体FLC2～5同源互作。K域是FLC蛋白自身聚合必须的，I域会增强这一作用。SVP和FLC的核心作用域K域均由K1、K2和K3亚域组成，形成3个经典的α螺旋，K域有9个高度保守的氨基酸位点及蛋白互作的结构模体（亮氨酸拉链）。; 汤青林丁宁李念祖王志敏宋明; 关键词：芥菜 SVP FLC 酵母双杂交

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李念祖