公共文化服务平台

共 9 条记录，以下是 1-8

全选清除导出

排序方式：

人细小病毒B19VP1蛋白表达及检测特异性抗体临床应用研究被引量：1: 2009年; 目的探讨检测人细小病毒B19IgM和IgG抗体国产试剂的敏感性、特异性以及诊断准确度,探讨其临床应用价值。方法标本来源为2006年5月至2008年6月第四军医大学西京医院收治的心肌炎、血液病、呼吸道感染等患儿165例,用重组质粒VP1-PQE30,转化大肠埃希菌M15,测序正确后发酵培养,IPIG诱导表达,通过SDS-PAGE及蛋白质印迹分析表达产物,表达蛋白经AKTAexplorer100快速纯化系统纯化。经滴定选择最佳抗原包被浓度及血清最佳稀释度,建立表达蛋白ELISA检测人细小病毒B19抗体方法,探讨其实用性。结果用表达纯化蛋白抗原建立的ELISA方法与腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒、疱疹病毒的抗体阳性血清无交叉反应。其检测B19IgM和IgG的敏感性分别为87.50%、89.28%,特异性分别为90.34%、90.90%,诊断准确度为97.01%、95.54%。两种方法有较好的一致性。结论用国产的表达纯化B19病毒VP1蛋白,所建立的表达蛋白ELISA方法,检测人细小病毒B19IgM、IgG抗体,有较好的敏感性、特异性和诊断准确度。方法方便快捷、成本低,值得进一步深入研究、推广应用。; 许东亮张国成聂晓晶李志宏孙新张学红; 关键词：人细小病毒B19 ELISA 原核表达

ELISA法检测B19病毒抗体及其临床应用: 目的:建立检测人微小病毒B19的间接酶联免疫吸附（ELISA）法,评价其临床应用价值。方法:采用我科保存的XA-B19 VP1独特区蛋白包被ELISA板,优化该方法检测B19抗体的最佳实验条件。与聚合酶链反应（PCR）、...; 聂晓晶李小青张国成许东亮孙新李志宏张学红; 文献传递

人细小病毒B19 XA株VP1蛋白原核表达及初步鉴定被引量：1: 2008年; 目的:通过DNA重组技术,构建B19病毒XA株VP1全长基因表达载体,诱导重组VP1融合蛋白表达。方法:自B19病毒感染患者血清中提取病毒DNA为模板,用PCR法扩增编码VP1蛋白的全长基因片段,以pET28(a)为表达载体,构建重组表达质粒pET28(a)-VP1,转化E.coli.BL21(DE3),获得重组工程菌株。经IPTG诱导培养获得高效表达的VP1融合蛋白,SDS-PAGE、免疫印迹鉴定表达产物;并以该重组融合蛋白为抗原,免疫家兔,ELISA法检测所获抗体效价。结果:①获得了含重组表达质粒pET28(a)-VP1的正相阳性工程菌株,经IPTG诱导能高效表达VP1融合蛋白。②经ELISA法检测抗VP1多克隆抗体效价为1∶12 800。结论:重组工程菌可表达VP1融合蛋白,且该蛋白具有良好的免疫原性,对诊断试剂制备及疫苗研制具有重要意义。; 李小青张国成许东亮李志宏; 关键词：人细小病毒B19 VP1蛋白免疫原性

