曹海鹏
- 作品数：14 被引量：60H指数：6
- 供职机构：贵州师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：贵州省自然科学基金国家高技术研究发展计划四川省科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学农业科学化学工程更多>>
- 小立碗藓PpCASLUU3基因敲除载体的构建
- 2020年
- 【目的】为探明PpCASLUU3是否参与灰霉菌引起的小立碗聲中类过敏反应,构建PpCASLUU3-PTN182敲除载体,对早期登陆植物防卫防御的进化提供依据。【方法】根据同源重组的原理,以小立碗聲基因组DNA为模板,利用Primer 5设计的引物,扩增得到小立碗聲PpCASLUU3基因的上、下游同源臂基因片段。将上下游同源臂基因分别克隆到pMD-19T上,测序验证,使用EcoR I、EcoR V酶切含上游目的基因的pMD-19T获得上游目的基因片段,使用BamH I、Sma I酶切含下游目的基因的pMD-19T获得下游目的基因片段,同时酶切PTN182载体,经T4-DNA连接酶连接,转入大肠杆菌感受态,筛选出阳性克隆,采用相同的方法,将下游臂连入PpCASLUU3.1-PTN182载体。【结果】经PCR检测、酶切验证,获得了完整的PpCASLUU3.l-PTN182-PpCASLUU3.2敲除载体。经测序分析,插入序列PpCASLUU3.1和PpCASLUU3.2与未插入前相似度分别为100%和99.63%o【结论】PpCASLUU3-PTN182敲除载体构建成功。
- 陈波闫慧清李莉曹海鹏辛健康姜山
- 1株葡糖醋杆菌及其筛选纯化方法
- 本发明公开了1株葡糖醋杆菌(Gluconacetobacter sp.)及筛选纯化方法。其特点是以残次水果为原材料，用放线菌酮抑制霉菌等真菌的生长，以此采取平板富集培养、梯度稀释平板涂布、初筛、复筛等方法进行筛选和纯化，...
- 胡承曹海鹏袁帅赵昆
- 文献传递
- 藏鸡源乳酸菌的筛选鉴定及IBVN基因的表达研究
- 2015年
- 从藏鸡(海拔3000米藏区、自然放养、未使用过抗生素)肠道内筛选乳杆菌,经16s rDNA和生理生化试验鉴定为植物乳杆菌.通过耐酸耐胆汁试验和肠道黏附试验测试,表明其具有良好的耐酸耐胆汁能力和肠道黏附能力.为使外源质粒顺利转化入乳杆菌,进行电场强度的优化,再按照优化后的电场强度,将禽冠状病毒pSIP409-N重组质粒电转化入该株乳杆菌,进行双酶切和PCR鉴定.将经鉴定成功转入的重组乳杆菌,用诱导肽SppIP诱导表达,再进行SDS-PAGE检测外源蛋白的表达.结果表明N蛋白能够顺利表达.上述试验证明该株植物乳杆菌具有作为乳酸菌活载体疫苗的潜力.
- 刘思彤王红宁马炳存丁梦蝶曹海鹏杨鑫
- 关键词：藏鸡乳酸菌IBVN基因
- 鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫增强效应研究
- 2011年
- 为研究鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DNA疫苗免疫效果的影响,根据GenBank登录的鸡IL-1β和IL-16序列设计两对引物,采用RT-PCR方法从四川山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆IL-1β和IL-16基因,与真核表达质粒pcDNA3.1(+)连接构建了pDNAIL-1β和pDNAIL-16。分别将两种重组质粒与IBVDNA联合免疫SPF雏鸡并进行攻毒试验。结果表明,pDNAIL-1β和pDNAIL-16均能促进血清中特异性抗体水平和外周血T淋巴细胞亚群数量的增加(p<0.05),增强IBV DNA疫苗对同型强毒的保护率15%～25%,pDNAIL-1β提升DNA疫苗的抗体水平的时间比pDNAIL-16多7d。试验表明,鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫具有增强作用。
- 张毅王红宁樊汶樵张安云曹海鹏郭自成丁梦蝶
- 关键词：禽传染性支气管炎病毒免疫增强作用
- 一株强吸附胆固醇乳酸菌的分离鉴定及益生特性研究被引量：7
- 2022年
