李华伟
- 作品数:8 被引量:29H指数:4
- 供职机构:北京农学院动物科学技术学院更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市属高等学校人才强教计划资助项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 连翘酯苷对人工感染传染性支气管炎病毒雏鸡肺组织JAK/STAT信号通路的调节作用被引量:8
- 2011年
- 探讨连翘酯苷对人工感染传染性支气管炎病毒雏鸡的肺组织JAK/STAT信号通路的调节作用,分别设连翘酯苷预防组高、中、低和治疗组高、中、低6个剂量组,并设利巴韦林阳性对照组、空白对照组和病毒对照组。提取雏鸡肺组织总RNA,用相对荧光定量RT-PCR的方法测定雏鸡体内干扰素-α,JAK,STAT-1mRNA的相对表达量。结果表明连翘酯苷预防组高剂量100 mg/kg、中剂量50 mg/kg和治疗组中剂量100 mg/kg对雏鸡体内干扰素-α的mRNA水平表达有诱生作用(P<0.01),治疗组中剂量显著上调JAK及STAT-1的表达,与JAK/STAT信号通路一些因子的上调相关,其机制部分与肺组织的JAK/STAT信号通路激活和相关信号的表达有关,这是连翘酯苷发生抗病毒作用的机制之一。
- 张羽璐李华伟庄英华高飞苑嗣纯王惠川吴国娟
- 关键词:连翘酯苷鸡传染性支气管炎病毒干扰素-ΑJAK/STAT信号通路
- 鸡血浆中连翘酯苷高效液相色谱检测方法的建立
- 目的:建立测定血浆中连翘酯苷含量的高效液相色谱方法。方法:血浆样品经去蛋白处理,以乙腈-水-醋酸(18:82:0.41)为流动相,流速为1mL/min,检测波长为332nm,柱温为25℃,进样量为10μL,经Angile...
- 周旭平陆彦李华伟董晓凯吴国娟
- 关键词:连翘酯苷高效液相色谱血浆
- 文献传递
- 连翘酯苷在体外对鸡IFN-α和JAK-STAT信号通路相关因子的影响(英文)被引量:1
- 2012年
- [目的]探讨连翘酯苷作用于鸡胚肾(CEK)细胞后,IFN-α的表达变化及JAK-STAT通路相关因子mRNA的表达变化,及连翘酯苷对IFN-α和JAK-STAT信号通路的影响。[方法]将连翘酯苷设为3个浓度(100、200和400μg/ml),采用荧光定量RT-PCR,检测IFN-α和JAK-STAT通路相关因子的mRNA表达变化;用western blotting检测IFN-α的蛋白表达情况。[结果]与正常组相比,连翘酯苷不仅显著提高了IFN-α的表达量(P<0.05);而且明显上调了STAT1、JAK1、IFNAR1、IFNAR2、IRF1、IRF7的表达。[结论]连翘酯苷能够在鸡胚肾细胞(chicken embryo kidney cells,CEKs)上诱导IFN-α的表达,且能够正向调节JAK-STAT信号通路传导。
- 李华伟张中文陆彦马元元张禹吴国娟
- 关键词:CHICKEMBRYOJAK-STAT
- 鸡传染性支气管炎病毒M41型的扩繁及在鸡胚肾细胞上的适应性研究被引量:4
- 2011年
- 探明鸡传染性支气管炎病毒(Avian Infectious Bronchitis Virus,IBV)感染鸡胚肾细胞(Chicken Embry-o Kidney Cells,CEK cell),并且实现其增殖为目的。将IBV稀释液注射到SPF鸡胚尿囊腔内,培养鸡胚扩繁,观察记录结果;并培养CEK细胞,采用100倍半数组织培养感染量的IBV进行染毒实验;应用Reed-Muench法计算半数鸡胚感染量为10-6.68/0.1 mL;用Real time PCR检测IBV在感染细胞中的含量,以确定IBV在CEKcells中已经感染且增殖成功。结果表明,接种10日龄的SPF鸡胚可以收集更多的、约8 mL的尿囊液毒;反复盲传至7代的IBV可使CEK cells产生明显的细胞病变效应;通过实时荧光定量PCR和RT-PCR检测,最终确定IBV-M41型扩繁成功并且能够在CEK细胞上繁殖,为下一步实验提供了参考。
