房芳
- 作品数：19 被引量：6H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金北京市科技新星计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- miR-125b-Bcl-2-Rock Axis Dominates Erythroblast Enucleation
- Understanding the mechanism controlling erythrocyte enucleation may provide new insights into therapeutic appr...
- 房芳邹晓静曲洺逸陈冬丽陈琳范增曾泉周军年习佳飞岳文谢小燕裴雪涛
- 关键词：ENUCLEATION
- 泊洛沙姆188对体外三维培养脐血单个核细胞向巨核细胞分化的影响被引量：1
- 2018年
- 目的观察泊洛沙姆188（P188）对体外三维（3D）培养诱导脐血单个核细胞向巨核细胞分化的影响。方法将分离的脐血单个核细胞分别接种于细胞瓶和细胞培养袋中，后者采用WIGGENS摇床模拟生物反应器进行3D培养。在巨核细胞诱导培养基中加入P188体外培养14d，观察细胞形态、计数细胞数并计算细胞存活率，采用流式细胞术观察巨核细胞表面标志表达情况。结果与采用传统的细胞培养瓶二维（2D）培养诱导巨核细胞相比，2D＋P188培养组巨核系CD41＋、CD41＋／CD61＋、CD61＋细胞数明显增加（P值均〈0．01）；在3D培养中加入P188，细胞体积变大，核形状不规则，胞质含紫红色颗粒，细胞分化更接近成熟。2D培养、3D培养及3D＋P188培养组组间巨核细胞表面标志CD41、CD41／CD61、CD61表达水平差异有统计学意义（P值均〈0．01）。LSD—t检验两两比较显示，与2D培养相比，3D培养诱导巨核细胞存活率及细胞数均降低（P值分别为0．018、0．027），3D＋P188培养组细胞数、细胞存活率与2D和3D培养组比较差异均无统计学意义（P值均〉0．05）。而3D培养组巨核细胞CD41／CD61表达水平为（36．30±1．27）％，高于2D培养组的（23．95±1．34）％（P=0．002），3D＋P188培养组CD41／CD61表达水平更高[（59．45±1．20）％]。结论3D培养有利于巨核系祖细胞诱导分化，但细胞存活率低，加入P188，细胞生存状态好，且诱导效率更高。
- 陈琳岳文谢小燕张秀媛吕洋刘大庆习佳飞曲洺逸范增房芳裴雪涛
- 关键词：巨核细胞泊洛沙姆诱导分化
- 红系祖细胞冻存液及其应用
- 本发明公开了红系祖细胞冻存液及其应用，其中，该红系祖细胞冻存液包含：DMSO；HSA；以及血浆。该冻存液能够有效保存红系祖细胞，并且保存时间长，细胞复苏后增殖能力强，细胞回收率高。
- 陈琳裴雪涛习佳飞谢小燕周军年李艳华岳文房芳南雪刘大庆
- 文献传递
- 核酸在提高细胞巨核分化效率中的用途
- 本发明提出了核酸在提高细胞巨核分化效率中的用途以及提高细胞巨核分化效率的方法，所述细胞具有巨核分化的潜能，所述核酸具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。在细胞中过表达具有SEQ ID NO：1所示核苷酸序列的核酸，...
- 裴雪涛谢小燕曲洺逸岳文房芳陈琳何丽娟张博文
- 红系祖细胞冻存液及其应用
- 本发明公开了红系祖细胞冻存液及其应用，其中，该红系祖细胞冻存液包含：DMSO；HSA；以及血浆。该冻存液能够有效保存红系祖细胞，并且保存时间长，细胞复苏后增殖能力强，细胞回收率高。
- 陈琳裴雪涛习佳飞谢小燕周军年李艳华岳文房芳南雪刘大庆
- 文献传递
- 高效诱导人胚胎干细胞成为内皮祖细胞
- 2013年
- 血管的发生和发育不仅对胚胎形成中各器官的发育分化十分重要,并且对成体的创伤修复和生殖功能也具有重要意义.血管内皮细胞是形成心血管封闭管道系统的形态基础,体外多种细胞可经诱导分化产生出内皮祖/内皮细胞(endothelialprogenitor/endothelial cells,EPCs/ECs),但是存在一些不足.鉴于人类胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)诱导分化的全能性和长期增殖能力,为EPCs/ECs提供了新的来源.现有文献报道,hESCs诱导分化为EPCs/ECs的比例较低,为了提高该诱导分化效率,我们使用分阶段的二维诱导方法,首先将细胞接种在超纯层纤连蛋白(Matrigel)上,之后通过在不同阶段添加不同的因子,最终获得CD31+KDR+细胞的比例可以达到16%.进一步内皮诱导分化的结果显示,获得的EPCs/ECs的比例可以达到约32%,这些细胞具有在Matrigel上形成血管样结构的能力,可结合植物凝集素.实时定量PCR的结果显示,诱导分化所得的细胞表达众多内皮相关基因,并且免疫荧光的结果也表明部分细胞表达内皮细胞特异性表面标志CD31.
