时洪艳 作品数:115 被引量:537 H指数:13 供职机构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 黑龙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
猪瘟病毒衣壳蛋白的细胞核定位研究 被引量:9 2014年 为了解猪瘟病毒(CSFV)衣壳(C)蛋白在ST细胞中的定位情况,本研究将CSFV C蛋白基因克隆于真核表达载体pEGFP-C2中,构建重组质粒pEGFP-CSFV-C。将该重组质粒转染ST细胞,转染2 h、4 h和6 h后利用激光共聚焦显微镜分析C表达蛋白在细胞中的定位情况。结果表明,CSFV表达蛋白在ST细胞中主要定位于细胞质和核仁。本研究为进一步分析CSFV的复制机理提供依据。 刘宁 时洪艳 陈建飞 冯力 张鑫 胡桂学关键词:猪瘟病毒 衣壳蛋白 ST细胞 猪轮状病毒重组VP7蛋白抗原间接ELISA诊断方法的建立 本研究以纯化的原核表达的猪轮状病毒VP7抗原表位区域为抗原,建立了检测猪轮状病毒抗体的间接ELISA诊断方法。特异性试验表明,该抗原与其他7种常见猪病病毒(TGEV、PEDV、CSFV、PCV2、PRRSV、PPV、Pr... 时洪艳 冯力 陈建飞 孙东波 崔晓臣 王承宝关键词:猪轮状病毒 间接ELISA 文献传递 轮状病毒引起的仔猪腹泻 轮状病毒(Rotavirus,RV)属呼肠孤病毒科的成员,是引起婴幼儿和多种幼龄动物急性腹泻的主要病原体.1943年,Light首次研究了牛的轮状病毒.1973年Bishop等在澳大利亚从腹泻患儿十二指肠粘膜及粪便中发现... 时洪艳 冯力 孙东波关键词:轮状病毒 仔猪腹泻 病原学 流行病学 DNA疫苗 文献传递 猪流行性腹泻疫苗的研究 被引量:25 2010年 猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由尼多目(Nidovirales)、冠状病毒科(Comnaviridae)、冠状病毒属(Coronavirus)α-冠状病毒中的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的猪的一种急性、高度传染性的肠道疾病,该病以急性肠炎、呕吐、水样腹泻和脱水为主要特征。各种日龄的猪均易感,尤其是哺育仔猪,发病率高达100%,死亡率为30%~80%。 陈建飞 冯力 时洪艳 崔尚金关键词:冠状病毒科 疫苗 急性肠炎 冠状病毒属 肠道疾病 水样腹泻 猪流行性腹泻病毒分子生物学研究进展 猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的以腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要... 孙东波 冯力 时洪艳 陈建飞关键词:猪流行性腹泻 分子生物学 临床症状 猪流行性腹泻病毒通过下调FBXW7拮抗宿主抗病毒天然免疫应答的研究 被引量:1 2020年 为研究E3泛素连接酶FBXW7与PEDV感染的相互调节作用,本研究采用PEDV感染Vero E6细胞后检测FBXW7蛋白表达水平,结果显示,PEDV感染能够抑制Vero E6细胞中FBXW7的表达水平。将pCAGGS-HAFBXW7转染Vero E6细胞,通过FBXW7过表达试验评价其对PEDV感染复制的影响,western blot检测分析结果显示,过表达FBXW7显著抑制PEDV N蛋白的表达,表明FBXW7对PEDV复制有抑制作用。进一步利用荧光定量PCR检测PEDV感染条件下过表达FBXW7对干扰素及干扰素刺激基因的影响,结果显示,与pCAGGS-HA对照组对比,pCAGGS-HA-FBXW7转染细胞IFN-β、ISG15、ISG54和ISG56的转录水平均显著提高(p<0.05),表明PEDV感染可通过下调FBXW7的表达拮抗宿主天然免疫应答促进其感染复制。本研究阐明了一种PEDV拮抗宿主天然免疫的新策略。 李明蔚 郭龙军 石照蓉 吴洋 陈建飞 时洪艳 冯力关键词:猪流行性腹泻病毒 拮抗 天然免疫应答 猪流行性腹泻病毒特异性SIgA ELISA检测试剂盒及其应用 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒(PEDV)特异性SIgA ELISA检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒包括抗SIgA SC片段的单克隆抗体,所述的单克隆抗体由微生物杂交瘤细胞株2F9分泌产生,所述的杂交瘤细胞株2F9保藏... 冯力 刘建波 时洪艳猪传染性胃肠炎华毒弱毒疫苗株及其应用 本发明公开了一种猪传染性胃肠炎华毒(H)弱毒疫苗株(Transmissible gastroenteritis virus)及其应用。本发明弱毒疫苗株的微生物保藏号是:CCTCC-V200609。本发明TGEV弱毒株安全... 冯力 王承宝 时洪艳 陈建飞 佟有恩 王明 马思奇文献传递 猪捷申病毒Swine/CH/IMH/03株免疫原性的研究 被引量:2 2012年 为确定猪捷申病毒(Porcine Teschovirus,PTV)Swine/CH/IMH/03株免疫原性,本研究将该PTV分离株灭活后分别与氢氧化铝佐剂和Montanide ISA 50V2佐剂混合,制成油佐剂疫苗,并采用不同免疫程序接种实验猪后对病毒抗体进行检测。抗体检测结果表明:PTV Swine/CH/IMH/03分离株能够诱导实验动物产生较高抗体水平,并显著高于对照组;与氢氧化铝佐剂混合制成的佐剂疫苗免疫效果优于Montanide ISA 50V2佐剂;而且一次免疫组与二次免疫组没有明显差异。通过PTV Swine/CH/IMH/03株免疫原性的研究,为后续猪捷申病的预防工作提供技术支持。 冯力 时洪艳 童光志 刘娣关键词:猪捷申病毒 免疫原性研究 猪瘟病毒衣壳蛋白与宿主细胞核仁素蛋白相互作用 被引量:2 2015年 为鉴定猪瘟病毒(CSFV)衣壳蛋白(C)与宿主细胞核仁素(NCL)蛋白的相互作用,本研究将重组质粒p EGFP-CSFV-C转染至猪睾丸细胞(ST)中,采用GST pull-down和免疫共沉淀方法沉淀ST细胞中的NCL蛋白,通过共聚焦显微镜分析C蛋白和NCL蛋白的共定位情况。结果表明,CSFV C蛋白与NCL蛋白在核仁中存在共定位现象,并且在体外和转染细胞中均存在相互作用。NCL蛋白被抑制后,CSFV的复制能力下降。本研究为进一步分析C蛋白核转运机制以及在CSFV复制过程中的功能提供了实验依据。 张鑫 时洪艳 徐佳关键词:猪瘟病毒 衣壳蛋白 核仁素 相互作用