- 李华伟武聚富庄英华高飞吴国娟
- 关键词:传染性支气管炎病毒PCR适应性
- 连翘酯苷对鸡IFN-α和JAK-STAT信号通路相关因子的影响被引量:4
- 2011年
- 【目的】探讨连翘酯苷作用于鸡胚肾(CEK)细胞后,IFN-α的表达变化及JAK-STAT通路相关因子mRNA的表达变化,及连翘酯苷对IFN-α和JAK-STAT信号通路的影响。【方法】将连翘酯苷设为3个浓度(100、200和400μg.mL-1),采用荧光定量RT-PCR,检测IFN-α和JAK-STAT通路相关因子的mRNA表达变化;用western blotting检测IFN-α的蛋白表达情况。【结果】与正常组相比,连翘酯苷不仅显著提高了IFN-α的表达量(P<0.05);而且明显上调了STAT1、JAK1、IFNAR1、IFNAR2、IRF1、IRF7的表达。【结论】连翘酯苷能够在鸡胚肾细胞(chicken embryo kidney cells,CEKs)上诱导IFN-α的表达,且能够正向调节JAK-STAT信号通路传导。
- 李华伟张羽璐张中文夏楠郭玮吴国娟
- 关键词:连翘酯苷IFN-ΑJAK-STATWESTERNBLOTTING
- 小鼠IFN-α和IRF7及M×1基因实时荧光定量PCR检测方法的建立
- 【目的】建立实时荧光定量PCR检测小鼠IFN-α和IRF7及Mxl基因mRNA表达的方法,为中药抗病毒研究中相关基因表达的定量分析奠定基础。【方法】以TRIZOL裂解抽提法提取小鼠肺脏组织总RNA,根据GenBank上小...
- 马元元张中文李华伟孙健华许承扬吴国娟
- 关键词:实时荧光定量PCR小鼠IFN-Α
- 文献传递
- 连翘酯苷抗IBV和调节IFN-α信号通路相关因子表达的研究
- 目的:本研究通过建立鸡胚肾(CEK)细胞培养模型,研究连翘酯苷对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的体外抑制作用,以及连翘酯苷在鸡胚肾细胞上对IFN-α和JAK-STAT信号通路相关因子的诱导表达情况。 方法:用IBV-M4...
- 李华伟
- 关键词:连翘酯苷IBV干扰素Α
- 文献传递
- 连翘酯苷对IFN-α和Mx1表达的影响被引量:16
- 2010年
- 【目的】探讨连翘酯苷作用于感染PCV2的小鼠模型后,对IFN-α和Mx1表达的影响,以评价连翘酯苷的抗病毒作用。【方法】复制PCV2感染小鼠模型。以(2、4、10mg·mL-1)连翘酯苷分为高、中、低3个剂量组,并设空白对照组和病毒对照组。给药12、24、36h后,分别提取小鼠肺组织总RNA和总蛋白,应用实时荧光定量PCR检测IFN-α、Mx1 mRNA含量,采用Western blotting检测Mx1蛋白的表达水平。【结果】空白对照组小鼠肺组织中Mx1和IFN-α无表达,病毒对照组少量表达。随着连翘酯苷浓度的升高,IFN-α和Mx1 mRNA水平逐步升高,两者的表达量呈现平行相关;高剂量组中IFN-α和Mx1表达量最高(P<0.001);随着药物作用时间的延长表达量降低,12h时达到最高(P<0.001),其后逐渐下降。【结论】昆明小鼠适于PCV2感染模型的建立。中药连翘酯苷能显著上调IFN-α和Mx1的表达,并在给予高剂量药物后12h发挥显著的抗病毒作用。Mx1蛋白与病毒的感染密切相关,可用于病毒感染的早期诊断,及具有较好的应用前景。
- 马元元张中文李华伟孙健华许承扬吴国娟
- 关键词:连翘酯苷IFN-ΑPCV2