- 以健康黔北黑猪肠道黏膜内容物、健康成年人粪便和自然发酵泡菜为原料,分离筛选筛选出具有强降胆固醇效果的乳酸菌,并对其进行形态学观察及分子生物学鉴定。结果表明,从猪肠道黏膜中分离得到1株具有强胆固醇吸附能力的菌株,编号为R-15,其被鉴定为植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)。菌株R-15的胆固醇降解率与其生长量(OD600 nm值)正呈相关,主要机制是吸附作用。当吸附时间为4.0 h时,活菌与死菌的胆固醇吸附率相近(70%)。对抗生素敏感性存在差异,对诺氟沙星、环丙沙星、庆大霉素等抗生素耐药,存在多重耐药机制;可耐受30~45℃的温度,60℃热处理30 min其存活率在40%以上;经pH2、0.3%牛胆盐、人工胃肠液处理6 h后活菌数对数值分别减少1.34、2.05、1.54、1.05,表明该菌株具有一定益生特性。
- 曹海鹏姬邓红黄作芳甘涛袁雨雨杨良恒姜山
- 关键词：植物乳杆菌降胆固醇耐受性
- 水晶葡萄酿酒酵母菌的分离筛选及酿酒性能研究被引量：14
- 2019年
- 以水晶葡萄为原料,通过杜氏管产气试验、耐受性试验分离筛选优良酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),采用分子生物学技术对其进行鉴定,并研究其酿酒性能。结果表明,筛选出两株优良酵母,分别命名为SJJM-7和SJJM-18;两株菌对糖、低pH值、乙醇和SO2的耐受性较强,均能在50%糖度、12%vol乙醇及200mg/LSO2的培养基中生长并发酵产气;在pH值2.0的培养基中培养2d,菌体存活率均>20%;菌株SJJM-7和SJJM-18均被鉴定为酿酒酵母(S.cerevisiae);利用这两株菌株发酵水晶葡萄汁后,菌株SJJM-7和SJJM-18的酿酒性能(澄清度、挥发酸含量、残糖量及酒精度)优于进口商品酵母菌株LA-PE,在生产水晶葡萄酒方面具有一定的研究意义和应用价值。
- 吴启凤李红梅杨胜涵曹海鹏
- 关键词：水晶葡萄酿酒酵母酿酒性能耐受性
- 一株猪源植物乳杆菌在青贮饲料中的应用研究被引量：1
- 2021年
- 以广谱抑菌功能的猪源植物乳杆菌R-21为添加剂,加入乳熟粉碎的玉米秸秆中密封发酵,检测发酵后青贮饲料的乳酸菌数量、pH、含水量及其他感官指标。结果表明:植物乳杆菌R-21发酵组中乳酸菌的数量明显高于对照组,而pH低于对照组(P≤0.05),饲料感官总体为酸香舒适、青绿色及湿润不粘手,达到优等青贮饲料标准。说明植物乳杆菌R-21作为青贮饲料发酵添加剂在实践中具有可行性。
- 曹海鹏徐兴娜文小飞
- 关键词：植物乳杆菌青贮饲料乳酸菌
- 植物乳杆菌R-15对高脂饮食下小鼠体质量及血脂的影响研究
- 2022年
- 为研究植物乳杆菌R-15对高脂饮食小鼠体质量及血脂的影响,将40只成年洁净级雄性昆明小鼠随机分为普通组、高脂组、R-15-7d组和R-15-35d组等四组,其中普通组施喂基础饲料,高脂组施喂高脂饲料,R-15-7d组和R-15-35d组(施喂高脂饲料和R-15菌悬液),检测小鼠体质量、脏器指数、血脂和血糖。结果显示:R-15-35d组在采食量相近的情况下,小鼠体质量增长最为缓慢(P 0.05),但可改善高脂饮食造成的脾脏指数增加(P 0.05)。
- 甘涛曹海鹏杨良恒袁雨雨姬邓红黄作芳辛健康
- 关键词：植物乳杆菌血脂体质量胆固醇高脂饮食
- 一株猪源植物乳杆菌对大肠杆菌ATCC25922的抑制作用研究被引量：4
- 2021年
- 以猪肠道黏膜中分离的猪源植物乳杆菌R-21与指示菌ATCC25922为研究对象,研究其在不同培养时间、不同发酵液处理时间、与指示菌共培养及多次连续传代培养等条件下对ATCC25922的抑菌特性和抑菌稳定性。结果表明:R-21上清液的p H随培养时间逐渐降至3.0,抑菌直径增至22mm左右;经发酵上清液处理后,指示菌活菌对数值迅速减少,至6 h降至0;共培养时,指示菌浓度先增加后减少,至16 h时降至0;连续传代10次,R-21抑菌直径基本维持在20 mm以上。以上结果显示R-21对大肠杆菌ATCC25922具有较强的抑制能力,且菌株遗传稳定性好。
- 曹海鹏文小飞徐兴娜辛健康
- 关键词：植物乳杆菌大肠杆菌抑菌共培养
- 细菌纤维素高产菌株的筛选及鉴定被引量：12
- 2010年
- 以残次的水果为原料,经静置富集培养、多次筛选纯化等步骤,分离出一株细菌纤维素产量较高且遗传性能稳定的菌株G-29。根据第二版《伯杰系统细菌学手册》和第九版《伯杰氏细菌鉴定手册》,对该菌株进行形态、生理生化特征和16SrDNA分子序列分析。初步鉴定该菌为葡糖醋杆菌属(Gluconacetobactersp.)一个新菌种或者中间葡糖醋杆菌(Gluconacetobacter intermedius)的一个亚种。菌株G-29已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCNO:M208234。
- 曹海鹏袁帅赵昆张霞胡承
- 关键词：细菌纤维素生理生化特征
