戴青冬 作品数:11 被引量:47 H指数:5 供职机构: 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 更多>> 发文基金: 公益性行业(农业)科研专项 国家教育部“211”工程 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
香蕉枯萎病菌4号生理小种中CHS基因家族的克隆与蛋白序列分析 被引量:1 2014年 为了解香蕉枯萎病菌4号生理小种(FOC4)中的几丁质合酶(Chitin synthase,CHS)基因的特点,从而为进一步研究相关基因功能奠定基础。根据丝状真菌中CHS基因设计简并引物,采用RT-PCR的方法扩增得到FOC4中全长cDNA,测序后对该基因家族编码的蛋白进行分析。结果表明,FOC4共有8个CHS基因,根据蛋白聚类分析表明可其可划分为2个家族,并可根据氨基酸序列特征进一步划分为7个小类,该基因家族成员在不同种镰刀菌中保守程度较高。 毛超 杨腊英 戴青冬 黄俊生根癌农杆菌介导的香蕉枯萎病1号生理小种遗传转化体系的优化 2012年 针对香蕉枯萎病病原菌的1号生理小(Fusariumoxysporumf.spcubenseracel,Focl),以潮霉素抗性为选择标记,建立了根癌农杆菌介导的转化体系,确定影响转化效率主要因子是:YEB平板上单菌落培养时间为40h、在LB液体摇床培养中培养时间28~30h(200r/min)、乙酰丁香酮(AS)浓度为200μmol]L、共培养温度为25℃、IM固体培养基pH值为5.5。在此条件下,转化效率能达到150-200个转化子/10s个Focl孢子。在选择性培养基筛选转化子时,我们首次采用了直接覆盖选择性培养基方法,比传统的转膜反贴方法更方便简单。在荧光显微镜下观察到转化子的绿色荧光。潮霉素抗性测试发现转化子的抗性表现稳定。 戴青冬 毛超 郭立佳 杜和禾 汪军 潘江禹 黄俊生关键词:香蕉枯萎病 根癌农杆菌 突变体 施用淡紫拟青霉与套作对香蕉枯萎病控病作用的影响 被引量:17 2013年 【目的】探讨施用淡紫拟青霉与套作对香蕉枯萎病的防治效果。【方法】采用完全随机区组试验,测定了香蕉、红薯套作条件下4个淡紫拟青霉E7施用浓度对香蕉生长、枯萎病病情指数、枯萎病病原菌(Fusarium oxysporum f. sp.cubense, FOC)与E7及可培养微生物存活力的影响。【结果】与对照比较,在香蕉移栽120d时,在单作和套作条件下,施用E7能促进香蕉生长和提高控病作用,其中以套作与共同施用E7浓度10^6(cfu·g^-1土)控病作用最显著,香蕉株高、茎围、叶宽、地上部、地下部鲜质量和防效显著提高,施用E7处理后病情指数下降了47.71%~69.61%;根际和不同土层的FOC菌量均显著降低,E7菌量均显著提高;根际可培养真菌、细菌和放线菌数量分别显著增加了1.12-6.65倍,16.35—38.32和2.80—3.49倍,FOC数量显著降低了96.61%~99.44%;FOC与根际可培养真菌和细菌数量呈显著负相关关系,与病情指数呈极显著正相关关系。【结论】施用E7结合套作可促进香蕉生长,提高根际微生物数量,增加对香蕉枯萎病的防治效果,具有较大的应用前景。 汪军 王国芬 杨腊英 郭立佳 潘江禹 毛超 戴青冬 黄俊生关键词:香蕉枯萎病 单作 套作 淡紫拟青霉 不同肥料对生防菌淡紫拟青霉E7定殖的影响 被引量:5 2012年 为了解不同肥料对淡紫拟青霉E7在香蕉根际定殖的影响,以淡紫拟青霉E7为材料,研究了不同肥料对E7在香蕉根际土壤定殖的影响。