- 房芳张博文何丽娟周军年王静雪岳文谢小燕裴雪涛
- 关键词：人胚胎干细胞内皮细胞诱导分化
- 核酸在提高细胞巨核分化效率中的用途
- 本发明提出了核酸在提高细胞巨核分化效率中的用途以及提高细胞巨核分化效率的方法，所述细胞具有巨核分化的潜能，所述核酸具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。在细胞中过表达具有SEQ ID NO：1所示核苷酸序列的核酸，...
- 裴雪涛谢小燕曲洺逸岳文房芳陈琳何丽娟张博文
- 文献传递
- 间充质干细胞对造血干/祖细胞分化为巨核细胞的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨间充质干细胞(MSC)共培养对体外诱导脐带血单个核细胞来源的造血干/祖细胞生成巨核细胞的影响。方法:分离得到骨髓和脐带2种来源的MSC,并对它们进行表面标志和多向分化能力的鉴定,同时通过实时定量PCR及对RT-PCR产物的电泳分析,对比相同培养代数下2种MSC表达造血因子的情况;用梯度离心法分离得到单个核细胞,通过直接接触或Trans-well分隔的方式分别与MSC共培养,观察细胞增殖情况,并检测巨核系特异性的表面标志和相关基因的表达。结果:骨髓和脐带来源的MSC均分泌对巨核细胞增殖分化有促进作用的造血因子,与造血干/祖细胞直接共培养,对于巨核细胞的增殖有明显的促进作用,分化效果不明显;在非接触共培养的条件下,对巨核细胞的增殖及分化都产生促进作用,且骨髓来源的MSC较脐带来源的MSC效果更加明显。结论:MSC与脐带血造血干/祖细胞非接触培养,对其向巨核分化和增殖的促进作用明显,本实验所用的骨髓来源MSC促分化效果更好。本研究为今后进一步优化巨核系诱导分化体系奠定了基础,并对未来体外大规模制备巨核系祖细胞应用于临床治疗有一定的指导作用。
- 曲洺逸王静雪王静雪王思涵房芳陈琳张文成贾雅丽岳文谢小燕
- 关键词：巨核细胞间充质干细胞分化共培养
- 人造血转录因子GATA-1的克隆、表达及其对间质细胞的生物学作用
- 2013年
- 目的:构建人GATA-1全长过表达载体,对其进行过表达,并初步探讨其在人非造血细胞(人脐静脉内皮细胞、人成纤维细胞)中的生物学作用。方法:以人脐带血cDNA为模板,采用高保真PCR获得GATA-1的CDS序列,连接至pGEM-T Easy载体,构建pBPLV-GATA1慢病毒表达质粒,并对上述载体进行NheⅠ、XbaⅠ双酶切和测序鉴定,鉴定正确后,在293T细胞中进行慢病毒包装,浓缩病毒后,对我们原代分离培养的人脐静脉内皮细胞和成纤维细胞进行慢病毒感染,采用流式分选对阳性目的细胞进行纯化,阳性细胞扩增后进行Western印迹鉴定;以人包皮成纤维细胞(HFF)为研究对象,在光学及荧光显微镜下观察细胞形态变化情况,CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞表面标志表达情况。结果:双酶切和测序结果表明克隆了1242 bp的人GATA-1全长CDS序列,经Western印迹检测,GATA-1在293T细胞中获得瞬时表达;获得了人GATA-1稳转细胞株,对稳转细胞株的检测表明,GATA-1对HFF细胞增殖具有一定的抑制作用,但对HFF细胞形态及细胞表面标志CD90、CD29的表达无明显影响。结论:构建了人GATA-1慢病毒表达载体及其稳转细胞株,GATA-1蛋白对间质细胞的增殖有一定的抑制作用。
- 南雪曾泉王静雪张文成房芳王思涵岳文周军年裴雪涛
- 关键词：GATA-1间质细胞增殖
- 培养基及其用途
- 本发明公开了用于体外诱导胚胎干细胞分化为内皮细胞的一组培养基和试剂盒，及其在体外诱导胚胎干细胞分化为内皮细胞中的用途、体外诱导胚胎干细胞分化为内皮细胞的方法，以及内皮细胞或其衍生物。其中，该组培养基包括：第一培养基，其为...
- 裴雪涛谢小燕岳文何丽娟李艳华南雪姚海雷房芳张博文
- 文献传递
