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miR‑135的用途及其相关药物: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及miR‑135的用途及其相关药物。本发明首次揭示了miR‑135与足细胞损伤的相关性，并首次揭示了过表达miR‑135能够足细胞发生损伤，更类似于人类的发病过程。本发明的足细胞损伤模型具有...; 周钦吕小岩李千音谢亚均吕中石; 文献传递

妊娠糖尿病的糖脂代谢改变特征被引量：34: 2012年; 目的研究不同血糖水平孕妇的血脂情况,探寻妊娠糖尿病(GDM)患者糖脂代谢变化特征。方法收集2009年10月至2010年2月,该院进行产前检查的114例孕妇空腹血清和全血标本,据糖筛试验和口服葡萄糖耐量试验(OGTT)将研究对象分为3组:糖筛阴性组、糖筛阳性而OGTT阴性(NGT)组及GDM组。分别检测各组糖脂代谢改变情况,比较3组数据之间的差异。结果 GDM组游离脂肪酸(FFA)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、糖化血红蛋白(HbAlc)较糖筛阴性组均有升高,且差异有统计学意义(P<0.05);与NGT组比较,FFA、TG和HbAlc均有所升高。结论血脂、hs-CRP、HbAlc在GDM的辅助诊断及病情判断方面有重要的临床价值。; 毕小云李千音张莉萍; 关键词：血脂糖化血红蛋白超敏C反应蛋白

FKBP-RAP-FRB系统转运BCR-ABL入核对K562细胞的增殖抑制效应被引量：1: 2014年; BCR-ABL融合蛋白是慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)发病的基础。其中,BCR-ABL只能定位于细胞浆、不能易位至细胞核是其致病的关键因素。因此,转运BCRABL入核可能是治疗CML的潜在方法。该研究利用基因重组技术,构建HA-2FKBP-ABD(HF2A)和FLAG-3NLS-FRB*(FN3R)重组腺病毒,与雷帕霉素类似物(Rapamycin analog)一同组成FKBP-RAPFRB系统,转运K562细胞胞浆中的BCR-ABL癌蛋白至细胞核,并探究其对K562细胞增殖的影响。结果显示,成功构建了高滴度的重组腺病毒,Western blot证实目的蛋白在K562细胞内成功表达。FKBP-RAP-FRB系统可通过转运BCR-ABL入核,抑制K562细胞生长和克隆形成的能力。结果揭示,FKBP-RAP-FRB系统转运BCR-ABL入核有望为CML提供新的治疗手段。; 高淼黄峥兰曹唯希李千音李会冯文莉; 关键词：慢性粒细胞白血病 BCR-ABL K562细胞重组腺病毒

PTD-OD-HA融合蛋白对K562细胞中Bcr-Abl的抑制作用观察: 2012年; 目的探讨PTD-OD-HA融合蛋白转导K562细胞的动力学、定位及其与Bcr-Abl定位的关系,以及对Bcr-Abl寡聚化和Bcr-Abl酪氨酸激酶活性的影响。方法采用FITC标记PTD-OD-HA融合蛋白,观察蛋白转导K562细胞的效率与剂量和时间的关系,激光共聚焦显微镜检测融合蛋白在细胞内的定位,免疫共沉淀法检测融合蛋白与Bcr-Abl的相互作用,Western blotting检测Bcr-Abl的磷酸化水平。结果 PTD-OD-HA转导K562细胞呈剂量和时间依赖性。PTD-OD-HA定位于K562细胞胞质,与Bcr-Abl共定位,且能与Bcr-Abl蛋白相互作用,进而干扰Bcr-Abl同源寡聚化,并可降低Bcr-Abl的磷酸化水平。结论在K562细胞中,PTD-OD-HA融合蛋白能有效抑制Bcr-Abl同源寡聚化及磷酸化水平。; 高淼黄峥兰季茂胜黄世峰曾建明李千音冯文莉; 关键词：蛋白转导域

重组腺病毒Ad5/F35-HF2S的构建及其鉴定被引量：3: 2012年; 目的构建携带HA标签的重组腺病毒Ad5F35-HF2S。方法体外合成HA标签DNA双链,以K562细胞cDNA为模板,分别扩增FKBP1、FKBP2和SH2基因,依次亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV-HA中,构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-HF2S,穿梭质粒经PmeⅠ酶切线性化,与腺病毒骨架质粒pAd5/F35在Ad5/F35-BJ5183感受态细胞中同源重组,获得重组腺病毒质粒pAd5/F35-HF2S,经PacⅠ酶切线性化后,转染AD-293细胞进行包装、扩增,获得重组腺病毒Ad5/F35-HF2S,经2轮扩增后,测定病毒滴度;采用PCR及Western blot法检测感染细胞中HF2S基因的转录及蛋白的表达。结果重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-HF2S及重组腺病毒质粒pAd5/F35-HF2S经鉴定均构建正确;经包装及2轮扩增后,重组腺病毒Ad5/F35-HF2S病毒滴度可达1013IU/ml;经PCR及Western blot鉴定表明,重组腺病毒携带的HF2S基因能够在AD-293细胞中表达。结论已成功构建了表达HF2S基因的重组腺病毒Ad5/F35-HF2S,为研究Grb2-SH2结构域在CML中的基因治疗和作用机制奠定了基础。; 李千音黄峥兰高淼钟梁冯文莉; 关键词：SH2 FKBP 重组腺病毒