结果表明,最适宜淡紫拟青霉E7在香蕉根际定殖的尿素(F1)浓度为1.6 g/kg,其后依次为3.2、6.4、0.8、0.4g/kg;芭田世界通复合肥(F2)的最适浓度为0.8 g/kg,其次为1.6 g/kg和0.4 g/kg;有机钾宝(F3)最适浓度为6.4 g/kg,其后依次为3.2、1.6、0.8、0.4 g/kg;奥普尔腐植酸有机矿化活性冲施肥(F4)最适浓度为6.4 g/kg,其后依次为3.2、1.6、0.8、0.4 g/kg。施用一定浓度的肥料能有效提高淡紫拟青霉的根际定殖能力。 潘江禹 汪军 毛超 戴青冬 黄俊生关键词:淡紫拟青霉 肥料 定殖 尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种中Fsr1基因的克隆及生物信息学分析 被引量:1 2014年 以尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种为材料,克隆其Fsr1基因的DNA及cDNA全长,并对其进行生物信息学分析。根据镰刀菌中相关基因设计简并引物,结合PCR与RT-PCR技术扩增目的片段,进行氨基酸序列推导后分析。得到结果 FoFsr1基因开放阅读框为2 474 bp,共编码824个氨基酸;FoFsr1基因编码蛋白可能是存在于细胞核中的跨膜亲水蛋白,含有54个蛋白磷酸化位点,不含有信号肽;该蛋白主要含有1个Striatin结构域及7个WD40结构域,二级结构主要由β折叠和无规则卷曲组成,其中不含有亮氨酸拉链结构;同源性分析发现其与丛赤壳菌属中的Fsr1蛋白亲缘关系最近。通过结构分析发现,推测该蛋白可能在细胞周期及细胞凋亡过程中起信号转导与转录调控的作用,从而对病原菌的致病力产生影响。 毛超 戴青冬 杨腊英 汪军 黄俊生关键词:生物信息学分析 香蕉枯萎病菌MAPK信号通路中Fomps1基因的研究 香蕉枯萎病(Fusarium wilt of banana),又称香蕉巴拿马病或黄叶病,是危害香蕉生长最重要的病害之一。它是由一种真菌名为尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f. sp. cube... 戴青冬关键词:香蕉枯萎病菌 致病力 文献传递 香蕉枯萎病菌4号生理小种农杆菌介导遗传转化体系的建立及T-DNA插入突变体的筛选 被引量:6 2013年 【目的】通过农杆菌介导的遗传转化(ATMT)方法,建立香蕉枯萎病4号生理小种的高效转化体系,构建病原菌的突变体库并进行筛选,为已突变基因提供分子标记,在分子水平上对香蕉枯萎病菌的功能基因进行深入研究。【方法】通过单因子变量(试验材料、真菌孢子浓度、农杆菌预诱导终浓度、IM诱导培养基pH、共培养介质、共培养时AS浓度、共培养温度)试验,研究影响农杆菌介导的遗传转化效率的关键因素,并通过形态观察与致病性试验筛选突变体。【结果】得到的最佳转化条件为:农杆菌预诱导浓度OD600=0.8,病原菌孢子浓度106 CFU/mL,转化受体材料为分生孢子,共培养培养基pH 5.4,共培养温度25 ℃,共培养培养基中AS浓度200 μmol/L,共培养介质为硝酸纤维素膜。通过条件优化,转化效率可达到800-900个转化子/106个孢子。【结论】通过农杆菌介导的遗传转化成功将GFP基因转入病原菌中并表达,构建了病原菌的T-DNA插入突变体库,并通过筛选得到多个表型和致病性发生变化的突变体,为香蕉枯萎病菌基因组功能注释的研究奠定了基础。 