快速诊断人细小病毒B19感染方法学比较研究: 2013年; 目的比较本实验室自行构建的ELISA法与德国ELISA试剂盒方法及PCR法快速诊断人细小病毒B19感染的临床应用价值。方法血液标本215份,分别采用B19病毒VP1独特区(VP1u)蛋白包被ELISA板建立B19病毒抗体检测方法(自行构建ELISA法),德国ELISA试剂盒方法检测标本B19病毒IgM与IgG,并采用PCR法检测B19病毒DNA,分析自行构建ELISA法检测B19病毒的敏感性、特异性及准确度。结果自行构建的B19病毒ELISA体系最佳抗原包被量为25ng/孔,最佳标本血清稀释倍数为1∶200;以德国B19病毒ELISA试剂盒为对照,自行构建ELISA法检测B19病毒IgM的敏感性、特异性及准确度分别为79.07%,87.18%,94.89%,检测B19病毒IgG的敏感性、特异性及准确度分别为88.46%,90.79%,93.53%;以PCR法检测B19病毒DNA为标准,自行构建ELISA法检测B19病毒IgG的敏感性、特异性及准确度分别为90.32%,77.77%,95.71%。结论本实验室自行构建的ELISA检测方法与德国B19病毒抗体检测ELISA试剂盒法及PCR法检测B19病毒DNA有较好一致性,可作为B19病毒感染常规诊断方法。; 许东亮张国成聂晓晶成胜权孙新李志宏杨晓蕾吕香萍; 关键词：人细小病毒B19 ELISA PCR

ELISA法检测人微小B19抗体及其临床应用评价: 2008年; 目的建立检测人微小病毒B19的间接酶联免疫吸附(ELISA)法,评价其临床应用价值。方法采用原保存的XA-B19 VP1独特区蛋白包被ELISA板,优化该方法检测B19抗体的最佳实验条件。与聚合酶链反应(PCR)、parvovirus B19 ELISA方法进行比较,评价其一致性。结果最佳包被量为25 ng/孔,标本血清最佳稀释倍数为1∶200。建立的间接ELISA检测体系与腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒、疱疹病毒抗体阳性血清无交叉反应。其检测B19 IgM敏感性为88.37%,特异性为96.15%,与PCR方法一致性好(kappa值>0.75,P>0.05);与parvovirus B19 IgM ELISA方法符合性好,符合率为96.8%。与parvovirus B19IgG ELISA方法比较kappa值>0.75,P>0.05,两种检测方法一致性好。结论建立的间接ELISA检测B19抗体的方法具有灵敏度高、特异性强、经济、快速、方便等优点,适合于流行病学调查和临床标本检测。; 聂晓晶李小青张国成许东亮孙新李志宏张学红; 关键词：人微小病毒B19 酶联免疫吸附法

B19病毒VP1蛋白的表达及单克隆抗体的研究: 目的:利用原核表达系统表达人细小病毒B19的VP1独特区蛋白,大量发酵培养细菌后诱导蛋白表达、纯化蛋白,制备VP1蛋白的单克隆抗体（mAb）。方法:构建重组质粒VP1-PQE30,转化大肠杆菌M15,测序正确后发酵培养、...; 李志宏张国成许东亮李小青孙新丁翠玲; 关键词：人微小病毒B19 原核表达纯化单克隆抗体; 文献传递

人微小病毒B19VP1独特区蛋白的表达及纯化被引量：5: 2007年; 目的利用原核表达系统表达人微小病毒B19的VP1独特区蛋白,大量发酵培养细菌后纯化蛋白,为制备VP1蛋白的mAb奠定基础。方法构建重组质粒VP1-PQE30,转化大肠杆菌M15,测序正确后发酵培养、IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE及Western blot分析表达产物,表达蛋白经AKTA explorer 100快速纯化系统纯化。结果成功地构建原核表达系统VP1-PQE30-M15,经IPTG诱导发酵培养细菌可大量表达VP1蛋白,纯化后蛋白纯度达95%以上。结论重组表达质粒可表达VP1独特区蛋白,高纯度蛋白对制备VP1mAb及疫苗具有重要意义。; 李志宏张国成许东亮李小青孙新丁翠玲; 关键词：人微小病毒B19 原核表达纯化

B19病毒VP1基因变异对表达蛋白的结构及免疫的影响: 人细小病毒B19(简称HPVB19)，可引起急性再障危象，急性血小板减少性紫瘢、关节炎、胎儿水肿、孕妇流产、死胎等多种疾病，我国B19病毒基因有特征性变异，VP1基因变异对表达蛋白的结构及免疫的影响，需要进一步探讨。本研...; 张国成聂晓晶李小青许东亮李志宏张学红; 关键词：人细小病毒B19 VP1基因基因变异抗原位点免疫学特性; 文献传递

全选清除导出

共1页<1>

李志宏