沉默PPP3CA对后肾间充质细胞MET转化、凋亡、增殖及迁移的影响被引量：1: 2020年; 肾脏是人体重要器官,肾脏发育对肾脏的形成和功能至关重要,其中后肾间充质细胞(Metanephric mesenchyme,MM)间质-上皮转化(Mesenchymal-epithelial transition,MET)是肾单位形成的关键环节。qRT-PCR和Western blotting实验检测蛋白质磷酸酶3催化亚基α(Protein phosphatase 3 catalytic subunit alpha,PPP3CA)在不同状态MM细胞株mK3、mK4中的表达谱及对MET标志蛋白调控作用;采用慢病毒包装方式构建稳定敲低PPP3CA的mK4细胞株;采用CCK-8、EdU实验、细胞划痕实验、流式细胞技术分别检测PPP3CA对上皮样后肾间充质细胞株mK4细胞生长、迁移、凋亡的调控作用。PPP3CA在mK4细胞中表达量较间质样后肾间充质细胞mK3更高,敲低PPP3CA后,检测MET标志物及细胞生物学行为,结果显示敲低PPP3CA显著上调上皮细胞标志物E-cadherin表达,促进MET过程,且促进细胞凋亡,抑制细胞增殖和迁移。此外,敲低PPP3CA促进ERK1/2磷酸化,提示PPP3CA生物学功能的调控机制可能与其去磷酸化ERK1/2蛋白相关。以上结果提示PPP3CA在MM细胞MET转化和生物学行为调节中发挥重要功能,为发现和解析肾发育过程中潜在的关键调节因子提供了新的理论基础。; 辜玉萍陈蕾李千音; 关键词：细胞增殖细胞迁移

腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV-HF2A的构建和鉴定: ＜正＞目的:构建腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV-HF2A,为后续研究慢性粒细胞白血病的发病机制和靶向治疗奠定实验基础。方法:HA标签通过合成5’端磷酸化的互补粘性末端引物,经退火连接入经BglⅡ和SalⅠ双酶切的...; 黄峥兰高淼李千音罗红伟冯文莉; 文献传递

重组腺病毒Ad5/F35-HF2S在白血病K562细胞的定位及与Bcr-Abl的相互作用: 2013年; 目的:研究重组腺病毒载体Ad5/F35-HF2S在慢性粒细胞白血病K562细胞中的定位及与融合蛋白BcrAbl的相互作用。方法:将Ad5/F35-HF2S腺病毒载体感染K562细胞,然后RT-PCR和蛋白质印迹法鉴定其表达情况,采用免疫荧光和蛋白质印迹法鉴定融合蛋白HF2S在K562细胞中的定位,免疫荧光法检测HF2S与Bcr-Abl在细胞质中的共定位情况,免疫共沉淀技术验证二者之间是否存在相互作用。结果:重组腺病毒Ad5/F35-HF2S能高效感染白血病K562细胞,并进行了正确表达。重组蛋白HF2S与Bcr-Abl共定位于细胞质,并能相互结合。结论:在K562细胞质中成功表达能与Bcr-Abl相互作用的HF2S蛋白,为后续靶向转运Bcr-Abl入核并治疗慢性粒细胞白血病奠定了基础。; 李千音黄峥兰高淼李会钟梁冯文莉; 关键词：白血病 BCR-ABL阳性融合蛋白质类 BCR-ABL

Slit2在胰腺癌迁移和神经侵袭中作用和Bcr-Abl定位改变对慢性粒细胞白血病细胞的影响及机制: 第一部分Slit2在胰腺癌迁移和神经侵袭中作用研究　　研究背景：胰腺癌是实体肿瘤中致死率最高的肿瘤之一;主要通过神经、血管和淋巴等侵袭途径进行远处转移;极大地限制了胰腺癌患者的生存率。疼痛是胰腺癌患者最常见的临床症状;而...; 李千音; 关键词：胰腺癌

嵌合腺病毒Ad5F35-FLAG-3NLS-FRB的构建与鉴定被引量：3: 2012年; 目的构建携带FLAG-3NLS-FRB*融合基因的嵌合腺病毒,并检测其在AD-293细胞中的表达。方法将FLAG标记的3段核定位信号(FLAG-3NLS)与突变修饰的雷帕霉素靶FRB结构域(FRB*)基因通过重叠PCR技术拼接成FLAG-3NLS-FRB*,定向克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,测序鉴定后,与腺病毒骨架质粒pAd5F35在大肠杆菌BJ5183中同源重组,获得嵌合腺病毒Ad5F35-FLAG-3NLS-FRB*,感染AD-293细胞进行包装、扩增。采用基因转移单位(Gene transfer unit,GTU)法测定病毒滴度;RT-PCR及Western blot检测FLAG-3NLS-FRB*在AD-293细胞中的转录及表达。结果腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV-FLAG-3NLS-FRB*经PCR、双酶切及测序鉴定证明构建正确;FLAG-3NLS-FRB*正确克隆至腺病毒骨架质粒中;在AD-293细胞中包装、扩增获得了高滴度的嵌合腺病毒Ad5F35-FLAG-3NLS-FRB*,病毒滴度为2.0×1013GTU/ml;嵌合腺病毒感染AD-293细胞后36 h,在细胞中可检测到FLAG-3NLS-FRB*基因的转录和蛋白的表达。结论成功构建了高滴度的嵌合腺病毒Ad5F35-FLAG-3NLS-FRB*,并在AD-293细胞中成功表达了FLAG-3NLS-FRB*融合蛋白。; 高淼黄峥兰李千音钟梁冯文莉; 关键词：同源重组核定位信号

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李千音

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