毛超 戴青冬 汪军 刘一贤 杨腊英 郭立佳 黄俊生关键词:香蕉枯萎病菌4号生理小种 农杆菌转化 GFP基因 香蕉枯萎病菌中Hog1 MAPK同源基因FoHog1敲除突变体的生物学特性 被引量:2 2014年 【目的】研究香蕉枯萎病菌4号生理小种中促分裂原活化蛋白激酶基因FoHog1的结构特点及其功能【方法】通过PCR和RT-PCR的方法获得了FoHog1基因序列并进行生物信息学分析,利用PEG介导的原生质体转化法得到了FoHog1基因缺失突变体,分析敲除突变体与野生型的生物学特性差异【结果】FoHog1基因编码一个含有357个氨基酸的蛋白,该蛋白在不同种镰刀菌中高度保守。通过对敲除突变体的研究发现,该基因缺失后菌丝密度下降,产孢量与菌丝干重明显降低,对乙酸钠和氯化铵的利用率下降,对温度、pH及渗透压等外源胁迫更为敏感。通过致病力实验发现,基因敲除突变体的定殖能力有所降低【结论】尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种中FoHog1基因参与调控菌丝生长、分生孢子生成、乙酸钠和氯化铵代谢、渗透压胁迫反应及致病相关过程。 毛超 陈平亚 戴青冬 杨腊英 黄俊生关键词:香蕉枯萎病菌 生物学特性 两株抗香蕉枯萎病生防菌的筛选与生防效应研究 被引量:7 2014年 筛选获得高效生防枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)BLG01和BDF11,并通过小区试验测定施用BLG01和BDF11与有机液肥对香蕉生长、枯萎病病情指数、枯萎病病原菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,FOC)与可培养细菌数量的影响.室内试验结果表明,BLG01和BDF11对香蕉枯萎病病原菌的抑制率分别达70.4%和77.2%.小区试验结果表明,在香蕉移栽100 d时,各试验处理均能能促进香蕉生长和提高控病作用,其中以BLG01和BDF11与有机液肥同时施用[LOF(BL1+BDF1 1)]的防病作用最显著,香蕉株高、茎围、地上部、地下部鲜和防效显著提高,联合处理病情指数下降了45.39%~65.87%,根际FOC的logCFU降低40.5%~50.1%,可培养细菌数量的logCFU增加25.8%~32.8%;FOC与根际可培养细菌数量呈极显著负相关关系,与病情指数呈极显著正相关关系.结果表明,枯草芽胞杆菌配施有机液肥可促进香蕉生长,降低枯萎病病原菌数量,提高根际可培养细菌数量,增加对香蕉枯萎病的防治效果,具有较大的应用前景. 戴青冬 汪军 邢益范 陈平亚 毛超 王飞燕 黄俊生关键词:香蕉枯萎病 有机液肥 芽胞杆菌 生物防治 施用枯草芽孢杆菌与覆盖对香蕉生长与枯萎病防治的作用 被引量:4 2014年 通过随机区组试验,研究了施用枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)BLG01与覆盖对香蕉长势、枯萎病病情指数、枯萎病病原菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,FOC)与可培养细菌数量的影响.结果表明,与对照比较,在香蕉移栽100 d时,不同覆盖模式下,施用BLG01能促进香蕉生长和提高枯萎病防治作用,其中以玉米覆盖与共同施用BLG01防治作用最显著,香蕉株高、茎围、地上部、地下部鲜重和防效显著提高,病情指数下降了43.07%~60.56%,根际FOC的logCFU降低了72.15%~131.18%,可培养细菌数量的logCFU增加了31.21%~35.02%;相关性分析表明,FOC与细菌数量呈显著负相关关系,与病情指数呈极显著正相关关系.施用枯草芽胞杆菌结合覆盖可促进香蕉生长,降低枯萎病病原菌数量,提高根际可培养细菌数量,增加对香蕉枯萎病的防治效果. 陈平亚 汪军 景晓辉 戴青冬 张剑伟 曹智淳 黄俊生关键词:枯草芽胞杆菌 香蕉枯萎病